金士博　姜志強　黎睿君

摘要 孔雀魚是我國小型觀賞魚中最主要的養(yǎng)殖種類，但隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，其病害問題頻發(fā)，尤以針尾病最嚴重。本研究于2017年12月至2018年12月，對遼寧某孔雀魚養(yǎng)殖區(qū)針尾病開展了為期1年的流行病學調(diào)查，其中水質(zhì)指標檢測結(jié)果表明，孔雀魚針尾病發(fā)病池的氨氮、pH指標普遍高于未發(fā)病水池指標?；诖私Y(jié)果，本研究開展了高濃度氨氮、pH值對孔雀魚的急性毒性試驗。氨氮急性毒性試驗結(jié)果表明，高濃度氨氮可導致孔雀魚針尾病的發(fā)生，24.48、7296h的半致死濃度分別為23.56.4.683.54、2.08mg/L，其對應的非離子氨濃度為1.79、0.360.27、0.16mg/L，氨氮的安全濃度為0.21mg/LopH值對孔雀魚急性攻毒試驗結(jié)果表明，異常pH指標未導致孔雀魚針尾病的發(fā)生，但導致孔雀魚出現(xiàn)夾尾現(xiàn)象，其中pH=10時孔雀魚夾尾率最高，為23.3%。綜上所述，高濃度的氨氮會導致孔雀魚針尾病的發(fā)生，而且針尾病發(fā)病率與氨氮濃度成正相關(guān);而pH指標未導致孔雀魚針尾病的發(fā)生。

關(guān)鍵詞 孔雀魚;針尾病;氨氮;pH值

中圖分類號 S965.8

文獻標識碼 A

文章編號 1007-5739（2019）08-0226-02

孔雀魚是小型觀賞漁業(yè)中養(yǎng)殖規(guī)模最大、最有經(jīng)濟欻益的觀賞魚類。在孔雀魚流行行病學調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，孔雀魚針尾病的暴發(fā)最嚴重，給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。通過為期1年的水質(zhì)檢測發(fā)現(xiàn)，針尾病發(fā)病池的氨氮、pH值普遍高于未發(fā)病池。發(fā)病池氨氮平均指標為0.539mg/L，為國家V類水，高于國家I類水27倍;pH值平均指標為8.63，屬于國家IV類水。而截至目前，關(guān)于氨氮、pH值對孔雀魚針尾病的急性毒性試驗及孔雀魚針尾病影響的研究未見報道。因此，本研究開展高濃度氨氮、pH值對孔雀魚的急性毒性試驗，探討二者對孔雀魚針尾病的影響，以期為孔雀魚針尾病發(fā)病機制的研究提供一定的參考。

1材料與方法

1.1試驗動物

試驗魚均購自遼寧省鞍山市某觀賞魚養(yǎng)殖區(qū)，魚體長1.2～1.5cm，魚體平均體重（0.05+0.01）go試驗前先暫養(yǎng)1周，選擇健康個體開展試驗，試驗期間停止換水喂食。

1.2試驗方法

1.2.1氨氮毒性試驗。氨氮毒性試驗采用96h靜水法，并采用納氏試劑法檢測。試驗根據(jù)氨氮濃度不同共設8個處理，分別為0.0.2、0.4、0.8、1.6.3.2.6.4、12.8mg/L，其中0mg/L為對照。每個處理30尾魚，分別在10L的玻璃缸急性攻毒浸泡96h，水溫26C，pH值8.0，攻毒期間無換水投喂。攻毒期間及時觀察孔雀魚活動及中毒癥狀，同時及時將死亡個體取出，分別記24.48.72.96h時死亡的個體總數(shù)。并計算出氨氮濃度在各暴露時間下的半致死濃度（LCso）、安全濃度、對應的非離子氨濃度及死亡率。

1.2.2pH毒性試驗。試驗用鹽酸和氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，用pH儀進行檢測。根據(jù)pH值不同共設7個處理，分別為4.0、5.06.0、7.0、8.0、9.0、10.0，其中pH=8.0為對照。每個處理30尾魚，分別在10L的玻璃缸急性攻毒浸泡，連續(xù)觀察7d，水溫269C，攻毒期間無換水投喂。攻毒期間及時觀察孔雀魚活動及中毒癥狀，同時及時將死亡個體取出記錄數(shù)據(jù)。

1.3統(tǒng)計分析

所有的數(shù)據(jù)采用平均值t標準差表示，數(shù)據(jù)處理用Excel和SPSS統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計，P<0.05表示差異顯著。以實測氨氮濃度計算各暴露時間下的半致死濃度（LC）和安全濃度（Sc），同時計算出對應的非離子氨的濃度和解離常數(shù)（pKa），計算公式如下：

Sc=0.1x96LCsfM";

非離子氨（NH3）=總氨（NH3+NH4*）/[l0（pKa-pH）+1]4）;pKa=0.09018+2729.92/T。

其中，pKa為解離常數(shù)，T為開氏溫度。本試驗條件為pH=8.0溫度26C。

2結(jié)果與分析

2.1氨氨對孔雀魚急性中毒試驗觀察

孔雀魚氨氮中毒表現(xiàn)分為3個階段：①早期，魚體游動緩慢、鰭條豎立、出現(xiàn)狂游焦躁不安;②中期，魚體聚集在缸的四角，尾鰭、腹鰭下耷，側(cè)游側(cè)翻，鰓蓋張合速度減慢，尾鰭出現(xiàn)夾尾癥狀;③后期，魚體傾斜浮于水面上，尾鰭逐漸呈現(xiàn)針尖狀，隨后死亡（圖1）。

2.2pH值對孔雀魚急性中毒試驗觀察

孔雀魚pH值中毒表現(xiàn)分為2個階段：①早期，魚體狂游焦躁不安、碰撞缸壁;②后期，魚體游動緩慢，尾鰭、腹鰭下耷，側(cè)游側(cè)翻，鰓蓋張合速度減慢，部分魚體尾鰭出現(xiàn)夾尾（圖1），隨后死亡。

2.3不同氨氮濃度條件下孔雀魚的存活表現(xiàn)

由表1、圖2可知，12.8mg/L氨氮的孔雀魚死亡率及針尾率最高，分別為100%、30%。6.4mg/L氨氮的孔雀魚夾尾率最高，為66.7%。氨氮對孔雀魚24、48.72和96h的半致死濃度（LCxo）分別為23.56、4.68、3.54、2.08mg/L，對應的非離子氨濃度分別為1.79、0.36.0.27、0.16mg/L;96h的安全濃度（Sc）為0.21mg/L。結(jié)果表明，高濃度的氨氮會導致孔雀魚針尾和夾尾的出現(xiàn)，針尾率、夾尾率與氨氮濃度和攻毒時間成正相關(guān)。

2.4不同pH值條件下孔雀魚的存活表現(xiàn)

由圖3可知，除pH=4時孔雀魚死亡率為100%外，其他處理孔雀魚死亡率均小于50%。酸堿性較大時，pH值的變化致使孔雀魚死亡率、夾尾率有部分波動，其死亡率在pH=4時最多，為100%;夾尾率在pH=10時最多，為23.3%。在正常酸堿性的水體中，pH=8、pH=9時未出現(xiàn)魚體死亡。研究結(jié)果表明，pH值不會導致孔雀魚針尾的出現(xiàn)，但隨著pH值的增加，孔雀魚耐受性減弱。