陳舒憶　唐藝　趙應(yīng)梅　陸雅麗　莫我躍

【摘 要】目的：對椒目進(jìn)行生藥學(xué)鑒定研究，為椒目的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供研究依據(jù)。方法：采用基源鑒定、性狀鑒別對椒目的來源、性狀進(jìn)行鑒別;采用石蠟切片和粉末制片法研究椒目的顯微結(jié)構(gòu)。結(jié)果：椒目呈類圓球形、半球形或卵形，表面黑色具光澤。顯微結(jié)構(gòu)清晰，表皮細(xì)胞長方形，石細(xì)胞眾多，內(nèi)種皮細(xì)胞有明顯網(wǎng)狀紋理，子葉海綿組織細(xì)胞排列疏松。粉末棕褐色，可見種皮表皮細(xì)胞、石細(xì)胞、內(nèi)種皮細(xì)胞等。結(jié)論：椒目原植物形態(tài)特征明顯，性狀特征及顯微構(gòu)造顯著，其生藥學(xué)研究可為椒目的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供充分的科學(xué)依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】椒目;生藥學(xué);性狀鑒別;顯微鑒別;石蠟切片

中圖分類號： R282.5文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A 文章編號： 2095-2457（2019）20-0224-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.20.104

椒目Semen Zanthoxyli為蕓香科植物花椒的干燥成熟種子。立秋前后果熟時采收，晾干，待果實開裂，果皮與種子分開時，取出種子即得。據(jù)記載，該藥性味苦、辛，溫。小毒。歸脾、肺、腎、膀胱經(jīng)，有利水消腫，祛痰平喘等功效，用于水腫脹滿、哮喘、痰飲喘逆等癥[1]，始載于《本草經(jīng)集注》。現(xiàn)對椒目的基源、藥材性狀、橫切面和粉末的顯微鑒別特征進(jìn)行生藥學(xué)研究，旨在建立椒目的真?zhèn)舞b別方法，并為其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的修訂提供依據(jù)。

1 材料和儀器

（1）材料：椒目采集于貴州貞豐、貴州遵義、陜西鳳縣等地，并經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學(xué)魏升華教授鑒定。

（2）儀器設(shè)備：Leica DM2500光學(xué)生物顯微鏡和Leica S60立體顯微鏡（德國Leica Microsystems）;Leica RM2245半自動輪轉(zhuǎn)切片機(jī)（德國Leica Biosystems）。

（3）試劑試藥：無水乙醇、乙醇、二甲苯、番紅、固綠等（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法

（1）基原鑒定對原植物形態(tài)進(jìn)行觀察，制作蠟葉標(biāo)本，進(jìn)行原植物鑒定，并描述植物形態(tài)特征。

（2）性狀鑒別使用游標(biāo)卡尺測量椒目果實和種子的長度、直徑，采用肉眼和立體顯微鏡觀察椒目的形狀、大小、顏色、表面特征、質(zhì)地、斷面、氣味等。

（3）顯微鑒別采用石蠟切片法[2]研究椒目的顯微結(jié)構(gòu)。取椒目，煮沸數(shù)分鐘后，在水中浸泡過夜，放入70% FAA固定液（70%的乙醇90ml，冰醋酸5ml，37%甲醛5ml）中固定24h，依次在不同濃度的乙醇中逐級脫水，乙醇濃度按順序依次為70%、80%、90%、95%、100%，每次1h。脫水后先用無水乙醇-二甲苯（1：1）浸泡1h;再用二甲苯浸泡1h，反復(fù)2次。后置于65℃恒溫箱中浸蠟，每隔30min加固體石蠟1次，反復(fù)3次，置換成純石蠟后在恒溫箱中放置6h，使石蠟充分浸入種子中。包埋后修塊、切片。切好的蠟片在展片臺上展開、貼片，再置50℃烘箱中烘干。在二甲苯中脫蠟，乙醇復(fù)水后番紅染色1h左右，60%、70%、80%、90%的乙醇逐級脫水后，入固綠溶液中染色2min，脫水后二甲苯透明封片。采用Leica DM2500光學(xué)生物顯微鏡觀察、拍照，圖片均用Leica LAS V4.3顯像系統(tǒng)處理。

