奚家龍 丁佳駿

摘要：目的：對冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用進行分析。方法：常規(guī)處理冬蟲夏草取藥粉，將100只健康雄性運動能力差異性不大的小鼠為研究對象，分為模型組、空白對照組、高、中、低劑量氨基組五組。每組實施針對性的實驗方法，對小鼠力竭游泳時間、血乳酸水平、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、鼠白細胞介素、腫瘤壞死因子α進行比較，探究氨基酸成分的免疫功能和抗疲勞功能。結(jié)果：氨基酸組小鼠的抗疲勞能力顯著增強，力竭游泳時間明顯延長，且血清乳酸水平有了明顯下降，小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平改善明顯。五組小鼠比較力竭游泳時間、血乳酸水平、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、鼠白細胞介素、腫瘤壞死因子α差異顯著，（P<0.05）有統(tǒng)計學意義。此外，高、中、低劑量氨基組指標呈梯度變化的特點，與空白組較為接近，（P<0.05）有統(tǒng)計學意義。結(jié)論：冬蟲夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲勞能力上作用顯著。

關鍵詞：冬蟲夏草;氨基酸成分;藥理作用

冬蟲夏草屬于中藥材的一種，具有較大的滋補價值。該藥材屬于一種復合體，由蝙蝠蛾幼蟲和菌種結(jié)合而成[1]。其中冬蟲夏草中具有多種活性成分，幾年來對該藥材的研究以氨基酸組分居多。本文主要針對冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用進行分析。內(nèi)容如下。

1材料與方法

1.1材料與實驗動物

選取人工養(yǎng)殖的冬蟲夏草，經(jīng)去泥去腐質(zhì)等處理，自然風干后裝入玻璃器皿中存放。健康雄性運動能力差異性不大的100只小鼠為實驗動物。所有小鼠均未7周齡，體制量平均在（20.1±1.1）g，采用常規(guī)基礎飼料飼養(yǎng)方法。飼養(yǎng)溫度維持在23-25℃，飼養(yǎng)濕度維持在45%-55%。對飼養(yǎng)的小鼠進行一周的行為學指標訓練，將體育和運動能力與平均水平較大的小鼠淘汰。對小鼠進行每隔兩周的游泳訓練，每次在半小時，水溫在29-31℃，水深在30cm。

1.2實驗試劑和儀器

實驗儀器：恒溫水浴鍋、旋渦振蕩器、中藥粉碎機、超聲清洗器、高速低溫、和臺式離心機、全自動繪圖酶標儀、微量移液器等。實驗試劑：，尿素氮、血乳酸、小鼠相關酶聯(lián)免疫分析等試劑盒，肝素鈉、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸等分析純等。

1.3實驗方法

（1）分析提取氨基酸：在試管中放入20mg樣本，將6mol/L的15ml鹽酸加入。將試管內(nèi)的樣本混合均勻，做真空處理，十分鐘后封管。在烘烤溫度為110℃的恒溫環(huán)境下水解22h。冷卻到室溫搖勻。將11ml濾液放入燒杯。在恒溫水浴60℃環(huán)境下蒸干，行稀釋處理。稱取樣品800mg，塑料離心管規(guī)格10ml，15ml4%黃基水楊酸溶液加入搖勻，22000r/min，15min，取1ml上清液，4倍濾膜過濾。檢查儀器采用全自動氨基酸分析儀。結(jié)果顯示：在0.5%～3.5%之間的為天冬氨酸、絲氨酸。含量最高的為谷氨酸，之后是精氨酸、組氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少[2]。（2）分組實驗：①抗疲勞實驗：模型組、空白對照組、高、中、低劑量氨基組五組小鼠，每組20只。對模型組外行每次0.4ml，灌胃給藥4w。采用生理鹽水的為空白對照組。高、中、低劑量氨基組給與不同劑量的氨基酸，分別為0.4、0.2、0.1ml。連續(xù)給藥4周后稱重，纏小鼠重量10%的鉛絲行游泳訓練，計算力竭時間。鉛絲取出，經(jīng)針對性處理后摘眼球采血0.1ml，行全血乳酸含量檢測。②免疫功能檢查：行造模處理除空白對照組外，按照50mg/kg劑量注射環(huán)磷酰胺，1次/d，連續(xù)2d。灌胃2周后末次給藥20min，稱重，摘除眼球取血。初處死小鼠對胸腺、脾臟稱重，計算臟器指數(shù)，對IL-2、TNF-α檢驗[3]。

1.4統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)記錄采用WPS表格，統(tǒng)計學計算采用SPSS20.0軟件，計數(shù)資料采用（%）表示，使用X2檢驗;計量資料采用（）表示，使用t檢驗，P<0.05代表有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1抗疲勞實驗

力竭游泳時間和血乳酸水平比較，差異顯著，（P<0.05），且氨基酸組力竭游泳時間按照氨基酸含量的不同呈現(xiàn)梯度變化的特點，表現(xiàn)為力竭游泳時間，高劑量氨基酸組>中劑量氨基酸組>低劑量氨基酸組，（P<0.05）有統(tǒng)計學意義。

2.2免疫功能實驗

小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平差異明顯（P<0.05）有統(tǒng)計學意義。脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平具體表現(xiàn)為高劑量氨基酸組>中劑量氨基酸組>低劑量氨基酸組，（P<0.05）有統(tǒng)計學意義。

3討論

氨基酸成分是冬蟲夏草中的重要活性組分，其中在0.5%～3.5%之間的為天冬氨酸、絲氨酸。含量最高的為谷氨酸，之后是精氨酸、組氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少。本次實驗顯示小鼠的抗疲勞能力和氨基酸的含量呈正相關的關系，在小鼠力竭游泳時間延長的過程中，血清乳酸水平下降明顯，小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平改善也明顯。高、中、低劑量氨基組小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平呈梯度變化的特點，與空白組較為接近，說明冬蟲夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲勞能力上作用顯著。

參考文獻：

[1]陳麗云，祁真.冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用分析[J].中國衛(wèi)生工程學，2018，17（5）：675-677.

[2]鄭方毅.冬蟲夏草中含化學成分的種類及藥理作用研究進展[J].東方食療與保健，2015，（4）：16-17.

[3]王林萍，余意，馮成強.冬蟲夏草活性成分及藥理作用研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2014，（7）：132-136.

第一作者：奚家龍 男 1987-8 本科 助理工程師