裴洪利

【摘要】 目的 探討可溶性核抗原（ENA）多肽抗體免疫功能檢測在自身免疫性疾病（AID）中的應(yīng)用價值。方法 198例AID患者， 其中系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）99例， 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）45例， 干燥綜合征（SS）24例， 混合性結(jié)締組織病（MCTD）12例， 系統(tǒng)性硬化癥（PSS）8 例， 自身免疫性肝炎（AIH）6例， 特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）4例。另選取40例健康體檢者作為對照組， 均進(jìn)行ENA多肽抗體免疫功能檢測。觀察不同類型AID患者及對照組不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測結(jié)果。結(jié)果 SLE患者的抗核小體抗體（抗NKS）陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗組蛋白抗體（抗His）陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗干燥綜合征A抗體（抗SS-A）陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗硬皮病抗原70抗體（抗Scl-70）陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。結(jié)論 ENA多肽抗體免疫功能檢測可以作為AID的重要篩查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗體的應(yīng)用敏感度更高。

【關(guān)鍵詞】 自身免疫性疾病;可溶性核抗原多肽抗體免疫功能檢測;可溶性核抗原

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.23.037

自身免疫性疾?。╝utoimmune disease， AID）是一種由免疫反應(yīng)引發(fā)的機體相關(guān)組織受到功能障礙或損害的疾病， 目前醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為AID的發(fā)病機制與自身抗原發(fā)生改變、免疫調(diào)節(jié)異常、交叉抗原和遺傳因素有著密不可分的關(guān)系[1]。臨床上針對AID的診斷多以相關(guān)免疫功能檢測為主， 但由于該病可表現(xiàn)為多種疾病類型， 不僅各類型之間具有不同的特異性， 同時機體會產(chǎn)生不同抗原類型抗體， 但目前此方面相關(guān)研究較少[2]。本研究旨在通過分析不同類型的AID患者免疫功能檢測結(jié)果， 探討其診斷意義， 為臨床診斷和治療提供指導(dǎo)， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2017年1月～2018年12月本院檢驗科進(jìn)行ENA多肽抗體免疫功能檢測的198例AID患者， 納入標(biāo)準(zhǔn)：①結(jié)合病史、臨床診斷后通過抗體檢測確診為AID[3];②年齡20～70歲;③意識清晰， 擁有一定的理解和認(rèn)知能力;④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①哺乳期以及妊娠期或計劃6個月內(nèi)妊娠;②心、肝、腎功能障礙或不全;③入組前已接受相關(guān)治療;④存在血液性疾病或惡性腫瘤病史。所有患者中， 男73例， 女125例;年齡26～65歲， 平均年齡（46.82±8.54）歲;其中20～30歲18例， 31～40歲36例， 41～50歲52例， 51～60歲53例， >60歲39例;疾病類型：SLE 99例， RA 45例， SS 24例， MCTD 12例， PSS 8 例， AIH 6例， ITP 4例。另選取同期的健康體檢者40例作為對照組。

1. 2 方法 ①所有患者取清晨空腹靜脈血5 ml， 以2500 r/min

的速率進(jìn)行離心5 min， 分離血清， 置于非抗凝真空管內(nèi)按照1∶100的比例進(jìn)行稀釋血清備用。②采用蛋白免疫印跡法和相關(guān)試劑盒（深圳市亞輝龍生物科技有限公司）進(jìn)行ENA多肽抗體免疫功能檢測， 取出抗原膜條和孵育緩沖液1 ml置入試劑反應(yīng)槽， 待抗原膜條完全浸濕后1 min加入稀釋血清樣本1 ml， 在約25℃的室溫下通過搖床進(jìn)行孵育30 min后加入稀釋洗滌劑1.5 ml進(jìn)行反復(fù)洗滌3次以去除未結(jié)合的蛋白， 洗滌時間約5 min/次， 加入稀釋過山羊抗辣根過氧化物酶（稀釋比例1∶100）再次孵育30 min、反復(fù)洗滌3次后加入四甲基聯(lián)苯胺（TMB）底部溶液充分反應(yīng)后使用蒸餾水進(jìn)行沖洗， 將抗原膜條置入濾紙中等待干燥后與試劑盒配套的特異判讀卡進(jìn)行比較， 比較抗核糖核蛋白抗體（抗nRNP）、抗Smith抗體（抗Sm）、抗Scl-70、抗SS-A、抗干燥綜合征B抗體（抗SS-B）、抗多發(fā)性肌炎-硬化癥抗體（抗PM-Scl）、抗多發(fā)性肌炎/皮肌炎標(biāo)記抗體（抗JO-1）、抗雙鏈脫氧核糖核酸抗體（抗dsDNA）、抗增殖細(xì)胞核抗原抗體（抗PCNA）、抗著絲點蛋白B抗體（抗CENP-B）、抗NKS、抗核糖體P蛋白抗體（抗Rib-P）、抗His和抗線粒體抗體-M2亞型（AMM-M2）共14種不同抗原免疫球蛋白G（IgG）類抗體的免疫功能檢測結(jié)果。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察不同類型AID患者及對照組不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測結(jié)果。

2 結(jié)果

SLE患者的抗NKS陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗His陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。見表1。

3 討論

AID根據(jù)臨床表現(xiàn)而不同可分為器官特異性AID和系統(tǒng)性AID， 后者多由于機體的抗原抗體長期在血管壁內(nèi)沉積等原因?qū)е露嗥鞴侔l(fā)生膠原纖維增生從而受損， 常見的類型包括SLE、RA、系統(tǒng)性血管炎（SV）、SS、MCTD、PSS、皮肌炎（DM）、AIH和ITP等， 如未得到及時治療會導(dǎo)致病情發(fā)展迅速， 誘發(fā)多種并發(fā)癥， 對患者的生活質(zhì)量帶來嚴(yán)重影響， 致殘率和致死率均較高[4]。

抗ENA抗體具體可分為可溶于等滲鹽水的抗原（主要包括nRNP、Sm、Scl-70、SS-A、SS-B、PM-Scl、JO-1等）和不可溶于等滲鹽水的抗原（主要包括dsDNA、PCNA、CENP-B、NKS、Rib-P、His、AMA-M2等）兩種IgG類抗體[5]。本研究通過對198例不同類型AID患者及40例對照組進(jìn)行不同抗原IgG類抗體的免疫功能檢測發(fā)現(xiàn)， SLE患者的抗NKS陽性檢出率為96.97%（96/99）， RA患者的抗His陽性檢出率為46.67%（21/45）， SS患者的抗SS-A陽性檢出率為66.67%（16/24）， MCTD患者的抗SS-A陽性檢出率為58.33%（7/12）， PSS患者的抗Scl-70陽性檢出率為62.50%（5/8）， AIH患者的抗SS-A陽性檢出率為50.00%（3/6）， ITP患者的抗Scl-70陽性檢出率為75.00%（3/4）。上述結(jié)果說明， 不同類型AID患者的抗體特異性指標(biāo)不同， 這是由于抗體滴度與疾病活動性有關(guān)， 據(jù)劉萍[6]的研究證實， AID患者具有多種自身抗體， 進(jìn)行ENA抗體檢測能為病情的診斷和鑒別提供重要依據(jù)， 其結(jié)果與本研究結(jié)果基本一致。

綜上所述， ENA多肽抗體免疫功能檢測可以作為AID的重要篩查手段， 尤其是NKS、SS-A、Scl-70抗體的應(yīng)用敏感度更高。

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[收稿日期：2019-05-24]