張若冰 謝惠明 張杰

[摘要]目的：探討自體脂肪干細(xì)胞的濃縮提取技巧及在面部填充治療中的遠(yuǎn)期效果和安全性。方法：2013年-2017年對(duì)38例顏面部凹陷或組織缺容的就醫(yī)者行自體脂肪干細(xì)胞移植填充矯治，術(shù)后隨訪評(píng)價(jià)矯治效果。結(jié)果：38例就醫(yī)者中，有33例接受了1次自體脂肪干細(xì)胞移植，5例進(jìn)行了再次自體脂肪干細(xì)胞移植。術(shù)后隨訪時(shí)間為3～41個(gè)月，術(shù)后顏面部缺容及輪廓欠佳現(xiàn)象獲得顯著改善。未出現(xiàn)局部硬結(jié)、皮膚表面不平整、注射針孔瘢痕及色素沉著等不良反應(yīng)。術(shù)后就醫(yī)者和醫(yī)師對(duì)效果的總有效率評(píng)價(jià)分別為94.7%和97.4%。結(jié)論：自體脂肪干細(xì)胞移植是一種安全、遠(yuǎn)期療效理想的面部年輕化治療方式，嚴(yán)格遵照醫(yī)療規(guī)范及實(shí)驗(yàn)室提取脂肪干細(xì)胞的提取方法操作，可以有效提高脂肪干細(xì)胞的移植成活率。

[關(guān)鍵詞]自體脂肪干細(xì)胞;凹陷填充;面部缺容;面部年輕化;注射

[中圖分類號(hào)]R622? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A? ? [文章編號(hào)]1008-6455（2019）08-0022-03

面部輪廓是否分明豐滿，除了骨骼因素以外，主要由面部皮下脂肪而定。一般來說，青少年至中年人群面部皮下脂肪豐滿，隨著年齡增長(zhǎng)或因某些疾病甚至外傷導(dǎo)致面部皮下脂肪減少，顯得消瘦凹陷，從美學(xué)角度來說顯得老態(tài)或給人以滄桑感，這給愛美人士帶來了煩惱，自體脂肪移植修復(fù)可以讓消瘦或凹陷的臉龐恢復(fù)圓潤(rùn)曲線，同時(shí)讓面部輪廓整體提升，顯年輕化[1]。2013年-2017年，無錫市第二中醫(yī)院醫(yī)學(xué)美容外科對(duì)38例就醫(yī)者應(yīng)用自體脂肪干細(xì)胞行面部凹陷填充及輪廓修飾等面部年輕化的綜合矯治，取得了滿意的臨床療效?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料和方法

1.1 臨床資料：本組共38例就醫(yī)者，其中女性34例，男性4例，年齡27～55歲，平均36.3歲;均已排除高血壓、冠心病等慢性病，排除面部皮膚感染（如痤瘡等），排除正在減肥者。其中33例接受了一次自體脂肪干細(xì)胞移植，5例接受了第二次脂肪干細(xì)胞移植。

1.2 器材設(shè)備：正壓潔凈臺(tái)—SW-CJ-2FD，高速冷凍離心機(jī)—TD5.5，冷凍生理鹽水。

1.3 方法

1.3.1 自體脂肪的提取：根據(jù)就醫(yī)者主觀要求及自身?xiàng)l件，選擇上臂、腹部及大腿內(nèi)側(cè)、外側(cè)作為供區(qū)并標(biāo)記抽取脂肪的范圍[2]。常規(guī)供區(qū)腫脹麻醉，用0.9%生理鹽水500ml+2%鹽酸利多卡因40ml+腎上腺素1ml配成局麻腫脹液，用11號(hào)刀片在標(biāo)記抽吸部位做3～5mm皮膚切口，選用2.8mm直徑的注水針，將一只手放在抽吸部位皮膚表面，可感覺到針的定位及腫脹程度，在標(biāo)記抽吸供區(qū)范圍內(nèi)均勻注射至腫脹發(fā)白，皮膚有“橘皮樣”外觀為止[3]。結(jié)束注射，輕按摩術(shù)區(qū)至腫脹液擴(kuò)散均勻。麻醉成功后，用20ml注射器與4mm吸脂針沿切口插入皮下脂肪組織，吸脂針呈扇形均勻抽取深層脂肪，至足夠量。

