王利娟，劉 杰，陳柯霖，李斯文，谷愉愉，劉淑靜，周 金，康熙雄，張國(guó)軍△

(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100070；2.北京市免疫試劑臨床工程技術(shù)研究中心，北京 100070)

格林巴利綜合征(GBS)是一種周圍神經(jīng)炎性脫髓鞘疾病，病因尚未闡明，目前普遍認(rèn)為它是由病原微生物先驅(qū)感染而誘發(fā)的自身免疫性脫髓鞘性疾病[1-2],由于髓鞘脫失體內(nèi)形成抗原，激活B淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞，導(dǎo)致克隆株漿細(xì)胞異常增生，合成的免疫球蛋白在電泳時(shí)形成幾條比較狹窄且不均勻的不連續(xù)條帶，即寡克隆區(qū)帶[3]，僅在腦脊液中存在特異性寡克隆區(qū)帶，提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)存在體液免疫反應(yīng)，是判定鞘內(nèi)IgG合成的定性指標(biāo)[4-5]。目前普遍認(rèn)為寡克隆區(qū)帶電泳是多發(fā)性硬化的可靠診斷指標(biāo)，而關(guān)于其在GBS中的特點(diǎn)及診斷意義研究較少，本研究總結(jié)了近些年來(lái)首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院住院確診的GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳結(jié)果，旨在探討寡克隆區(qū)帶電泳在GBS中的分布特點(diǎn)及診斷意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 根據(jù)美國(guó)國(guó)家神經(jīng)學(xué)疾病與中風(fēng)研究院1990年修訂的GBS診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，納入2013-2019年于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院就診的98例GBS患者，并收集血清和腦脊液，其中患者男65例，女33例； ≤50歲56例，>50歲42例；按病程分為急性組68例，慢性組30例。

GBS急慢性判斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：急性GBS病程達(dá)到峰值的時(shí)間常<2周(不超過(guò)4周)，單向性病程；慢性GBS病程達(dá)到峰值通常在8周以上，進(jìn)行性、波動(dòng)性病程，通過(guò)臨床表現(xiàn)、腦脊液蛋白及常規(guī)電生理檢查綜合判斷。

1.2儀器與試劑 法國(guó)Sebia HYDRASYS蛋白電泳儀以及其配套試劑。

1.3方法 收集患者肘靜脈血5 mL，通過(guò)離心分離血清標(biāo)本，同時(shí)行常規(guī)腰椎穿刺，留取腦脊液2 mL，離心后取上清液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用法國(guó)Sebia Hydrasys蛋白電泳儀，通過(guò)瓊脂糖凝膠等電聚焦電泳檢測(cè)寡克隆區(qū)帶,判斷標(biāo)準(zhǔn)為出現(xiàn)2條或2條以上分開的、較狹窄、不均一、不連續(xù)的條帶即為陽(yáng)性，其中OB(CSF)+代表腦脊液中陽(yáng)性條帶，OB(S)+代表血清中陽(yáng)性條帶，SOB(CSF)+代表僅見(jiàn)于腦脊液而未見(jiàn)血清中的條帶，提示有鞘內(nèi)合成；臨床常見(jiàn)結(jié)果組合有4種類型，見(jiàn)表1。

表1 寡克隆區(qū)帶電泳臨床常見(jiàn)結(jié)果組合

注：+表示陽(yáng)性；-表示陰性

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果 OB(CSF)陽(yáng)性37例(37.8%)，OB(S)陽(yáng)性33例(33.7%)，二者陽(yáng)性率接近，而SOB(CSF)及全陽(yáng)的陽(yáng)性率較低，其中SOB(CSF)陽(yáng)性7例(7.1%)，全陽(yáng)陽(yáng)性3例(3.1%)。98例GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 98例GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果

注：全陽(yáng)表示OB(CSF)、OB(CSF)、SOB(CSF)三者均可見(jiàn)陽(yáng)性條帶

2.2不同性別GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果 男性患者OB(CSF)、OB(S)、SOB(CSF)、全陽(yáng)的陽(yáng)性率分別為40.0%、35.4%、2.7%、1.5%，女患者OB(CSF)、OB(S)、SOB(CSF)、全陽(yáng)的陽(yáng)性率分別為3.3%、30.3%、9.1%、6.1%，男女性別以上指標(biāo)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

