丁文慧 郝會(huì)軍 劉新輝

天然番茄紅素，又名番茄烴，是一種天然脂溶性植物色素，具有多種重要的生理功能。目前，天然番茄紅素的提取方法存在有機(jī)溶劑殘留、提取成本高、操作復(fù)雜等問題。本文在對(duì)番茄原料預(yù)處理工藝研究的基礎(chǔ)上，提供了一種利用番茄自有酶反應(yīng)提取天然番茄紅素的方法。提取過程簡(jiǎn)單、操作方便，彌補(bǔ)了現(xiàn)有提取方法的不足。

儀器和試劑

儀器。TU1901紫外可見分光光度計(jì)。

試劑。氫氧化鈉、氫氧化鉀、無水乙醇、蘇丹Ⅰ標(biāo)準(zhǔn)品。

試驗(yàn)方法

番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品價(jià)格昂貴，見光易分解。因蘇丹I標(biāo)準(zhǔn)品與番茄紅素有相似的特征吸收峰，故用蘇丹I代替番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)GB/ T14215- 2008，以無水乙醇為空白，在485nm下測(cè)定吸光值并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

天然番茄紅素的提取。（1）番茄預(yù)處理方法。建立單因素試驗(yàn)，利用不同濃度（0.1、0.2、0.5、0.8、1.0mol/L）的KOH溶液，在不同溫度（50、55、60、65、70℃）下，皂化不同時(shí)間（10、20、30、40、50min）后，加入稀硫酸中和至pH4- 5。稀釋所得濾液測(cè)定其吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算番茄紅素的提取率。（2）天然番茄紅素的制備。樣品經(jīng)皂化處理后，建立單因素試驗(yàn)，在不同溫度（40、45、50、55、60℃），不同時(shí)間（30、60、90、120、150min），微堿性（pH7.0、pH7.5、pH8.0、pH8.5）條件下，使成熟番茄果實(shí)中的果膠和纖維素在自身酶的作用下分解，天然番茄紅素蛋白復(fù)合物從細(xì)胞中溶出，得到散性色素。稀釋所得濾液測(cè)定其吸光值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算番茄紅素的提取率。

結(jié)果與分析

番茄紅素特征光譜的確定。將提取液置于200nm- 600nm波長下，通過紫外可見光掃描，得圖1。

從圖1可知，吸收光譜的最大吸收峰為485nm，與番茄紅素的特征吸收峰一致。

番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。根據(jù)GB/ T14215- 2008測(cè)定吸光值并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得圖2。

樣品預(yù)處理?xiàng)l件對(duì)番茄紅素提取率的影響。樣品預(yù)處理方法可能是影響天然番茄紅素提取率的最主要因素。番茄果實(shí)中含有的大量水分是影響與水不混溶的有機(jī)溶劑同疏水性番茄紅素接觸的最主要原因，這極大地影響了番茄紅素的提取效果。

通過單因素實(shí)驗(yàn)，對(duì)皂化反應(yīng)工藝進(jìn)行優(yōu)化。番茄樣品預(yù)處理?xiàng)l件為KOH濃度為0.5mol/L，皂化時(shí)間為30min，皂化溫度為65℃時(shí)，皂化反應(yīng)能有效的去除番茄中的各種游離脂肪酸及大部分脂肪酸甘油酯，釋放出其中包含的番茄紅素。

不同提取條件對(duì)番茄紅素提取率的影響。通過單因素實(shí)驗(yàn)，對(duì)番茄紅素提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。在微堿性條件下（pH7.5），溫度為50℃，反應(yīng)時(shí)間為60min時(shí)，番茄紅素的提取率為3.126mg/g。

通過以上試驗(yàn)可知：樣品經(jīng)皂化處理后，利用番茄自有酶反應(yīng)提取天然番茄紅素，用蘇丹I標(biāo)準(zhǔn)品代替番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品，通過紫外可見分光光度法測(cè)定試樣中番茄紅素的含量。此方法不僅降低了試驗(yàn)成本，而且提取過程簡(jiǎn)單、操作方便，經(jīng)濟(jì)效益良好，彌補(bǔ)了現(xiàn)有提取方法的不足。

作者簡(jiǎn)介：

丁文慧（1988-），女，吉林人，助教，主要研究方向：植物功能性成分提取。