林雅，章金明，陳楊柳，劉敏，呂要斌

(1.浙江師范大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，浙江 金華 321004；2.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)與微生物研究所，浙江 杭州 310021)

寄生蜂是地球上物種多樣性最為豐富的昆蟲(chóng)類(lèi)群之一，它們?cè)谏餇I(yíng)養(yǎng)關(guān)系網(wǎng)上扮演著重要的角色，其中許多種類(lèi)對(duì)農(nóng)林經(jīng)濟(jì)害蟲(chóng)的自然控制起著重要的作用。麗蚜小蜂(Encarsiaformosa)隸屬膜翅目(Hymenpotera)蚜小蜂科(Aphelinidae)恩蚜小蜂屬(Encarsia)，主要寄生粉虱類(lèi)害蟲(chóng)，分布于溫度較高、濕度較大的熱帶和亞熱帶地區(qū)[1]。目前全球已有30多個(gè)國(guó)家開(kāi)展了對(duì)麗蚜小蜂的研究并廣泛應(yīng)用其控制蟲(chóng)害，我國(guó)于1978年從英國(guó)引進(jìn)該項(xiàng)技術(shù)。直至目前，我國(guó)在麗蚜小蜂的工廠化和規(guī)?；庇?，以及實(shí)際應(yīng)用方面已取得了顯著進(jìn)展，麗蚜小蜂在控制害蟲(chóng)中的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛[2]。天敵昆蟲(chóng)可對(duì)蟲(chóng)害進(jìn)行防治，而田間除了蟲(chóng)害之外還存在嚴(yán)重病害，需要使用殺菌劑進(jìn)行防治。而殺菌劑的施用可能會(huì)對(duì)天敵昆蟲(chóng)造成傷害，因此，需要開(kāi)展殺菌劑對(duì)麗蚜小蜂的安全性評(píng)價(jià)。

國(guó)內(nèi)外已有關(guān)于化學(xué)農(nóng)藥對(duì)麗蚜小蜂影響的研究[3-5]。目前，枯草芽孢桿菌(生物制劑)、咪鮮胺錳鹽、春雷霉素、咪鮮胺、乙蒜素、嘧菌酯和嗎胍·辛菌胺這7種農(nóng)田常用的殺菌劑對(duì)麗蚜小蜂的影響還未見(jiàn)報(bào)道。因此，本文通過(guò)測(cè)定這7種藥劑對(duì)麗蚜小蜂的急性毒性，并參考各藥劑的田間推薦劑量，對(duì)其進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)，明確各試驗(yàn)藥劑對(duì)麗蚜小蜂的毒性，以期為田間合理用藥、協(xié)調(diào)生物防治與化學(xué)防治的關(guān)系提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試蟲(chóng)來(lái)源與繁育方法

供試麗蚜小蜂由河北省衡水市農(nóng)林科學(xué)院旱作農(nóng)業(yè)研究所提供，用被寄生的白粉虱蛹繁蜂。試驗(yàn)時(shí)先將麗蚜小蜂的蛹卡分別剪下放入洗凈烘干的平底玻璃試管(長(zhǎng)度為8 cm，直徑為2 cm)中，用黑布封口。在溫度為(27±1)℃，濕度為60%～80%，光周期12 h∶12 h(L/D)人工氣候箱中培養(yǎng)，在其羽化后用濃度為10%的蜂蜜水進(jìn)行飼喂。取24 h內(nèi)羽化的成蜂用于試驗(yàn)。

1.1.2 供試藥劑

供試藥劑選擇登記用于防治辣椒、黃瓜、番茄等作物主要病害的7種常用農(nóng)藥：50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑，每667 m230～40 g，江蘇輝豐農(nóng)化股份有限公司；2%春雷霉素可濕性粉劑，1 000～1 500倍液，青島海納生物科技有限公司；100億孢子·g-1枯草芽孢桿菌可濕性粉劑，每667 m2100～120 g，佛山市盈輝作物科學(xué)有限公司；45%咪鮮胺乳油，每667 m220～30 mL，北京中農(nóng)研創(chuàng)高科技有限公司；80%乙蒜素乳油，3 000～4 000倍液，河南科邦化工有限公司；30%嘧菌酯懸浮劑，1 000～1 350倍液，河北野田農(nóng)用化學(xué)有限公司；5.9%嗎胍·辛菌胺水劑，每667 m2152.5～222.5 mL，廣東中迅農(nóng)科股份有限公司。

