蒲小蘭 林書蘭 王曉玉 王娃金
摘要:產(chǎn)地不同,葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元、總黃酮這幾種成分的含量存在一定的差異。對不同產(chǎn)地葛根藥材的化學成分進行詳細地測定,為葛根藥材質(zhì)量標準提供一定的理論支持,分析研究結果可以將其作為研究此物質(zhì)量標準提供一定的理論幫助。
關鍵詞:葛根;產(chǎn)地不同;化學成分;總黃酮
【中圖分類號】R197??? 【文獻標識碼】A???? 【文章編號】1004-7484(2019)10-0218-03
葛根主產(chǎn)于河南、湖南等地區(qū)。其用途比較廣泛,可以緩解發(fā)熱的癥狀,還可以升陽止瀉等。它是一種豆科植物,葛根的主要的成分包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分。同時還包括一定的黃酮類物質(zhì)、多糖以及很多的微量元素。葛根是一種分布十分廣泛的藥材。產(chǎn)地不一致,從而導致質(zhì)量方面存在一定的差異。為了對藥材的質(zhì)量進行合理的控制,同時制定一定的標準,本次實驗通過對不同產(chǎn)地的葛根藥材中葛根素、大豆苷、大豆苷元、總黃酮進行詳細地分析和測定,希望可以對葛根藥材質(zhì)量的控制提供一定的幫助。實驗如下:
一、儀器、試劑及樣品
高效液相色譜儀;色譜柱;真空泵;外分光光度計;電子天平;葛根樣品;甲醇;乙醇;水。
二 、方法與結論
2.1葛根素含量的測定:在進行測定時,主要運用中國藥典中的測定方法進行測定,測定結果如下圖1所示:
2.2大豆苷、大豆苷元含量測定
2.2.1色譜條件 (如圖二所示)
根據(jù)圖2 的色譜圖,可以明顯地看出大豆苷、大豆苷元與其他成分分離的效果是很可觀的,理論塔板數(shù)均高于4000。
2.2.2制備對照品溶液
用天平準確地稱取大豆苷,大豆苷元的對照樣品需按實際情況適量稱取,加70%乙醇分別制成0.2和0.1mg/mL溶液.
2.2.3制備供試品溶液
用天平準確地稱取藥材細粉0.2克,放在100mL平底的燒瓶內(nèi);加入20ML70%的乙醇溶液;密封處理;對其稱重;加熱回流2h進行提取;冷卻;繼續(xù)用乙醇溶液補充溶液恢復至原刻度線的位置。
2.2.4精密度分析
對大豆苷以及大豆苷元對照品溶液進行精密吸取,體積分別為10ML,對兩者分別連續(xù)進樣5次,RSD分別為1.3%和1.5%,說明儀器具備良好的精密度。
2.2.5穩(wěn)定性試驗分析
對供試品溶液分別進行精密吸取,分別于0,2,4,6,8,10,12 等不同的時刻進樣10ML,大豆苷和大豆苷元RSD分別為1.7%和1.3% ,表明供試液整個階段內(nèi)屬于穩(wěn)定狀態(tài)。
2.2.6重復性試驗
用天平準確地稱取同一樣品的粉末各6份,每一份質(zhì)量為0.2g,重復上述制備供試液的方法繼續(xù)制此溶液,測得大豆 苷、大豆苷元的平均含量沒有明顯地變化, RSD也是比較穩(wěn)定的,這一結果表面該實驗的方法的重復性方面基本沒有問題。
2.2.7加樣回收率試驗分析
取同樣的葛根粉末各6份,每一份大約在0.1g左右,在每份樣品中加入一定量的大豆苷和大豆苷元的對照品。重復上述操作制備供試液,測定結果如表1所示。
從表格可以看出回收率比較可觀。
2.3總黃酮含量實驗分析
2.3.1制備對照品的溶液:稱取葛根素的標準品20mg于100mL量瓶中,注意稱取時盡量準確,加95%的乙醇溶解進行稀釋處理,達到標準刻度位置的同時需要進行搖勻處理,避免一定的誤差出現(xiàn)。
2.3.2制備供試品溶液:用天平準確地稱取葛根粉末0.4 g于100ML的錐形瓶中,加進95%乙醇60 mL;放在熱水中進行加熱處理;大約50min并在加熱時及時進行振搖處理;時間結束后進行冷卻處理;加乙醇補足到原刻度線位置;搖勻處理;靜置一段時間使溶液澄清;吸取上清液2 mL左右導入到25 mL的量瓶中;加入適量的蒸餾水進行稀釋;恢復原刻度線位置并作搖勻處理。
2.3.3最大吸收峰的確定:吸取對照品溶液和供試品溶液,吸取時需要注意兩點,一是吸取需精準,二是吸取需適量。以2mL 95%乙醇加水稀釋至20mL量瓶中作為主要的對照溶液,進行掃描處理,結果顯示在250nm附近的時候有最大吸收強度。
2.3.4精密度分析:對黃酮對照品溶液進行精密吸取,在250nm的時候測定其吸收光照的程度,連續(xù)操作5次,RSD為0.1%,說明儀器具備良好的精密度。
2.3.5穩(wěn)定性試驗分析:吸取同一種供試品溶液,在制備60min(每間隔10min測量一次)時間內(nèi)分別測定其吸收光照的程度,測得RSD在60分鐘之內(nèi)變化處于穩(wěn)定的狀態(tài),因此可以說明此實驗的穩(wěn)定性良好,不會因此而出現(xiàn)一定的誤差現(xiàn)象。
2.2.6重復性試驗:用天平準確地稱取同一樣品的粉末各6份,每一份質(zhì)量為0.4g,重復上述制備供試液的方法繼續(xù)制此溶液,在250nm下測定其吸收光照的強度,在此位置RSD為1%左右,這一結果表面該實驗的方法的重復性方面基本沒有問題。
2.2.7加樣回收率試驗分析:取同樣的葛根粉末各6份,每一份大約在0.1g左右,在每份樣品中加入一定量的葛根素作為主要的對照樣品。重復上述操作制備供試液,測定結果如表2所示。
2.4不同地區(qū)的葛根成分分析
通過檢測測出不同地區(qū)葛根含量明細如下(圖3)
三、討論
對大豆苷、大豆苷元標準品溶液進行紫外全波長的掃面,再加上對樣品溶液進行紫外全波長掃描,結果顯示都是在248 nm處吸收程度比較好,因此通過實驗分析出大豆苷、大豆苷元含量進行相關的測定是時選擇測定波長為248 nm時效果是最明顯的,因此這個數(shù)值可以被用來以后的測定和研究,可以節(jié)省一定的人力、物力和財力。葛根中的黃酮物質(zhì)對乙醇比較容易吸收,通過實驗的分析可以發(fā)現(xiàn),當濃度為70%時,乙醇提取大豆苷、大豆苷元效果是比較好的,因此在進行測定的時候一般可以采用70%的乙醇來進行操作。另外當大豆苷的元峰與其它峰交互在一起時。經(jīng)過試驗選用甲醇~水按上述實驗的操作步驟進行,使大豆苷,大豆苷元可以完全分離的狀態(tài),這樣往往分離效果是比較明顯,方便結果分析。
四、總結
本實驗主要是根據(jù)葛根的多種成分進行詳細地分析,對收集的不同地區(qū)的葛根樣品進質(zhì)量分析,結果表明,產(chǎn)地不同,葛根的質(zhì)量上均存在一定的差異。因此在不斷地研究中,對于藥材的產(chǎn)地和不同的品種之間進行相應的研究,可以在一定程度上對藥材的質(zhì)量進行保證。
參考文獻
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