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        造成石蠟制片污染的可能因素

        2019-08-23 05:40:10劉天民童玲玲
        人人健康 2019年6期
        關(guān)鍵詞:脫水機(jī)蠟塊鑷子

        劉天民 童玲玲

        制作一張高質(zhì)量的石蠟切片是一個(gè)多步驟,多因素的過(guò)程。造成石蠟制片污染的因素主要分為兩大類:組織的污染和試劑的污染,以及人為的因素。本文主要根據(jù)石蠟制片的步驟,總結(jié)歸納可能出現(xiàn)污染的情況。

        1.取材

        活體新鮮組織離體后,應(yīng)立即放人10%中性福爾馬林中固定,送至病理科。組織送到后,專門(mén)人員應(yīng)將組織標(biāo)本與送檢單一一對(duì)應(yīng),核對(duì)病人的基本信息,送檢組織,若有不符,病理科有權(quán)拒收,待J臨床科室更正后再次接受,并將每日接受的標(biāo)本進(jìn)行登記。病理科標(biāo)本的接收核對(duì)是活檢組織處理的第一步,也是關(guān)鍵之一,如果一旦核對(duì)有誤,將出現(xiàn)嚴(yán)重而不可挽回的后果。

        對(duì)于某些較小或者較碎的組織,如診刮的子宮內(nèi)膜組織、門(mén)診活檢的破碎宮頸組織等,取材時(shí)應(yīng)將組織包在擦鏡紙里,以免掉出包埋盒。對(duì)于某些體積過(guò)大的組織,如胎盤(pán)組織等,需固定至第二天才取材,待標(biāo)本核對(duì)結(jié)束后,一定要重新粘貼標(biāo)本袋上的標(biāo)簽,以免因福爾馬林水溶液將標(biāo)本簽打濕,造成字跡不清楚,無(wú)法確認(rèn)標(biāo)本的來(lái)源。

        每次完成一個(gè)標(biāo)本的取材后,一定要對(duì)取材用的工具,如刀,鑷子,剪刀,取材板,直尺等用流水沖洗,保證不會(huì)將第一次取材的組織帶人第二次取材。取材的大小以1.5cm×1.5cm×(0.2-0.3)cm為宜,過(guò)大過(guò)厚脫水較軟,切片易破碎,過(guò)小組織脫水較硬,切片易出現(xiàn)橫紋。取材的合格與否直接影響后續(xù)組織的固定、脫水、透明、浸蠟及制片。

        2.脫水機(jī)處理

        取材完成后,組織放人全自動(dòng)脫水機(jī)中處理,主要包括組織的固定、脫水、透明。取材結(jié)束,須確保每個(gè)包埋盒的蓋子已蓋緊,以免組織在脫水機(jī)處理過(guò)程中掉出。脫水機(jī)中的甲醛,二甲苯,梯度酒精,液體石蠟,清洗試劑需及時(shí)更換,一方面保證脫水機(jī)每日的正常運(yùn)行,另一方面確保不因試劑的污染而造成組織的污染。

        3.包埋

        包埋的原則需遵循打開(kāi)一個(gè)脫水盒,包埋一個(gè)組織,杜絕一次性打開(kāi)多個(gè)脫水盒的現(xiàn)象,以免組織掉落或不慎掉人下一個(gè)包埋盒中。包埋過(guò)程的污染主要來(lái)源于組織的污染,在相鄰組織塊之間,完成一次包埋后需要將鑷子擦拭干凈,或者直接將鑷子插入包埋機(jī)的專屬鑷子加熱孔中,多把鑷子交替使用,以免上一個(gè)組織被人為帶入下一個(gè)組織中。如包埋診刮的子宮內(nèi)膜組織,由于是破碎組織,一方面鑷子上很容易粘連,另一方面組織易懸浮于底蠟中,需要及時(shí)將組織靠壓在一起。對(duì)于管狀結(jié)構(gòu)的組織,如輸卵管、臍帶等,管狀面與包埋面垂直,按“品”型包埋;對(duì)于皮紙組織,如外陰等,包埋面必須與表明垂直,這樣才能包埋皮膚的各層結(jié)構(gòu)都能被看觀察。

        4.凍塊

        石蠟組織完成包埋,制作成組織塊后,需放入一4℃冷凍一段時(shí)間,易于切片。在凍塊過(guò)程中,將一個(gè)病理號(hào)的每個(gè)組織按取材小號(hào)依次放置,方便后續(xù)切片。

        5.切片

        切片時(shí),先核對(duì)玻片上的病理號(hào)與蠟塊組織上的病理號(hào)是否一致,保證相同無(wú)誤的前體下,再行切片。切片時(shí),首先要保證毛筆刷、鑷子干凈,無(wú)污染物,尤其是一些含血凝塊較多的組織,在切片時(shí)容易產(chǎn)生大量細(xì)小的碎屑,進(jìn)而影響下一個(gè)蠟塊的切片。此外,在分片時(shí),一定要注意鑷子上污染物不能掉入切片上。

        展片時(shí),需用硬紙將水面上漂浮的多余組織打撈干凈,尤其對(duì)于脂肪組織等這類在水中極易散開(kāi)的切片,以防污染。若相鄰的蠟塊是同一類型的組織,可能就會(huì)無(wú)法識(shí)別。每日完成切片工作后,需將水浴缸清洗。

        6.HE染色

        HE染色污染主要是試劑的污染,如常見(jiàn)的蘇木精沉查。蘇木精被氧化后在染液表面會(huì)形成氧化膜以及在媒染劑的作用下形成的氧化鋁結(jié)晶,在進(jìn)行蘇木素上色時(shí),容易黏附在切片上,尤其是含黏液較多的組織。所以,除了定時(shí)更換或過(guò)濾蘇木素,每日染色前需將蘇木素表層的氧化膜打撈干凈,再行染色。此外,若出現(xiàn)某些切片烤片不當(dāng),組織掉落在染色試劑中,也可能會(huì)造成污染。

        7.裱片

        裱片時(shí)采用的中性樹(shù)膠的濃度要實(shí)驗(yàn),太濃膠水不易散開(kāi),太淡容易出現(xiàn)氣泡且溢出。此外,裱片時(shí)一定要使膠水全部覆蓋組織,尤其是某些鈣化或含有顆粒體的組織時(shí),由于該類組織表面不平整,易出現(xiàn)大氣泡,膠水?dāng)U散不均勻。

        8.核對(duì)

        在日常工作中,核對(duì)會(huì)花耗大量的時(shí)間,核對(duì)是制片的最后一步,也是關(guān)鍵步驟。處理上述在切片時(shí)核對(duì)蠟塊跟玻片的一致性,染色完成后需核對(duì)切片與取材記錄時(shí)的數(shù)目是否一致。

        9.保存

        門(mén)診標(biāo)本需保存15年,住院標(biāo)本需保存30年,所以每日的石蠟塊切片完畢后,需要及時(shí)的進(jìn)行封塊,以免組織暴露在空氣中被氧化。封塊時(shí)一定要注意時(shí)間,尤其是一些極小的組織,動(dòng)作要快,避免蠟塊融化組織掉出。

        綜上,從組織送檢至病理科開(kāi)始,就應(yīng)該嚴(yán)格的按照規(guī)范流程操作,重視每一個(gè)操作步驟。在實(shí)際工作中,每日的切片量較大時(shí),在保證制片質(zhì)量的前體下,需合理分配時(shí)間,秉承認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度,稍有一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)差錯(cuò),就會(huì)影響整體效果造成污染,影響最終的病理診斷。

        通訊作者:童玲玲。

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