3 結(jié)果

1）植物形態(tài)特征花椒落葉灌木或小喬木，枝有短刺，小枝上的刺基部寬而扁且勁直的長三角形，當(dāng)年生枝被短柔毛。葉有小葉5-13片，葉軸常有甚狹窄的葉翼;小葉對生，無柄，卵形，橢圓形，稀披針形，位于葉軸頂部的較大，近基部的有時圓形，長2-7厘米，寬1-3.5厘米，葉緣有細(xì)裂齒。葉背基部中脈兩側(cè)有叢毛或小葉兩面均被柔毛，中脈在葉面微凹陷，葉背干后常有紅褐色斑紋?；ㄐ蝽斏蛏趥?cè)枝之頂，花序軸及花梗密被短柔毛或無毛;花被片6-8片，黃綠色，形狀及大小大致相同;雄花的雄蕊5枚或多至8枚;退化雌蕊頂端叉狀淺裂;雌花很少有發(fā)育雄蕊，有心皮3或2個，間有4個，花柱斜向背彎。果紫紅色，單個分果瓣徑4-5毫米，散生微凸起的油點，頂端有甚短的芒尖或無?；ㄆ?-5月，果期8-10月[3]。

2）性狀特征本品呈類圓球形、半球形或卵形，種臍斜平，直徑3-5毫米。表面黑色具光澤，可見細(xì)密的魚鱗狀紋理，有的部分表皮脫落，露出黑色魚網(wǎng)狀紋理。質(zhì)堅硬，剖開可見淡黃白色的胚乳及兩枚子葉，顯油性。氣香，味微麻、辣。如圖2所示。

3）顯微特征

（1）本品橫切面：表皮細(xì)胞長方形，柵狀，大小相近，外被有角質(zhì)層，其下有眾多石細(xì)胞，相聚成帶，細(xì)胞形狀各異，大小不一，紋孔及孔溝清晰。內(nèi)種皮細(xì)胞數(shù)列，有明顯的網(wǎng)狀紋理，木化。胚乳細(xì)胞多列，多角形，細(xì)胞壁薄。子葉表皮細(xì)胞1-2列，海綿組織細(xì)胞排列較疏松。胚乳細(xì)胞及子葉細(xì)胞內(nèi)含油滴及糊粉粒[4-5]。如圖3所示。

（2）粉末特征本品粉末棕褐色，種皮表皮細(xì)胞多角形，棕紅色，長28-80μm，直徑20～58μm，垂周壁念珠狀增厚，少數(shù)均勻增厚，有的細(xì)胞較大，內(nèi)充滿黃棕色透明分泌物。石細(xì)胞類圓形、類方形或橢圓形，棕黃色，紋孔和孔溝清晰。內(nèi)種皮細(xì)胞淡黃色，網(wǎng)狀增厚明顯，木化。如圖4所示。

4 討論

顯微鑒定是中藥材真?zhèn)舞b別的重要方法，是中藥鑒定必不可少的手段之一。但在椒目石蠟切片的制作過程中發(fā)現(xiàn)，椒目硬度大，溶液不宜滲入，切片時易脫落，切片難度大。通過研究比較，新鮮椒目相較于干燥的椒目，更易制作出效果良好的石蠟切片。在石蠟切片的制作過程中，表皮細(xì)胞易脫落，柵狀結(jié)構(gòu)易破碎，制作時應(yīng)格外注意。本文對椒目進(jìn)行了詳細(xì)的生藥學(xué)研究，為椒目質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供參考依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

[1]江蘇新醫(yī)學(xué)院，中藥大辭典（上冊）[M].上海：上海人民出版社，1977：2292.

[2]趙中振，陳虎彪.中藥顯微鑒定圖典[M].福州：福建科學(xué)技術(shù)出版社，2016.

[3]中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學(xué)出版社，1996.

[4]曹蔚，薛美玲，謝艷華，等.椒目種皮的石蠟切片制備方法及顯微鑒別研究[J].陜西中醫(yī)，2012，33（3）：352-354.

[5]王少平.椒目質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及椒目脂肪酸SFODLPME_GC測定方法的建立[D].山西醫(yī)科大學(xué)，碩士學(xué)位論文，2017.