劉巍

（成都市新都區(qū)第三人民醫(yī)院檢驗科 四川 成都 610000）

在臨床檢驗工作中，血常規(guī)是應(yīng)用最廣泛且最基礎(chǔ)的檢查項目之一，而在該項目檢查中，各醫(yī)院幾乎均實現(xiàn)了自動化檢測，這使得血常規(guī)檢驗準(zhǔn)確度和效率等有了較大提升[1]。但血常規(guī)檢測結(jié)果在部分因素的影響下，導(dǎo)致了血細(xì)胞分析檢測難以達(dá)到理想的準(zhǔn)確性，而常見的感染因素即為冷凝集[2]。作為一種自身免疫性抗體，冷凝集素主要為IgM抗體，當(dāng)溫度＜31℃時該抗體可對自身紅細(xì)胞抗原產(chǎn)生作用，使之發(fā)生細(xì)胞凝集，但具有一定可逆性[3]。在血常規(guī)檢測中，冷凝集會影響檢測結(jié)果，導(dǎo)致紅細(xì)胞結(jié)果出現(xiàn)假性降低，還會導(dǎo)致紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量、紅細(xì)胞平均容積等假性升高，因此需采取有效的方法加以處理，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[4]。本文隨機選取我院強冷凝集血常規(guī)檢測標(biāo)本30例為對象，分析其相關(guān)臨床資料，采用3種方法處理標(biāo)本，即樣本1：7預(yù)稀釋法、血漿置換法、37℃水浴法，然后對強冷凝集對血常規(guī)檢測結(jié)果的影響及處理措施做了分析，旨在篩選出最佳的措施處理強冷凝集標(biāo)本，以保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確行和可靠性。現(xiàn)報道如下.

1.資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取我院強冷凝集血常規(guī)檢測標(biāo)本30例為對象，分析其相關(guān)臨床資料，其中男性17例，女13例，年齡為6～68歲，平均年齡為（45.32±14.57）歲。疾病類型：系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫性溶血性貧血、肝硬化、白血病、肺炎支原體感染等。所有標(biāo)本均為強陽性（1：1024以上陽性）。本組30例標(biāo)本初次檢驗時均存在明顯異常的結(jié)果，且紅細(xì)胞發(fā)生凝集，均經(jīng)血涂片證實。

1.2 方法

采用3種方法處理標(biāo)本，即樣本1：7預(yù)稀釋法、血漿置換法、37℃水浴法，然后采用血細(xì)胞分析儀常規(guī)監(jiān)測，儀器型號SYSMEX-XN1000，并行手工涂片染色。具體為：（1）試劑與儀器：XN-1000全自動血細(xì)胞分析儀及配套質(zhì)控品、試劑（產(chǎn)自日本SYSMEX公司）；由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供的瑞氏染色液；由美國BD公司提供的真空采血管。（2）實驗分組及處理。對每位患者采集外周血標(biāo)本2管，采用EGTA-K2（乙二胺四乙酸二鉀）真空抗凝采血管采集，混合充分。經(jīng)不同方法進(jìn)行處理后進(jìn)行檢測：①直接上機：即直接上機測定2管標(biāo)本，取兩次平均值作為檢測結(jié)果。②37℃水浴法：即在37℃水浴箱中對其中一管標(biāo)本溫育30min后立即檢測，然后獲取檢測結(jié)果。③樣本1：7預(yù)稀釋法：即采用本次所用儀器的原裝稀釋液240μL，另取含抗凝劑的EP管，置于37℃水浴箱溫育30mmin，將經(jīng)溫育的稀釋液吸取未經(jīng)處理的外周血40μL混合后進(jìn)行檢測，調(diào)整儀器模式為1：7預(yù)稀釋。④血漿置換法：即將一管標(biāo)本血經(jīng)離心處理，時間為5min，轉(zhuǎn)速為3000r/min，吸取上層血漿，采用儀器原裝稀釋液等量加入血漿中充分混合，反復(fù)3次后上機檢測。⑤采用上述各方案對冷凝集標(biāo)本進(jìn)行檢測的同時，采用瑞士染色液分別進(jìn)行涂片染色鏡檢，觀察是否完全解除紅細(xì)胞凝集。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察分析檢測結(jié)果，包括血小板、紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、MCHC（紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度）、MCH（紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量）、MCV（紅細(xì)胞平均容積）、HCT（紅細(xì)胞和血細(xì)胞比容）等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗，計量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

