馬莉 黃梅 熊安英

（瀘州市人民醫(yī)院 四川 瀘州 646000）

大腸埃希菌為臨床分離出的最常見的一種革蘭陰性桿菌，是一種條件致病菌，廣泛分布在自然界內(nèi)，且由于臨床廣譜抗生素的不斷研發(fā)及應(yīng)用，尤其是頭孢菌素類抗生素的使用，大腸埃希菌在選擇性壓力下，發(fā)展出現(xiàn)耐藥機(jī)制[1]。大腸埃希菌產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶是一種較為主要的耐藥機(jī)制，且為臨床治療帶來了較大的困難。對我院近2年尿液分離的產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌的耐藥性進(jìn)行分析。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月—2018年12月我院尿液樣本數(shù)共3163例，分離出大腸埃希菌：752例；檢出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的大腸埃希菌355例，分離率37.5%。排除同一患者的同一部位重復(fù)分離菌株。

1.2 方法

菌株的分離、鑒定及藥敏：將尿液標(biāo)本取10ul接種到血瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基，恒溫孵育24h后挑取疑似菌落分純，再孵育24h。使用梅里埃VITEK2 Compa做鑒定及藥敏，補(bǔ)充藥敏實驗，確證實驗依據(jù)美國CLSI/NCCLS 2016年標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。對儀器鑒定為產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌，再做ESBLs的確證實驗。：使用頭孢他啶、頭孢他啶/克拉維酸組合與頭孢噻肟、頭孢噻肟/克拉維酸組合測量，若加克拉維酸抑菌環(huán)的直徑與單藥測定直徑差在5mm以上，確證實驗均為產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌。

1.3 質(zhì)控菌株

大腸埃希菌ATCC25922，肺炎克雷伯菌ATCC700603，銅綠假單胞菌ATCC27853，均來自四川省臨檢中心。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

所有產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌數(shù)據(jù)均進(jìn)行準(zhǔn)確核對和錄入，采用WHONET5.6軟件分析數(shù)據(jù)。

2.結(jié)果

表 ESBL大腸埃希菌耐藥性測試結(jié)果

3.討論

3.1 大腸埃希菌致病性及生物學(xué)特性

大腸埃希菌為人體腸道的正常菌群，在自然界中廣泛存在，并為一種條件致病菌。當(dāng)人體出現(xiàn)免疫力降低或者細(xì)菌侵入就可能會成為機(jī)會致病菌，可能會引發(fā)腸道外感染、呼吸道感染、泌尿系感染、消化道感染等，且范圍較為廣泛。大腸埃希菌引發(fā)的腸道外感染主要為泌尿系感染，尤其在泌尿道插管的患者中，由于泌尿道侵入性操作會導(dǎo)致尿道黏膜的皮損，細(xì)菌會穿過破損的黏膜屏障，進(jìn)而侵入到人體內(nèi)，引發(fā)感染的發(fā)生，而病原菌的上行也會導(dǎo)致導(dǎo)管的血流感染的發(fā)生[2]。

大腸埃希菌在自然界水中可以存活數(shù)周甚至數(shù)月，且對熱抵抗力較強(qiáng)，對多種抗生素，包括鏈霉素、磺胺類及氯霉素等較為敏感。

3.2 大腸埃希菌耐藥機(jī)制

隨著目前抗生素的廣泛使用，大腸埃希菌的耐藥性也有明顯的增強(qiáng)。由于第三代頭孢菌素的過度濫用，選擇性壓力導(dǎo)致大腸埃希菌產(chǎn)生了產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶ESBLs，其可以產(chǎn)生常用抗生素較強(qiáng)阻力的酶，并通過水解切割青霉素（包括氨芐西林）、單環(huán)類抗生素及頭孢菌素等，導(dǎo)致藥物失效。此外研究還發(fā)現(xiàn)，部分ESBLs菌株還會對氨基糖苷類藥物、磺胺類藥物產(chǎn)生水解。

分析導(dǎo)致大腸埃希菌耐藥的機(jī)制主要為[3]：細(xì)菌能夠形成多種鈍化酶并作用到抗菌藥物上，導(dǎo)致抗菌活性喪失；可以改變藥物作用靶位，會導(dǎo)致抗菌藥物合成失?。豢梢酝ㄟ^改變細(xì)胞壁通透性，細(xì)菌突變，并造成細(xì)胞壁外膜屏障失去活性，影響藥物從細(xì)胞外向細(xì)胞內(nèi)的運輸，并產(chǎn)生耐藥性；細(xì)胞膜外存在特殊的藥物泵出系統(tǒng)，將進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)的抗菌藥物向細(xì)胞外泵出，并導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)的藥物濃度降低；細(xì)菌代謝途徑變化引發(fā)多重耐藥性操縱子存在；通過轉(zhuǎn)化、結(jié)合和傳導(dǎo)等在細(xì)菌菌群中擴(kuò)散耐藥基因。此外，細(xì)菌聚集也會形成粘液并形成生物膜包裹內(nèi)部菌群，屏蔽抗生素并對抗機(jī)體的免疫系統(tǒng)。

本文355例產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）大腸埃希菌對呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢替坦、厄他培南、亞胺培南、阿米卡星的敏感度達(dá)到90%以上。同時，也可以看出，部分藥物如氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢唑林、慶大霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明均出現(xiàn)了不同程度耐藥性。

綜上所述，產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌耐藥性較高，為更好的減少細(xì)菌多重耐藥，預(yù)防暴發(fā)流行等情況，需要臨床醫(yī)生合理使用抗生素，并根據(jù)藥敏結(jié)果調(diào)整抗菌藥物，盡量控制廣譜抗菌藥物使用量。