□ 陳煒萍 廣東亨盛維嘉食品工業(yè)有限公司

利用氣相色譜法來測定乳粉中的脂肪以及各脂肪酸的含量，這種方法能夠一次測定多個(gè)樣品，對(duì)于分析的效率有很好的提高，在實(shí)際的乳粉檢測中，得到廣泛的應(yīng)用。

1 測定的材料準(zhǔn)備和測定方法

1.1 測定儀器以及試劑

在測定乳粉中的總脂肪以及飽和、不飽和脂肪酸時(shí)，使用的儀器有具有氫火焰離子檢測器（FID）的氣相色譜儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、萬分之一電子天平、HP-88毛細(xì)管色譜柱、氮吹儀以及恒溫水浴鍋[1]。使用的試劑有石油醚、乙醚、甲醇、乙醇、正己烷、氫氧化鈉、氯化鈉、無水硫酸鈉、氨水、焦性沒食子酸，三氟化硼甲醇溶液，以及花生油脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

1.2 測定樣品前處理

將含有脂肪的乳粉稱取1～5 g來作為實(shí)驗(yàn)的樣品，移入250 mL錐形瓶中，取100 mg焦性沒食子酸和2.0 mL內(nèi)標(biāo)溶液加入到瓶中，再加入一定量的水和乙醇加入，最后再加入3 mL氨水，進(jìn)行振蕩搖勻后，于（75±5）℃恒溫水浴鍋中水浴20 min，水解這一過程中每間隔5 min就搖晃錐形瓶，讓其充分水解。水浴結(jié)束后，將錐形瓶拿出來進(jìn)行降溫，降到室溫之后再加入10 mL乙醇進(jìn)行振蕩搖勻，接著將錐形瓶中的溶液都移入分液漏斗中，再用50 mL（1+1）乙醚石油醚混合液將錐形瓶進(jìn)行少量多次沖洗，經(jīng)過沖洗之后的溶液也要移入漏斗中，均勻的晃蕩幾分鐘，再靜置10 min，上層提取液倒入250 mL雞心瓶中，水解液要連續(xù)三次進(jìn)行以上操作，溶液和沖洗液都倒入雞心瓶中，在50 ℃的水浴下進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，蒸發(fā)至干后瓶中剩余的殘?jiān)蒙僭S的乙醚石油醚沖洗到頂空瓶中，在水溫55 ℃的情況下，用氮?dú)獯蹈扇軇４藭r(shí)，瓶內(nèi)剩余脂肪提取物，向瓶中加入2 mL的氫氧化鈉甲醇溶液，充入氮后蓋緊瓶子，在80 ℃的水浴鍋中放置10 min，不時(shí)地振動(dòng)搖勻，然后進(jìn)行冷卻，再將3 mL三氟化硼甲醇溶液加入其中，再充氣蓋緊，同樣在80 ℃的水浴鍋中水浴20 min，然后加入2 mL正己烷，蓋緊蓋子振蕩2 min，再加入5 mL的氯化鈉溶液，注意氯化鈉溶液處于飽和狀態(tài)，蓋緊蓋子振蕩1 min，然后靜止放置，待出現(xiàn)層次后用無水硫酸鈉將正己烷層進(jìn)行干燥，取上層正己烷層于進(jìn)樣瓶中，用氣相色譜儀進(jìn)行測定。

2 對(duì)測定的結(jié)果研究

儀器毛細(xì)管色譜柱能夠?qū)崿F(xiàn)39種脂肪酸甲酯的測定，通過內(nèi)標(biāo)法，利用轉(zhuǎn)換系數(shù)和各脂肪酸甲酯的含量來計(jì)算出乳粉中的脂肪以及各類脂肪酸的相應(yīng)含量，利用質(zhì)量分?jǐn)?shù)的百分比來表示計(jì)算結(jié)果，對(duì)氣相色譜法檢測脂肪酸的適應(yīng)性進(jìn)行評(píng)定主要從以下三個(gè)方面進(jìn)行。

2.1 精密度

在相同的條件下將乳粉樣品進(jìn)行6次重復(fù)測定，計(jì)算出脂肪以及各脂肪酸含量的RSD值，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，RSD值都不大于1%，說明氣相色譜法測定的精密度較好。

2.2 準(zhǔn)確度

將脂肪酸組成已知的花生油脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)溶液按高、中、低三個(gè)濃度加入乳粉樣品中，每一濃度都重復(fù)進(jìn)行三次，實(shí)驗(yàn)的回收率見表2。

脂肪以及各脂肪酸的三個(gè)濃度的回收率都大于90%，說明氣相色譜法測定的比較精確。

2.3 檢出限

將乳粉中不含有的脂肪酸甲酯選擇三種加入到樣品中，再利用氣相色譜法來進(jìn)行測定，計(jì)算得出該方法的檢出限。結(jié)果顯示，其脂肪以及各類脂肪酸的檢測結(jié)果都遠(yuǎn)低于國際標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的0.1%，說明氣相色譜法測定的靈敏度較高[2]。

表2 低中高三個(gè)添加濃度的回收率和檢出限表

3 結(jié)語

測定乳粉中的總脂肪、各類脂肪酸的類別、比例及含量，氣相色譜法操作比較簡單，可以一次性測定多個(gè)樣品，有效地減少分析的時(shí)間。同時(shí)，該方法具有較好的精密度、準(zhǔn)確度及靈敏度，可以保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。