王曉霞 李靜
[摘要]目的 觀察甘草及甘草提取物對小鼠免疫保護(hù)的作用。方法 本實(shí)驗設(shè)對照組、甘草低、高劑量組、甘草提取物低、高劑量組,共5組。甘草低、高劑量組分別以甘草100、300g/kg?BW,甘草提取物低、高劑量組分別以甘草提取物20mg、50mg/kg?BW進(jìn)行小鼠灌胃,對照組以純化水替代,連續(xù)30天后。觀察對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、血清溶血素、溶血空斑數(shù)、脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化和NK細(xì)胞活性的影響。結(jié)果 甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度、NK細(xì)胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細(xì)胞增值數(shù)、血清半數(shù)溶血值(HC50)與對照組比較,顯著升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),其他實(shí)驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。表明甘草及甘草提取物均能一定程度增強(qiáng)小鼠免疫力。
[關(guān)鍵詞]甘草、甘草提取物、NK細(xì)胞、免疫
甘草為豆科植物甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.、脹果甘草 Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草 Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根莖,春、秋季采挖,除去須根,曬干而得[1]。甘草和中益氣,有調(diào)補(bǔ)勞損內(nèi)傷、脾氣虛弱、元陽不足、肺氣衰虛之功效,其甘溫平補(bǔ),可增強(qiáng)免疫功能。在甘草提取物當(dāng)中,含有的有效成分種類較多,能夠發(fā)揮出多重免疫調(diào)節(jié)的效果。甘草提取物能夠?qū)γ庖呒?xì)胞進(jìn)行激活,并且對免疫反應(yīng)進(jìn)行增強(qiáng)[2]。本實(shí)驗觀察甘草及甘草經(jīng)過提取后所得甘草提取物對小鼠免疫的影響,比較提取工序是否影響甘草免疫作用的發(fā)揮。
1 材料與方法
1.1受試物 甘草購自張仲景大藥房;甘草提取物以甘草飲片加10倍水煎煮提取3次,每次2h,過濾、干燥得粉末,1克提取物相當(dāng)于6.1g甘草飲片。
1.2動物 健康KM種小鼠,單一性別,體重18~22g,由新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗動物中心提供。
1.3儀器 電子天平、分析天平、酶標(biāo)儀、96孔細(xì)胞培養(yǎng)板、離心機(jī)、游標(biāo)卡尺等
1.4實(shí)驗分組 100只KM小鼠隨機(jī)分成兩個組,一組進(jìn)行遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、血清溶血素實(shí)驗,另外一組進(jìn)行小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實(shí)驗、NK細(xì)胞活性實(shí)驗。每組分別設(shè)對照組、甘草低、高劑量組、甘草提取物低、高劑量組。
2 方法
甘草低、高劑量組分別以甘草100、300mg/kg?BW,甘草提取物低、高劑量組分別以甘草提取物20mg、50mg/kg?BW進(jìn)行小鼠灌胃,對照組以去離子水替代,連續(xù)灌胃30天。處死小鼠進(jìn)行足趾腫脹度、半數(shù)溶血值(HC50)、COA誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞增殖、溶血空斑數(shù)和NK細(xì)胞活性檢測。方法按照中國衛(wèi)生部《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》2003版中規(guī)定操作。
數(shù)據(jù)處理 采用檢驗的統(tǒng)計方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
3結(jié)果
3.1對小鼠細(xì)胞免疫的影響
灌胃小鼠受試物30天后,甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度與對照組比較,均顯著升高,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細(xì)胞增值數(shù)與對照組比較,顯著升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),其他實(shí)驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。結(jié)果見表1
3.2對小鼠半數(shù)溶血值(HC50)、溶血空斑數(shù)和NK細(xì)胞活性的影響
灌胃小鼠受試物30天后,與對照組比較,甘草提取物高劑量組小鼠血清半數(shù)溶血值(HC50)顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),剩余其他實(shí)驗組小鼠血清半數(shù)溶血值(HC50)、溶血空斑數(shù)與對照組比較,差異均無顯著性(P>0.05)。甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的NK細(xì)胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。結(jié)果見表2
4討論
本實(shí)驗結(jié)果顯示,甘草及甘草提取物各劑量組小鼠的足跖腫脹度、NK細(xì)胞活性與對照組比較,均顯著升高,具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05);甘草提取物高劑量組小鼠的淋巴細(xì)胞增值數(shù)、血清半數(shù)溶血值(HC50)與對照組比較,顯著升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05),其他實(shí)驗組小鼠均無顯著差異(P>0.05)。表明甘草及甘草提取物均能一定程度增強(qiáng)小鼠免疫力。甘草提取物為甘草經(jīng)過水提取、干燥而得粉末,本實(shí)驗甘草和甘草提取物實(shí)驗劑量折合藥材飲片相當(dāng),實(shí)驗結(jié)果甘草提取物高劑量組對小鼠淋巴細(xì)胞增值數(shù)、血清半數(shù)溶血值(HC50)有明顯影響,而對應(yīng)劑量甘草飲片高劑量組缺沒有影響。一定程度上說明,甘草經(jīng)過提取并無降低其藥效作用。
引用文獻(xiàn)
1.《中華人民共和國藥典》2015版一部,P86
2.方鑒.甘草及其有效成分對免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用探究[B].海峽藥學(xué),2017年,29( 8): 28-30.