周曉肖，李偉龍

(1.臨海市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，浙江 臨海 317000；2.臨海市人民政府蔬菜辦公室，浙江 臨海 317000)

青花菜(Brassicaoleracea)又稱西蘭花、綠菜花、花菜薹等，屬十字花科蕓薹屬甘藍(lán)變種，一二年生宿根草本植物[1]。十字花科作物根腫病(clubroot disease)是由專性寄生菌蕓薹根腫菌(Plasmodiophorabrassicae)侵染引起的一種土傳病害[2]，病菌休眠孢子在酸性土壤中可存活10 a以上，抗逆性極強(qiáng)[3]。擴(kuò)散到世界各地的根腫菌每年引起10%～15%的產(chǎn)量損失[4]，為十字花科作物最重要的病害之一。早在1936年，我國(guó)臺(tái)灣就有大白菜根腫病發(fā)生的報(bào)道。1995年傳入大陸后，目前在遼寧、北京、湖南、福建、江西、江蘇、安徽、上海、河北、山東、浙江、新疆、四川、重慶、湖北、云南、貴州、廣東和廣西等省市自治區(qū)均有分布，一般發(fā)生損失在20%左右，發(fā)生嚴(yán)重的損失達(dá)80%以上[5]。病害最典型的癥狀表現(xiàn)在根部，呈紡錘形、球形、瘤狀或棒狀的腫塊，少則零星出現(xiàn)，多則相互連接成片并覆蓋整個(gè)根系[6]。植株地上部分生長(zhǎng)遲緩、缺水萎蔫，嚴(yán)重時(shí)全株枯死，產(chǎn)量和品質(zhì)受損[7]?；瘜W(xué)防治是目前普遍采用的防治方法。據(jù)報(bào)道，多菌靈、百菌清、五氯硝基苯、氟啶胺、氰霜唑等對(duì)根腫病均有一定防效[8]。噻唑鋅是浙江新農(nóng)化工股份有限公司研制的高效、低毒的噻唑類有機(jī)鋅殺菌劑，具有活性高、殺菌譜廣、劑型先進(jìn)、對(duì)作物安全等特點(diǎn)，兼有保護(hù)和內(nèi)吸殺菌治療作用[9]。本試驗(yàn)通過(guò)青花菜移栽后用噻唑鋅澆根的方式進(jìn)行防治，探索其對(duì)青花菜根腫病的防效。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)在杜橋鎮(zhèn)上林村陳永賞青花菜地進(jìn)行，株行距45 cm×50 cm，土壤pH值約6.5，粘性海涂地，前茬水稻，管理常規(guī)。供試作物為青花菜品種綠雄90，8月28日穴盤播種，9月28日移栽，苗齡31 d。

藥劑有20%噻唑鋅懸浮劑(碧生，浙江新農(nóng)化工有限公司)；50%氟啶胺懸浮劑(農(nóng)割，先正達(dá)(中國(guó))投資有限公司)。用RC-4HC溫濕度記錄儀記錄試驗(yàn)期間土壤10 cm深度溫濕度情況，記錄間隔時(shí)間為1 h。

1.2 處理設(shè)計(jì)

1.2.1 噻唑鋅施藥次數(shù)試驗(yàn)

設(shè)667 m2施用噻唑鋅1 000 mL，移栽后3 d、3 d+15 d、3 d+30 d，以及施用氟啶胺300 mL，移栽后3 d、3 d+15 d、3 d+30 d和清水對(duì)照(CK)共7個(gè)處理。采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，區(qū)組內(nèi)每小區(qū)100株青花菜，每667 m2施藥量均為450 kg，每株每次藥液量約150 mL。

1.2.2 噻唑鋅施藥劑量試驗(yàn)

設(shè)667 m2施用噻唑鋅500、1 000、1 500、2 000 mL不同劑量于移栽后3 d施藥，以及CK共5個(gè)處理，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，區(qū)組內(nèi)每小區(qū)100株青花菜，每667 m2施藥量均為450 kg，每株每次藥液量約150 mL。

1.2.3 噻唑鋅施藥時(shí)期試驗(yàn)

設(shè)667 m2施用噻唑鋅1 000 mL，于移栽后0(當(dāng)天)、3、7、14、21、28 d施藥及CK共7個(gè)處理。采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次，區(qū)組內(nèi)每小區(qū)100株青花菜，每667 m2施藥量均為450 kg，每株每次藥液量約150 mL。