1.2 處理設(shè)計(jì)

參照GB/T 31270—2014《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》，采用藥膜法。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，正式試驗(yàn)設(shè)置5個(gè)濃度：咪鮮胺錳鹽1 333.33、666.67、333.33、166.67、83.33 mg·L-1，春雷霉素400、200、100、50、25 mg·L-1，枯草芽孢桿菌0.4、0.2、0.1、0.05、0.03 mg·L-1，咪鮮胺225、112.5、56.25、28.13、14.06 mg·L-1，乙蒜素1 600、800、400、200、100 mg·L-1，嘧菌酯60、30、15、7.5、3.75 mg·L-1，嗎胍·辛菌胺393.33、196.67、98.33、49.17、24.58 mg·L-1，以水作對(duì)照處理，每個(gè)濃度重復(fù)4次，每個(gè)重復(fù)30±5頭麗蚜小蜂。參照各藥劑的田間推薦劑量，以從高到低的濃度順序配制藥液。用移液槍準(zhǔn)確吸取0.1 mL藥液加入到西林瓶(規(guī)格為30 mL)內(nèi)，使其在西林瓶?jī)?nèi)滾動(dòng)、吸附直至覆蓋到瓶中每一處，然后放在烤腸機(jī)上繼續(xù)滾動(dòng)晾干制成藥膜管，并用記號(hào)筆做好標(biāo)記。在燈光下利用趨光性將麗蚜小蜂轉(zhuǎn)入藥膜管中，待成蜂在藥膜管中爬行1 h后，轉(zhuǎn)入無(wú)藥的指形管(長(zhǎng)度為8 cm，直徑為2 cm)中，用黑布封緊管口，并飼喂10%蜂蜜水。將指形管倒置放入泡沫箱中，轉(zhuǎn)入溫度為(26±1)℃，相對(duì)濕度為60%～80%，光周期12 h∶12 h(L/D)的人工氣候箱內(nèi)。24 h后在燈下檢查并記錄各管中死亡(燈光下用小毛筆輕觸不動(dòng)即視為死蜂)和存活的蜂數(shù)。對(duì)照組死亡率應(yīng)不超過(guò)10%。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算毒力回歸方程的斜率、LC50值及其95%置信限。

2 結(jié)果與分析

從表1可得，這7種殺菌劑中枯草芽孢桿菌對(duì)麗蚜小蜂成蜂的毒性最強(qiáng)，LC50為0.07 mg·L-1；其次為嘧菌酯，其LC50為7.82 mg·L-1；再次為嗎胍·辛菌胺、咪鮮胺、春雷霉素，其LC50分別為36.60、38.16、89.49 mg·L-1；乙蒜素和咪鮮胺錳鹽對(duì)麗蚜小蜂的毒性較弱，其LC50分別為362.93、1 006.76 mg·L-1。

表1 殺菌劑對(duì)麗蚜小蜂的室內(nèi)毒性

為進(jìn)一步分析各藥劑對(duì)麗蚜小蜂的毒性高低與差異性，將各藥劑的LC50與各藥劑的田間推薦劑量作對(duì)比可以得到如下結(jié)果(表2)。在7種藥劑中，只有咪鮮胺錳鹽的LC50為1 006.76 mg·L-1，遠(yuǎn)高于其田間推薦劑量333.33 mg·L-1，其他6種藥劑(春雷霉素、枯草芽孢桿菌、咪鮮胺、乙蒜素、嘧菌酯、嗎胍·辛菌胺)的LC50均遠(yuǎn)低于其田間推薦劑量，其中麗蚜小蜂成蜂對(duì)枯草芽孢桿菌和嘧菌酯最為敏感。嘧菌酯的田間推薦劑量為120 mg·L-1，田間推薦劑量的致死率高達(dá)100%；春雷霉素和咪鮮胺2種藥劑的田間推薦劑量分別為200、112.5 mg·L-1，兩者田間推薦劑量的致死率均超過(guò)80%，對(duì)麗蚜小蜂的毒性很強(qiáng)；枯草芽孢桿菌、嗎胍·辛菌胺和乙蒜素3種藥劑的田間推薦劑量分別為0.2、196.67、800 mg·L-1，三者田間推薦劑量的致死率均超過(guò)70%，對(duì)麗蚜小蜂成蜂有較強(qiáng)的毒性。