2.3GBS患者急慢性組間寡克隆區(qū)帶電泳結(jié)果比較 急性患者OB(CSF)、OB(S)、SOB(CSF)、全陽(yáng)的陽(yáng)性率分別為35.3%、32.4%、5.9%、2.9%，慢性患者OB(CSF)、OB(S)、SOB(CSF)、全陽(yáng)的陽(yáng)性率分別為43.3%、36.7%、10.0%、3.3%，急性患者以上指標(biāo)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 見(jiàn)表4。

表3 不同性別GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

表4 急慢性組間寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

2.4不同年齡GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果 不同年齡段OB(CSF)、OB(S)陽(yáng)性率趨勢(shì)基本一致，隨著年齡的增長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，而SOB(CSF)、全陽(yáng)兩組呈波動(dòng)性。按照年齡≤50及>50分為2組，>50歲年齡組OB(CSF)、OB(S)的陽(yáng)性率(52.4%、50.0%)明顯高于≤50歲年齡組(26.8%、21.4%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表5、圖1。

表5 不同年齡患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果比較[n(%)]

圖1 不同年齡GBS患者寡克隆區(qū)帶電泳檢測(cè)結(jié)果

3 討 論

1942年有研究者首先用電泳法發(fā)現(xiàn)多發(fā)性硬化患者腦脊液球蛋白增加，并于1971年證實(shí)為寡克隆區(qū)帶[8]。目前公認(rèn)腦脊液中特異性寡克隆IgG區(qū)帶是診斷多發(fā)性硬化的常規(guī)檢查[9-10]，并于2010修訂版McDonald多發(fā)性硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)中作為重要的實(shí)驗(yàn)室附加依據(jù)[11]。寡克隆區(qū)帶作為多發(fā)性硬化常見(jiàn)的免疫學(xué)異常表現(xiàn)，是影像學(xué)檢查不可代替的輔助檢查，并可以協(xié)助判斷多發(fā)性硬化的嚴(yán)重程度、疾病進(jìn)程及是否處于活動(dòng)期。而目前關(guān)于寡克隆區(qū)帶在GBS中的分布特點(diǎn)及診斷價(jià)值研究較少。劉業(yè)松等[12]、于素貞等[13]、張旭等[14]、李義召等[15]研究提示，GBS組寡克隆區(qū)帶的陽(yáng)性率分別為76.7%、57%、38.9%、70.0%，顯著高于對(duì)照組，且在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)有免疫球蛋白的異常合成，存在免疫功能異常。

本研究回顧性分析了2013-2019年98例確診為GBS患者的寡克隆區(qū)帶電泳陽(yáng)性情況，并從不同方面進(jìn)行分組比較。GBS中腦脊液寡克隆區(qū)帶陽(yáng)性率為37.8%，與以往的文獻(xiàn)報(bào)道基本一致，部分的差別可能是由于檢測(cè)方法的靈敏度不同引起。本研究分別對(duì)OB(CSF)、OB(S)、SOB(CSF)及三者全陽(yáng)結(jié)果從不同性別、年齡、急慢性間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示性別、急慢性間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；>50年齡組OB(CSF)、OB(S)的陽(yáng)性率(52.4%、50.0%)明顯高于≤50年齡組(26.8%、21.4%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而SOB(CSF)及全陽(yáng)在不同年齡間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示>50年齡組OB(CSF)陽(yáng)性率高的原因是由于血清中蛋白的滲透，并不全是鞘內(nèi)合成，可能是由于老年人的血腦屏蔽功能較年輕人較差[16]。

4 結(jié) 論

GBS患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)有免疫球蛋白的異常合成，且存在免疫功能異常，對(duì)GBS的輔助診斷有一定意義。GBS患者>50歲年齡組腦脊液及血清寡克隆區(qū)帶陽(yáng)性率高，而腦脊液中特異性寡克隆區(qū)帶的陽(yáng)性率較低，提示>50歲年齡組腦脊液寡克隆區(qū)帶陽(yáng)性部分是由于血清中的蛋白滲透，并不全是鞘內(nèi)合成，可能與老年人的血腦屏蔽功能較年輕人較差有一定關(guān)系。因此，臨床診斷應(yīng)考慮年齡造成的影響。