1.3 調(diào)查及數(shù)據(jù)分析

于2019年1月18—19日花球采收末期，每小區(qū)隨機(jī)挖出30株，調(diào)查青花菜根腫病發(fā)病情況。

根腫病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)采用郭向華[10]的方法，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下。0級(jí)：根部無(wú)腫大；1級(jí)：主根腫大，其直徑小于2倍莖基，或須根有小腫瘤；3級(jí)：主根腫大，其直徑為莖基的2～3倍；5級(jí)：主根腫大，其直徑為莖基的3～4倍；7級(jí)：主根腫大，其直徑為莖基的4倍以上。計(jì)算各小區(qū)病情指數(shù)和防治效果。

采用Excel 2010軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理；采用SPSS 21.0軟件鄧肯氏新復(fù)極差法(DMRT)模塊進(jìn)行多重比較、相關(guān)系數(shù)及線性回歸分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗(yàn)期間土壤溫濕度情況

由圖1可知，青花菜移栽后至10月6日(移栽后8 d)，土壤相對(duì)濕度(RH)在44.0%～58.5%，較低；到11月初偶有少量降雨，RH在63.9%～86.7%波動(dòng)；之后雨日頻繁，RH高，在90%左右。移栽后至10月9日，土壤溫度在22～25 ℃；從11月10日至12月6日，土壤溫度在12.2～20.9 ℃；12月7日開始降溫，常處于10 ℃以下。

圖1 試驗(yàn)期間土壤10 cm深處的溫濕度狀況

2.2 不同施藥次數(shù)的防效

由表1可知，青花菜移栽后2次處理對(duì)根腫病防效優(yōu)于1次處理，且差異極顯著。667 m2施氟啶胺300 mL的防效優(yōu)于噻唑鋅1 000 mL，兩者相同時(shí)期、相同施藥次數(shù)的處理防效間差異極顯著；667 m2施氟啶胺300 mL移栽后3 d+30 d處理防效最佳，達(dá)到94.9%，與3 d+15 d處理差異不顯著；噻唑鋅1 000 mL處理在移栽后3 d+30 d、3 d+15 d的防效分別為68.4%、66.2%，未及氟啶胺300 mL，且差異不顯著；噻唑鋅1 000 mL處理移栽后3 d防效最低，僅有43.0%。

2.3 不同施藥劑量的防效

表1 噻唑鋅施藥次數(shù)對(duì)青花菜根腫病防效

注：不同大、小寫字母分別表示0.01和0.05水平差異顯著，表2～3同。

由表2可知，噻唑鋅不同劑量處理對(duì)青花菜根腫病防效不同，高劑量處理防效優(yōu)于低劑量處理。667 m2施用噻唑鋅1 000～2 000 mL，對(duì)青花菜根腫病防效為42.1%～47.2%，隨著劑量增加，防效略有提高，但差異不顯著；噻唑鋅500 mL處理防效最低，與其他處理差異達(dá)極顯著。

表2 噻唑鋅不同劑量對(duì)青花菜根腫病防效

噻唑鋅不同劑量處理同防效的相關(guān)性分析可知，防效(Y)隨劑量(X)的增加而增加，兩者呈極顯著線性正相關(guān)，r=0.866**，R2=0.750**，Y=4.289X+31.414。

2.4 不同施藥時(shí)期的防效

由表3可知，667 m2施用噻唑鋅1 000 mL，不同施藥時(shí)期對(duì)青花菜根腫病防效不同，處理越早防效越好。移栽后0和3 d防效最佳，兩者差異不顯著；其次為移栽后7 d，防效優(yōu)于其余3個(gè)處理，且差異極顯著；移栽后28 d處理防效最低，僅有17.9%。

表3 噻唑鋅施藥時(shí)間對(duì)青花菜根腫病防效

噻唑鋅不同時(shí)期處理同防治效果的相關(guān)性分析可知，防效(Y)隨移栽后施藥時(shí)期(X)的增加而減小，兩者呈極顯著線性負(fù)相關(guān)，r=0.946**，R2=0.894**，Y=-5.619X+50.567。

2.5 噻唑鋅對(duì)青花菜的安全性

試驗(yàn)期間未發(fā)現(xiàn)噻唑鋅對(duì)青花菜植株有明顯藥害現(xiàn)象。

3 小結(jié)與討論

噻唑鋅對(duì)青花菜根腫病有一定防效，667 m2施1 000 mL，移栽后3 d用藥1次處理效果不理想，移栽后3 d+15 d、3 d+30 d 2次用藥處理效果明顯提高，達(dá)到66.2%～68.4%，但不及農(nóng)業(yè)部已登記用于防治根腫病的氟啶胺；噻唑鋅移栽后3 d不同劑量處理對(duì)青花菜根腫病防效有差異，但1 000 mL與更高劑量處理相比差異不顯著，其可作為防治根腫病的適宜劑量；1 000 mL處理移栽后不同時(shí)期施藥防效有差異，處理越早防效越好，移栽當(dāng)天和3 d處理防效最佳，相比其他處理差異顯著或極顯著。