1.3.2 脂肪干細(xì)胞的提取與濃縮：①將吸出來脂肪液連同注射器放入4℃～8℃生理鹽水中直立靜置3～5min，混合液為不同顏色的3層，上層為橘紅色的脂肪液體，中間層為淡黃色脂肪顆粒，下層為粉紅色的腫脹液和血液的混合液;②然后取出排去底層液體（轉(zhuǎn)移至正壓潔凈臺(tái)操作），把上兩層脂肪液及脂肪顆粒轉(zhuǎn)移至50ml離心管內(nèi)，放入冷凍（4℃）離心機(jī)，400r/min離心2min，取出離心管，此時(shí)離心管出現(xiàn)兩層（見圖1），上層為淡黃色脂肪，底層為淡紅色腫脹液，用注脂針抽去底層腫脹液（見圖2）;③將獲得純脂肪顆粒轉(zhuǎn)移至50ml注射器內(nèi)，再經(jīng)過雙通脂肪乳糜器（見圖3），分別經(jīng)3孔、5孔、9孔乳糜器將脂肪顆粒反復(fù)推送，直至脂肪完全乳糜粉碎。然后按每25ml乳糜脂肪加入23ml冰生理鹽水+2ml慶大霉素轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)混勻，再置于冷凍離心機(jī)，以2 500r/min，離心5min;④離心后離心管內(nèi)出現(xiàn)4層，最頂層為油脂性液體，第二層為破碎脂肪碎片及部分脂肪細(xì)胞及淋巴細(xì)胞，第三層為生理鹽水，管底一層為脂肪干細(xì)胞及少量紅細(xì)胞（見圖4）。吸去頂層破碎脂肪油脂，再吸去第三層生理鹽水，在吸去過程中動(dòng)作要輕緩（50ml可濃縮提取7ml左右，見圖5）;⑤將留下乳糜脂肪及底層干細(xì)胞轉(zhuǎn)移至20ml注射器內(nèi)，把獲得乳糜脂肪按每15ml加入慶大霉素4U國(guó)際單位，2%利多卡因3ml，用兩個(gè)注射器通過三通反復(fù)推送混勻（見圖6）。

1.3.3 自體脂肪干細(xì)胞面部注射移植：就醫(yī)者術(shù)前坐立位標(biāo)記移植部位與范圍，根據(jù)缺容量用記號(hào)筆由疏至密的虛線標(biāo)記。局部麻醉后，盡量在隱蔽部位用19G銳針刺破表皮，再用21G鈍針（圓頭）接于1ml注射器，在真皮下及骨膜上游離松解粘連，形成多個(gè)線狀腔隙。進(jìn)針動(dòng)作輕柔，以最小的壓力緩慢注射，注射前回抽觀察有無回血，避免進(jìn)入血管，以退針注射方式進(jìn)行注射，精確控制注入的脂肪量，注射部位的即時(shí)效果比周圍不移植部位略為飽滿即可，同時(shí)遵循注射量寧少勿多原則，一般注射量多于所需量的20%。同時(shí)注意區(qū)域之間的銜接，過渡要平緩自然[4]。注射后24h內(nèi)輕柔按摩及適當(dāng)冰敷，以使注射脂肪分布均勻。24h后禁持續(xù)按摩及熱敷，以免脂肪液化。

1.3.4 術(shù)后處理：供區(qū)用運(yùn)動(dòng)彈力膠布包扎3～5d，根據(jù)抽取脂肪量的多少、部位及范圍來決定是否需要穿塑身衣。顏面注射部位用小二退熱貼，避免局部擠壓及做夸張表情。預(yù)防性口服抗生素3d。

1.4 效果評(píng)估：評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)遵循就醫(yī)者要求外，還遵循黃金分割定律、三庭五眼等規(guī)律，遵照對(duì)稱、均衡、和諧、完整等原則。術(shù)后4～6周就醫(yī)者、醫(yī)師及手術(shù)組護(hù)士結(jié)合術(shù)前標(biāo)準(zhǔn)照片進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)，總有效率=（效果一般+效果理想）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

2? 結(jié)果

本組共38例就醫(yī)者，單次脂肪干細(xì)胞移植總量為18～62ml，術(shù)后缺容及輪廓明顯改善。術(shù)后早期主要是瘀青腫脹，多數(shù)在5～7d左右消退，上瞼處及下瞼處相對(duì)消退較慢，個(gè)別患者就醫(yī)者需要2～3周方能全部消退。圍手術(shù)期未出現(xiàn)血腫及感染，未見脂肪液化及栓塞，注射針孔未見瘢痕及色素沉著，恢復(fù)自然，未見表情僵硬及局部硬結(jié)，未出現(xiàn)并發(fā)癥。大多數(shù)就醫(yī)者1次移植后效果滿意，個(gè)別就醫(yī)者對(duì)療效不滿意，于3個(gè)月后行第2次脂肪干細(xì)胞移植，從實(shí)驗(yàn)室復(fù)蘇凍存脂肪干細(xì)胞，直接注射移植。就醫(yī)者及家屬評(píng)價(jià)有效率為94.7%，醫(yī)師及護(hù)士評(píng)價(jià)有效率為97.4%，具體情況見表1。

