鄭顯義

摘要：通過真空冷凍、紅外線、微波及烘干四種方法干燥鐵皮石斛，利用高效液相色譜法對(duì)甘露糖含量進(jìn)行檢測(cè);利用比色法對(duì)多糖含量進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比不同干燥方法對(duì)鐵皮石斛甘露糖及多糖含量的影響。結(jié)果真空冷凍干燥樣品中保留了最高的甘露糖及多糖含量，而且較其他三種干燥方法更優(yōu)（P<0.05）。是干燥鐵皮石斛最理想方法。

關(guān)鍵詞：甘露糖;多糖;鐵皮石斛;干燥方法

鐵皮石斛干燥莖或者新鮮莖又被稱為“鐵皮蘭”，具有生津益胃、潤(rùn)肺止咳的作用。鐵皮石斛活性成分以多糖為主，包括抗炎、免疫功能增強(qiáng)等。鐵皮石斛鮮藥保存難度較大，加熱烘干處理期間，其品質(zhì)及藥物作用效果通常受到不同程度的影響。針對(duì)不同干燥方法對(duì)鐵皮石斛甘露糖及多糖的影響進(jìn)行探析。

研究資料與方法

研究資料

試材：選取本區(qū)新鮮鐵皮石斛、無(wú)水葡萄糖、D-甘露糖標(biāo)準(zhǔn)品、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮和氨基葡萄糖鹽酸鹽。

儀器：ALPHA1-2LD真空冷凍干燥機(jī)、WS70-1型紅外線快速干燥器、NN-K5440MF微波爐、DHG-9053A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、LD4-8型低速臺(tái)式離心機(jī)、UV-2550紫外線可見光光度計(jì)。

方法

鐵皮石斛不同干燥方法。選取新鮮石斛莖30g，將其切成若干小段每段0.5cm。

烘干干燥：平攤至溫度為65℃的鼓風(fēng)干燥箱中干燥72h，在其含水量是1.945%后將其制成粉末。紅外線干燥：平攤于紅外線快速干燥機(jī)中干燥7h，在含水量是1.747%后制成粉末。微波干燥：平攤置于微波爐中干燥10min，在含水量檢測(cè)為1.856%后制定粉末。真空冷凍干燥：置于-20℃冰箱中預(yù)凍2h，然后平攤置于真空冷凍干燥劑干燥72h，含水量檢測(cè)為1.999%后制成粉末。

檢測(cè)石斛多糖含量。苯酚-硫酸法獲取標(biāo)準(zhǔn)曲線：精密稱取9mg無(wú)水葡萄糖，定容到100mL，精密量取1.0、0.8、0.6、0.4、0.2mL，每個(gè)補(bǔ)水到1.0mL，在波長(zhǎng)為480mm條件下，通過紫外線分光光度計(jì)對(duì)吸光度值進(jìn)行檢測(cè)。橫坐標(biāo)（x）為質(zhì)量濃度，縱坐標(biāo)（y）為吸光度值，對(duì)無(wú)水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行繪制，獲取現(xiàn)行方程：y=9.226x+0.0418（r=0.9997）。

制備樣品溶液：采取精密儀器稱取0.3g樣品粉末，添加去離子水200mL，加熱回流2h，定容到250mL后，抽取2mL濾液，添加無(wú)水乙醇10mL，以每分鐘4000r的速度離心20min，將上清液去除，待沉淀后采用80%乙醇清洗2次，8mL/次，沉淀后通過熱水溶解，定容到25mL，獲取樣品多糖水溶液。

通過苯酚硫酸法對(duì)多糖含量進(jìn)行檢測(cè)：采取精密儀器稱取1.0mL樣品溶液，精密添加1mL的5%苯酚溶液，均勻搖晃，然后添加5mL硫酸，在沸水浴中積熱20min，放置于冰浴中冷卻5min，然后對(duì)樣品溶液中吸光度值進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)鐵皮石斛多糖含量進(jìn)行計(jì)算。

檢測(cè)甘露糖含量。色譜條件：XDB-C18柱;流動(dòng)相為乙腈-0.02mol/L的乙酸銨溶液;波長(zhǎng)及流速分別是250mm和1.0mL/L;柱溫及進(jìn)樣量分別是30℃和5μL。

