黃錦波

（吉姆斯（廣州）實驗技術有限公司，廣東 廣州 510000）

姜黃片主要產自廣東、四川等地。姜黃片既 可入藥也可作食品添加劑[1-2]。相關研究表明，國內在2018年對姜黃片的需求量高達10萬噸以上，其中四川姜黃片預估產量約1400～1600噸。種植過程中使用的殺蟲劑中，有機氯為脂溶性物質，耐熱耐酸，難分解，易在動植物內聚集[3]。而姜黃片的色素含量高，成分復雜，容易污染儀器檢測器[4-5]，從而導致農殘分離度不理想，檢測結果不準確。本實驗通過優(yōu)化前處理方法與儀器分析等條件，能有效解決這些問題，本實驗將闡述并證實本方法的真實性與可行性。

1 實驗部分

1.1 儀器、試劑、標準品與樣品

儀器：GC-2010Plus島津氣相色譜儀。

試劑：濃硫酸、乙酸、乙腈、正己烷（分析純，廣州試劑廠）。

標準品：六六六（BHC）滴滴涕（DDT）有機氯農殘混標（上海安譜，批號 CDGG-111426-8，標示含量1000 μg/ml）；五氯硝基苯，三氯殺螨醇（上海安譜，批號CDGG-113826-2，標示含量1000 μg/ml）；氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯混標（上海安譜，批號CDGG-120016-4，標示含量1000 μg/ml）；四川姜黃片（四川永祥，批號180910，規(guī)格：500 g/袋）。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準儲備液的制備 準確量取14種有機氯標準品各0.1 ml，正己烷稀釋并定容至100 ml，配制成1000 μg/L標準儲備液，于冷凍中避光保存。

1.2.2 混合標準溶液制備 準確量取標準儲備溶液1 ml于同一個10 ml量瓶中，加正己烷稀釋成混合標準標準溶液100 μg/L。

1.2.3 混合標準工作液配置 準確量取一定量的混合標準溶液于一組10 ml量瓶中，以正己烷稀釋并定容。此標準系列濃度范圍為0.5～20 μg/L。

1.2.4 樣品溶液的制備 粉碎適量樣品，準確稱取樣品1 g于50 ml離心管中，加入約10 ml 1 %乙酸乙腈多次提取，50 ℃氮氣濃縮至近干，以正己烷稀釋并定容于10 ml離心管中，加入1 ml濃硫酸磺化，如此重復多次，直至濃硫酸層無色，有機層以氮氣濃縮至近干，用正己烷稀釋并定容至1 ml，過濾，上機待測。

1.2.5 色譜條件 采用Inert Cap 17（30 m×0.25 mm，0.25 μm）為分離柱， 電子捕獲檢測器，程序升溫為初始溫度60 ℃，30 ℃/min升至180 ℃，再以5 ℃/min 升至220 ℃ ，2 ℃/min 升至250 ℃，5 ℃/min升至270 ℃，保持35 min。

1.2.6 實驗譜圖 采用1.2.5項色譜條件進樣測定，10 μg/L的BHC-滴滴涕、五氯硝基苯與20 μg/L的三氯殺螨醇、擬除蟲菊酯的標準溶液譜圖見圖1。

圖1 混合農殘標準溶液GC譜圖

由圖1可見，農殘色譜峰的分離度均≥1.5，理論塔板數(shù)均≥10 000。色譜條件適用于四川姜黃片中農殘的測定。

2 結果與討論

2.1 線性關系考察

按1.2.5項色譜條件，測定1.2.3項下系列濃度標準液，以峰面積（A）對濃度（C）進行回歸，得回歸方程，結果見表1。

表1 農殘標準曲線考察結果

通過對14種農殘的色譜分析，各物質均有穩(wěn)定的保留時間及良好的峰型，且本方法在配制各濃度范圍內線性關系良好，適于14種農殘（α-BHC、五氯硝基苯、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、三氯殺螨醇、4, 4-DDE、4, 4-DDD、2, 4-DDT 、4, 4-DDT、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯）的含量測定。

2.2 儀器重現(xiàn)性試驗

分別取濃度為5 μg/L的BHC，DDD，三氯殺螨醇與20.0 μg/L擬除蟲菊酯類標準品溶液1 μl，連續(xù)進6針，記錄峰面積，計算峰面積的RSD，結果見表2。

表2 重現(xiàn)性試驗結果

由表2可見，14種農殘峰面積RSD范圍為0.3 %～4.6 %，表明本實驗室的儀器的穩(wěn)定性良好，適用于四川姜黃片中14種農殘的測定。

2.3 靈敏度試驗

2.3.1 稱取樣品1 g，準確加入10.0 μg/L有機氯混合標準溶液10.0 μl，按1.2.4項方法處理，按1.2.5項儀器條件進行測試，信噪比≥3，即為α-BHC，五氯硝基苯和γ-BHC的方法檢出限。準確加入10.0 μg/L有機氯混合標準溶液30.0 μl，按1.2.4項方法處理后，按1.2.5項儀器條件測試，信噪比≥3，即為β-BHC，δ-BHC，4, 4-DDE，4, 4-DDD，2, 4-DDT與4, 4-DDT的方法檢出限。

2.3.2 稱取樣品1 g，準確加入10.0 μg/L擬除蟲菊酯類標準溶液0.2 ml，按1.2.4項方法處理后，按1.2.5項儀器條件測試，信噪比≥3，即為擬除蟲菊酯類的方法檢出限。準確加入 10.0 μg/L三氯殺螨醇標準溶液0.1 ml，按1.2.4項方法處理后，按1.2.5項儀器條件測試，信噪比≥3，即為三氯殺螨醇標準溶液的方法檢出限，結果見表3。

結果表明，14種農殘的方法檢出限均滿足現(xiàn)有標準對14種農殘靈敏度的要求。

表3 農殘靈敏度試驗結果

2.4 加標回收率試驗

精確稱取四川姜黃片1 g，共9份，分別精密加入一定濃度的農殘混合標準儲備液，按1.2.4項制備樣品溶液，按1.2.5項色譜條件進行測試，記錄峰面積，計算14種農殘的回收率，結果見表4。

結果表明，14種農殘的回收率在70.3 %～118.5 %，均符合要求（回收率60 %～120 %）。

3 結論

按中華人民共和國衛(wèi)生部GB 5009.146-2008《植物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多種殘留量的測定》中農殘的氣相測定方法中并沒有五氯硝基苯、三氯殺螨醇與氯氰菊酯，過程繁瑣并耗時，同時靈敏度不佳，分離度并不能達到理想狀態(tài)，同時凝膠滲透色譜價格與氣質聯(lián)用色譜儀昂貴，并不是每個常規(guī)實驗室都有能力進行配備。姜黃片的脂溶性物質種類復雜，姜黃片素含量高，分離難度大，而本方法優(yōu)化了樣品的前處理與儀器分析條件，能很好分離農殘。本操作方法簡便，溶劑簡單，僅用氣相色譜就可快速和準確測定姜黃片中14種農殘的含量，同時能達到理想的分離度與理論塔板數(shù)，能很好地優(yōu)化GB 5009.146-2008 《植物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯類農藥多種殘留量的測定》中農殘的檢測方法，為廣大的檢測工作者提供一種檢測農殘的參考技術。

表4 加標回收率實驗結果