表2 各種殺菌劑的LC50與田間推薦劑量對(duì)比表

3 討論

目前，農(nóng)作物的蟲(chóng)害和病害情況都較為嚴(yán)重，我們需要兼顧兩者的防治。在采用天敵昆蟲(chóng)防治蟲(chóng)害時(shí)，我們需要考慮到治理病害的藥劑是否會(huì)對(duì)天敵產(chǎn)生影響，以及影響的嚴(yán)重程度。與其他農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)相比，由于天敵昆蟲(chóng)多為經(jīng)人工飼養(yǎng)繁殖后釋放到自然環(huán)境中，其抗藥能力較低。一般而言，麗蚜小蜂成蜂對(duì)各藥劑最為敏感，藥劑對(duì)成蜂的致死率高于其他發(fā)育階段；蛹期由于受到蛹?xì)さ谋Ｗo(hù)，相較其他蟲(chóng)態(tài)藥劑對(duì)其的影響力最小，致死率也比較低；卵和幼蟲(chóng)期受藥劑的影響也比成蟲(chóng)小[6-8]。

綜合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在所評(píng)估的7種藥劑中，春雷霉素、枯草芽孢桿菌、咪鮮胺、乙蒜素、嘧菌酯、嗎胍·辛菌胺的LC50均遠(yuǎn)低于其田間推薦劑量，對(duì)麗蚜小蜂成蜂均有較強(qiáng)的觸殺作用。參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》中農(nóng)藥對(duì)赤眼蜂風(fēng)險(xiǎn)性等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)，這6種藥劑對(duì)麗蚜小蜂安全系數(shù)均大于0.5且小于5，屬于中等風(fēng)險(xiǎn)性藥劑，因此，在田間釋放麗蚜小蜂時(shí)應(yīng)避免這6種藥劑的使用。同樣，在施用上述6種藥劑后不應(yīng)立即釋放麗蚜小蜂進(jìn)行控害。咪鮮胺錳鹽對(duì)麗蚜小蜂成蜂的影響較小，測(cè)得其LC50為1 006.78 mg·L-1，遠(yuǎn)高于其田間推薦劑量333.33 mg·L-1，其田間推薦劑量的致死率略高于30%，其安全系數(shù)大于5，屬于低風(fēng)險(xiǎn)性藥劑，在釋放麗蚜小蜂的田中可適當(dāng)使用。

此外，在本實(shí)驗(yàn)中也證明相較其他6種殺菌劑，枯草芽孢桿菌這一微生物源農(nóng)藥對(duì)麗蚜小蜂成蜂有較高的毒力，在田間釋放麗蚜小蜂時(shí)應(yīng)停止該藥劑使用。同時(shí)，比較咪鮮胺和咪鮮胺錳鹽2種藥劑，二者均含有“咪鮮胺”這一有效成分，且二者的有效成分含量相近，前者為45%、后者為50%。由于咪鮮胺的劑型為乳油、咪鮮胺錳鹽為可濕性粉劑，在加水配制成溶液的過(guò)程中存在溶解性的差異，再加上后者由咪鮮胺與氯化錳復(fù)合而成，在水溶液或懸浮液中,2種成分會(huì)很快分離，氯化錳可以為植物提供微量元素“錳”，所以二者對(duì)麗蚜小蜂成蜂的毒性強(qiáng)弱存在較大差異。為減少藥劑對(duì)麗蚜小蜂的損害，建議在田間使用時(shí)，在同等外界條件、作物受害程度相近的情況下可以考慮多選用咪鮮胺錳鹽，減少使用咪鮮胺。

在應(yīng)用麗蚜小蜂開(kāi)展生物防治的同時(shí)，可適當(dāng)使用咪鮮胺錳鹽治理病害,春雷霉素、咪鮮胺、乙蒜素、嗎胍·辛菌胺急性毒性較高，建議可在釋放麗蚜小蜂5日后進(jìn)行施用，而枯草芽孢桿菌和嘧菌酯的施用時(shí)間應(yīng)當(dāng)和麗蚜小蜂的釋放時(shí)間間隔起碼7 d以上。