制備標(biāo)準(zhǔn)品溶液：將氨基葡萄糖鹽酸鹽0.6g加水定容到50mL視為內(nèi)標(biāo)液。選取10mgD-甘露糖放入至100mL容量瓶中，并談價(jià)內(nèi)標(biāo)液1mL，均勻搖晃，定容到刻度線，選取100μL聯(lián)合400mL的0.5mol/L PMP甲醇溶液及400mL的0.3mol/L NaOH混合液，將其置于70℃水浴中保溫100min。然后添加500μL的0.3mol/L HCl，均勻搖晃，采用2mL三氯甲烷進(jìn)行清洗3次，過水膜，選取5μL樣品液，將其置于液相色譜儀中，將色譜圖記錄下來(lái)，對(duì)D-甘露糖及內(nèi)標(biāo)峰面積進(jìn)行檢測(cè)。

制備樣品溶液：選取0.12g樣品粉末，分別添加200mL的80%乙醇，在索氏提取器中加熱回流4h，在燒杯中添加100mL水及2mL內(nèi)標(biāo)液，煎煮1h，冷卻后定容到100mL，均勻混合，離心，獲取樣品提取液，抽取1mL上清液，并將其放置在空瓶中，添加3.0mol/L HCl 0.5ml，縫合，混合搖勻，置于110℃水腫水解1h，冷卻后，通過3.0mol/L NaOH對(duì)PH進(jìn)行調(diào)整直至中性，獲取樣品水解液。抽取樣品400μL水解液，添加0.5mol/L PMP甲醇溶液，然后抽取5μL樣品溶液將其置于液相色譜儀中，將內(nèi)標(biāo)峰面積和甘露糖記錄下來(lái)，并對(duì)甘露糖含量進(jìn)行計(jì)算。

觀察指標(biāo)

比較不同干燥方法對(duì)鐵皮石斛多糖及甘露糖含量的影響。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0處理本次研究中的計(jì)量資料（? ? ±s）和計(jì)數(shù)資料（%），分別采用t和x2進(jìn)行檢驗(yàn)，組間對(duì)比檢驗(yàn)值為P，若P<0.05則代表差異呈統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

3重復(fù)測(cè)定，均P<0.05。真空冷凍干燥法甘露糖382.1±35.1mg/g，總多糖430.2±20.4mg/g，最高;紅外線干燥法甘露糖265.7±8.8mg/g，總多糖262.5±24.2mg/g，最低;微波干燥法甘露糖348.7±20.4mg/g，總多糖394.5±7.1mg/g;烘干干燥法甘露糖303.7±15.4mg/g，總多糖364.8±17.4mg/g。

討論

鐵皮石斛加工期間，相對(duì)重要的一個(gè)階段是干燥，經(jīng)過本次試驗(yàn)結(jié)果可知，不同干燥方法獲取的鐵皮石斛中甘露糖及總多糖含量存在明顯差異。其中，真空冷凍干燥方法未顯著影響鐵皮石斛中甘露糖含量、多糖含量，然后是微波干燥及烘干干燥，其中影響最大的是紅外干燥方法。

多糖是鐵皮石斛中有效的活性成分，其同樣是研究鐵皮石斛中最多的一種其主要功效包括降血壓、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等，鐵皮石斛的藥理作用與多糖含量有關(guān)。鐵皮石斛的主要成分是甘露糖，甘露糖屬于已糖結(jié)構(gòu)，不會(huì)吸收紫外線。本次研究鐵皮石斛多糖酸水解形成甘露醇，通過與PMP發(fā)生衍生化形成苯基衍生物，利用高效液相色譜法對(duì)其含量進(jìn)行檢測(cè)可知，多糖含量與其含量呈正相關(guān)。

真空冷凍干燥技術(shù)具有低溫脫水的的特點(diǎn)，基本不會(huì)改變物料自身生物狀態(tài)、化學(xué)狀態(tài)及物理狀態(tài)，從而保留大部分有效營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。紅外干燥技術(shù)、烘干干燥技術(shù)及微波干燥技術(shù)利用高溫加熱實(shí)現(xiàn)紅棗，盡管具有較快的干燥速度和較高的效率，但是干燥期間，很容易破壞熱敏性物質(zhì)，而且很容易導(dǎo)致物料恢復(fù)。

總而言之，4種干燥方法中，對(duì)鐵皮石斛中甘露糖及多糖含量影響較小的是真空冷凍干燥方法，其同樣是干燥鐵皮石斛最理想方法。

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