本組30例標(biāo)本直接上機檢測時，MCHC、MCH、MCV等異常增高，HCT明顯降低，且P＜0.05；且存在紅細(xì)胞凝集相關(guān)報警。標(biāo)本經(jīng)30min 37℃水浴法加熱處理后立即檢測，MCHC、MCH稍高（P＜0.05）；其余指標(biāo)均完全恢復(fù)正常。經(jīng)血漿置換法處理后，血小板結(jié)果顯著降低（P＜0.05），而紅細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果均恢復(fù)正常。經(jīng)1：7預(yù)稀釋法處理后，所有指標(biāo)檢測結(jié)果均趨于正常。經(jīng)37℃水浴法處理后的標(biāo)本在涂片染色鏡下顯示紅細(xì)胞輕度凝集，而1：7預(yù)稀釋法、血漿置換法等處理后涂片顯示無紅細(xì)胞凝集。具體見表。

表 不同方法處理后血常規(guī)檢測結(jié)果對比（±s）

表 不同方法處理后血常規(guī)檢測結(jié)果對比（±s）

注：與其余三種方法相比，*P＜0.05；與預(yù)稀釋法和血漿置換法相比，#P＜0.05；與其他方法相比，經(jīng)血漿置換法處理后PCT顯著降低，&P＜0.05。

相關(guān)指標(biāo) 直接上機 37℃水浴法 血漿置換法 預(yù)稀釋法紅細(xì)胞（×1012/L） 0.92±0.21* 3.54±0.94 4.94±1.29 5.15±1.50血紅蛋白（g/L） 121±15 114±15 124±12 131±17 HCT（%） 7.5±1.3* 27.4±2.9 34.5±3.8 35.5±3.7 MCV（fL） 83.4±8.9 77.8±7.0 69.5±5.9 68.8±7.4 MCH（pg） 131.4±10.4* 32.4±4.8# 25.4±3.8 25.6±4.3 MCHC（g/L） 1577±98* 417±57# 362±38 372±41白細(xì)胞（×109/L） 9.35±1.06 9.15±1.25 8.72±1.46 9.55±1.77血小板（×109/L） 231±29 242±26 92±11& 244±36

3.討論

在臨床上，冷凝集素綜合征是一種以微循環(huán)血栓、慢性溶血性貧血為特征的一組疾病，主要由外界溫度降低和自身反應(yīng)性紅細(xì)胞凝集等誘導(dǎo)因素所致。冷凝集素存在于大部分人的血清中，其具有較低的效價，且通常不會造成自身紅細(xì)胞凝集，但在支原體肺炎、多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫性溶血性貧血等情況下，其效價可異常增高[5]。血液離體后若含有較高效價的冷凝集素，則紅細(xì)胞抗原可結(jié)合冷凝集素，從而發(fā)生紅細(xì)胞凝集，其存在一定可逆性，即升溫至一定程度后其可自動解聚[6]。在對冷凝集血液標(biāo)本進(jìn)行檢測的過程中，采用全自動血細(xì)胞分析儀檢測時，紅細(xì)胞聚集導(dǎo)致其無法從紅細(xì)胞通道單個通過，因而會大大降低紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果，但會增加單個紅細(xì)胞平均體積，而紅細(xì)胞經(jīng)溶解后采用比色法檢測所得為血紅蛋白，所以其結(jié)果不會受影響。因此MCHC、MCH等指標(biāo)會異常升高。通過對強冷凝集的標(biāo)本采用不同的措施加以處理，即可有效完全解離紅細(xì)胞凝集，從而保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，但不同的處理方法獲取的檢測結(jié)果存在一定差異[7]。本組30例標(biāo)本直接上機檢測時，MCHC、MCH、MCV（紅細(xì)胞平均容積）等異常增高，HCT明顯降低，P＜0.05；且存在紅細(xì)胞凝集相關(guān)報警。標(biāo)本經(jīng)30min 37℃水浴法加熱處理后立即檢測，MCHC、MCH稍高（P＜0.05）；其余指標(biāo)均完全恢復(fù)正常。經(jīng)血漿置換法處理后，血小板結(jié)果顯著降低（P＜0.05），而紅細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)檢測結(jié)果均恢復(fù)正常。經(jīng)1：7預(yù)稀釋法處理后，所有指標(biāo)檢測結(jié)果均趨于正常。經(jīng)37℃水浴法處理后的標(biāo)本在涂片染色鏡下顯示紅細(xì)胞輕度凝集，而1：7預(yù)稀釋法、血漿置換法等處理后涂片顯示無紅細(xì)胞凝集。因此可見，強冷凝集標(biāo)本對血常規(guī)檢測結(jié)果存在不利影響，而采取相應(yīng)措施加以處理后，即可顯著提升檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，強冷凝集標(biāo)本對血常規(guī)檢測結(jié)果存在一定影響，而采用1∶7預(yù)稀釋法處理強冷凝集標(biāo)本后，其效果顯著優(yōu)于血漿置換法和37℃水浴法，可確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，且操作簡便，因此值得臨床應(yīng)用推廣。