根腫菌的生活史由根毛侵染和皮層侵染2個(gè)侵染階段組成。初級(jí)侵染由休眠孢子開始，土壤中的休眠孢子萌發(fā)后，釋放出初級(jí)游動(dòng)孢子，吸附到寄主根毛細(xì)胞外壁。接著游動(dòng)孢子將原生質(zhì)體注入寄主細(xì)胞質(zhì)中，在寄主細(xì)胞中，根腫菌變形體進(jìn)行核內(nèi)有絲分裂，形成一個(gè)多核的初級(jí)原質(zhì)團(tuán)。隨后初級(jí)原質(zhì)團(tuán)割裂為游動(dòng)孢子囊，囊內(nèi)分化出大量次級(jí)游動(dòng)孢子[11]。成熟的次級(jí)游動(dòng)孢子或者釋放到根際周圍，從外部對(duì)皮層細(xì)胞進(jìn)行侵染，或者直接在根毛細(xì)胞內(nèi)部轉(zhuǎn)移，侵染相鄰的皮層細(xì)胞[12]。移栽后10 d左右為大多數(shù)根系皮層侵染的始發(fā)期，第10～17天為根腫菌原質(zhì)團(tuán)在根系內(nèi)部快速增殖的階段，但是根腫菌侵染的各個(gè)階段時(shí)空上并不是嚴(yán)格分開的，不同根毛內(nèi)部的根腫菌發(fā)育并不是同步的，有些根毛內(nèi)部已開始釋放游動(dòng)孢子，有些則還進(jìn)行著原質(zhì)團(tuán)的增殖，甚至根腫菌的吸附行為一直有發(fā)生[13]。受侵染的細(xì)胞由于感受到病原菌的刺激而引發(fā)植物生長(zhǎng)激素相關(guān)基因的表達(dá)，轉(zhuǎn)移了大量植物資源用于根部增生性生長(zhǎng)，使根部細(xì)胞大量分裂膨大，形成腫瘤[14]。青花菜移栽后緩苗、新根抽發(fā)期是根腫病發(fā)生的有利時(shí)期，與噻唑鋅不同施藥時(shí)期試驗(yàn)的結(jié)果相一致，早防治的處理，病根以新長(zhǎng)出的側(cè)根被侵染形成小根瘤為主，病情指數(shù)低，植株長(zhǎng)勢(shì)較健壯；晚防治的處理，尤其是移栽20多天后的處理，病根以主根腫大為主，且后期雜菌侵染腐爛，病情指數(shù)高，植株較矮小，花球采收期延遲。因此，根腫病防治應(yīng)在移栽后10 d內(nèi)為宜。噻唑鋅具有保護(hù)和內(nèi)吸治療作用，試驗(yàn)結(jié)果表明，針對(duì)青花菜根腫病，噻唑鋅主要起保護(hù)作用，當(dāng)病菌已經(jīng)侵染、病害已經(jīng)發(fā)生時(shí)再用藥則效果較差。

土壤溫、濕度和pH是影響根腫病發(fā)生的主要因素。一般認(rèn)為土壤溫度10～30 ℃(最適宜土溫為25 ℃)、土壤相對(duì)濕度在60%～98%[15]、pH值5.4～6.5的條件下適于休眠孢子的萌發(fā)，而溫度在10 ℃以下時(shí)不會(huì)發(fā)生皮層細(xì)胞的侵染，pH值7.2以上的田塊不易發(fā)病[16]。青花菜移栽后8 d內(nèi)，土壤相對(duì)濕度低于60%，一定程度上抑制休眠孢子萌發(fā)侵染，CK區(qū)病情指數(shù)較低，在45.2～53.3；2017年9、10月溫暖多雨，相同地塊根腫病病情指數(shù)在80以上。2年間病情指數(shù)的差異說(shuō)明青花菜移栽期至生長(zhǎng)初期的氣候條件對(duì)根腫病發(fā)病有較大影響。臺(tái)州地區(qū)直到12月溫度才降低到10 ℃以下，從移栽后到11月底都能發(fā)生根腫菌的侵染，藥劑2次防治效果優(yōu)于1次防治效果，第一次以移栽后0～7 d為宜，第2次以移栽后30～35 d為宜，這可能與藥劑的持效期有關(guān)，2次處理延長(zhǎng)了藥劑的持效期，保護(hù)根部不受病菌侵染。