3? 典型病例

3.1 病例1：女，31歲，身高166cm，體重52kg。面部缺容特征：顳部凹陷、眉心部不飽滿，側(cè)面頰部凹陷，鼻基底及下眶骨緣凹陷扁平，面部整體輪廓不流暢，行自體脂肪干細(xì)胞移植，總共注射43ml脂肪干細(xì)胞。術(shù)后3個(gè)月自覺顳部不夠理想，行第2次自體脂肪干細(xì)胞移植，同時(shí)就醫(yī)者為追求美感，要求豐下頦，于下頦處注射1.5ml脂肪干細(xì)胞，一共注射13ml，兩次注射總量為56ml。面部立體感增強(qiáng)，面部輪廓流暢，顯年輕化。術(shù)后隨訪41個(gè)月，見圖7。

3.2 病例2：男，29歲，身高176cm，體重73kg。面部缺容特征：顳部、頰部凹陷。行自體脂肪干細(xì)胞移植，雙側(cè)顳部總注射量為18ml，術(shù)后5個(gè)月復(fù)診，自覺效果比較理想。面部輪廓流暢，較前年輕化。術(shù)后隨訪9個(gè)月，見圖8。

4? 討論

4.1 自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用概述：面部組織隨著年齡的增長(zhǎng)，會(huì)產(chǎn)生皮膚松弛、皮下膠原蛋白減少、脂肪顆粒減少、筋膜松弛、肌肉體積減少及彈性降低等現(xiàn)象，會(huì)出現(xiàn)軟組織容積減少，造成骨骼顯形，臉型由年輕時(shí)的“類鵝蛋形”變成“類菱形”，因組織減少及松弛緣故，面部輪廓呈現(xiàn)上小下大的橢圓形。隨著人們對(duì)美的追求，醫(yī)療美容技術(shù)的日臻完美，自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞逐漸應(yīng)用于臨床。作為一種自體組織及可再生的填充材料，具有來源豐富、取材方便、操作簡(jiǎn)單、仿生自然、安全無排異、預(yù)后效果好等優(yōu)點(diǎn)[5-7]。自體脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞移植不僅在改善面部輪廓方面發(fā)揮作用，而且還因?yàn)橹颈旧砗写罅康募?xì)胞生長(zhǎng)因子、抗自由基及抗氧化功能，再加上間充質(zhì)干細(xì)胞具有多分化潛能，能根據(jù)組織需要主動(dòng)歸巢，促進(jìn)組織修復(fù)，具有改善皮膚組織光澤度，修復(fù)受損肌膚等起到抗衰作用。脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）具有多分化潛力，不僅能形成表皮細(xì)胞、骨和軟骨細(xì)胞、干細(xì)胞，還能分化形成心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和血細(xì)胞等，在組織再生、組織器官修復(fù)方面也有著巨大潛力[8-10]。目前，自體脂肪移植已經(jīng)成為安全、效果持久、用途廣泛的抗衰老微創(chuàng)外科方式。人體脂肪組織中除了含有已經(jīng)定型的前脂肪細(xì)胞外，也包含具有多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群—脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞[11-12]。

4.2 如何提高自體脂肪干細(xì)胞移植的成活率：由于自體脂肪移植后存在一定程度的吸收率。臨床觀察，根據(jù)就醫(yī)者的年齡、移植部位、移植體積及個(gè)體差異，自體脂肪吸收率約30%～90%，平均超過60%，如何減少移植后的吸收及預(yù)后效果成為脂肪干細(xì)胞移植的技術(shù)關(guān)鍵[13-14]。筆者結(jié)合在實(shí)驗(yàn)室工作中脂肪干細(xì)胞的提取與培養(yǎng)體會(huì)總結(jié)如下：未分化的脂肪干細(xì)胞多數(shù)都存在于脂肪內(nèi)外壁、脂肪組織筋膜等臨近組織中。采用冷凍離心能更好地保護(hù)脂肪干細(xì)胞的成活，低速短時(shí)間的第1次離心能很好保護(hù)細(xì)胞不被清洗離心掉。反復(fù)的雙通脂肪乳糜器過濾式破壁具有很好的粉碎脂肪顆粒的作用，能最大限度地把干細(xì)胞暴露出來，再經(jīng)過高速離心，能很好地把脂肪干細(xì)胞沉淀下來。干細(xì)胞輔助脂肪移植，能夠分化為脂肪細(xì)胞，補(bǔ)充因損傷而減少的脂肪細(xì)胞數(shù)量，實(shí)現(xiàn)脂肪再生;同時(shí)可分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血管新生及血供恢復(fù);通過旁分泌作用，釋放血管源性生長(zhǎng)因子，調(diào)整組織局部微循環(huán)境等[15-17]。

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[收稿日期]2018-12-05

本文引用格式：張若冰，謝惠明，張杰.自體脂肪干細(xì)胞的濃縮提取及在面部填充中的應(yīng)用效果[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2019，28（8）：22-25.