王昭燦，吳海洪

（1.瓊海市中醫(yī)院 重癥醫(yī)學(xué)科，海南 瓊海 571400；2.海南省人民醫(yī)院 呼吸內(nèi)科， 海南 海口 570311）

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease, COPD）是臨床上最常見的呼吸系統(tǒng)疾病，具有發(fā)病率高、病情嚴重的特點[1-2]。COPD急性加重期患者臨床上短期表現(xiàn)為咳嗽、喘息及咳痰加重，嚴重影響患者的生活質(zhì)量及生存狀態(tài)[3]。JAK/STAT通路是細胞內(nèi)最常見的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，其異常與呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[4-5]。但以往的研究中未見到關(guān)于多索茶堿治療過程中JAK/STAT信號通路的參與作用。本文分析多索茶堿對COPD急性加重期的效果，為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月—2017年7月瓊海市中醫(yī)院收治的190例COPD急性加重期患者。排除合并肺炎、支氣管擴張、支氣管哮喘、活動性肺結(jié)核、并發(fā)惡性腫瘤、嚴重的認知功能障礙、代謝系統(tǒng)疾病及不同意參與本研究患者，最終納入110例符合條件患者作為COPD急性加重期組。其中，男性66例、 女性44例；年齡36～68歲，平均（49.8±11.4）歲?；颊呔现腥A醫(yī)學(xué)會呼吸病分會制定的《COPD診治指南》中關(guān)于COPD急性加重期的診斷標準[6]。根據(jù)疾病的嚴重程度，COPD急性加重期組中I級患者40例作為I級組，其中男性23例、女性17例；年齡36～66歲，平均（49.3±11.1）歲。Ⅱ級患者 36例作為Ⅱ級組，其中，男性20例、女性16例；年齡35～67歲，平均（49.8±11.7）歲。Ⅲ級患者34例 作為Ⅲ級組，其中，男性19例、女性15例；年齡36～68歲，平均（49.8±11.9）歲。選取同期本院健康體檢群眾90例作為對照組。其中，男性51例，女性39例；年齡36～67歲，平均（49.5±11.2）歲。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準并征得研究對象知情 同意。

1.2 方法

患者采用300 mg多索茶堿（國藥準字H20030763，山東華魯制藥有限公司）加入100 ml 5%葡萄糖注射液中稀釋后進行靜脈滴注，1次/d， 持續(xù)3 d。分析COPD急性加重期患者JAK1、JAK2、STAT1及STAT2的表達情況，分析治療前后患者第1秒用力呼氣容積（Forced expiratory volume in one second, FEV1）、用力肺活量（forced vital capacity, FVC）、FEV1/FVC、動脈血氧分壓（arterial partial pressure of oxygen, PaO2）、動脈血二氧化碳分壓（arterial partial pressure of carbon dioxide, PaCO2）及JAK/STAT通路蛋白的表達變化。

1.3 試劑

JAK1檢測試劑（美國R&D公司），JAK2檢測試劑盒（美國Omega公司），STAT1和STAT2檢測試劑盒（美國Sigma Aldrich公司）。操作均按照試劑盒說明書。

1.4 酶聯(lián)免疫吸附法

抽取患者行多索茶堿滴注前和3 d后的空腹靜脈血3 ml，1 200 r/min離心10 min后取上清，于-80℃條件下保存待用。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件。計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，比較用配對t檢驗或方差分析，進一步的兩兩比較用LSD-t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白水平比較

各組JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白水平比較，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），COPD急性加重期各組均高于對照組（P＜0.05）。見表1。

2.2 COPD急性加重期患者治療前后FEV1、FVC、FEV1/FVC及PaO2和PaCO2比較

COPD急性加重期患者治療前后FEV1、FVC、FEV1/FVC、PaO2和PaCO2比較，經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），治療后FEV1、FVC、FEV1/FVC及PaO2較治療前升高，PaCO2均較治療前降低。見 表2。

2.3 COPD急性加重期患者治療前后JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白水平比較

COPD急性加重期患者治療前后JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白相對表達量比較，經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），治療前高于治療后（P＜0.05）。見表3。

表1 各組JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白相對表達量比較（±s）

表1 各組JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白相對表達量比較（±s）

組別nJAK1JAK2STAT1STAT2對照組900.20±0.030.23±0.040.29±0.050.28±0.04 COPD急性加重期組1100.38±0.080.34±0.070.36±.080.37±0.08 I級400.25±0.050.28±0.070.32±0.070.33±0.06Ⅱ級360.36±0.080.37±0.040.35±.050.39±0.08Ⅲ級340.44±0.110.43±0.090.41±0.070.45±0.12 F值34.27848.89835.77632.154 P值0.0080.0150.0220.014

表2 COPD急性加重期患者治療前后FEV1、FVC、FEV1/FVC及PaO2和PaCO2比較（n =110，±s）

表2 COPD急性加重期患者治療前后FEV1、FVC、FEV1/FVC及PaO2和PaCO2比較（n =110，±s）

時間FEV1/LFVC/LFEV1/FVC/%PaO2/mmHgPaCO2/mmHg治療前1.29±0.282.02±0.3170.5±7.1455.4±6.7165.7±7.11治療后1.74±0.362.48±0.3484.2±8.1470.2±8.2148.2±6.48 t值2.5463.1192.1873.2083.174 P值0.0120.0090.0180.0230.011

表3 COPD急性加重期患者治療前后JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白相對表達量比較（n =110，±s）

表3 COPD急性加重期患者治療前后JAK1、JAK2、STAT1和STAT2蛋白相對表達量比較（n =110，±s）

時間JAK1JAK2STAT1STAT2治療前0.38±0.080.34±0.070.36±0.080.37±0.08治療后0.30±0.080.28±0.070.31±0.090.27±0.07 t值3.4432.0843.1872.902 P值0.0200.0290.0070.004

3 討論

COPD是臨床上最常見的呼系統(tǒng)疾病之一，給患者和家庭帶來沉重的負擔(dān)。COPD急性加重期能引起患者短期內(nèi)咳嗽、喘息、咳痰加重和痰呈膿性，但其發(fā)病的確切分子機制尚不明確。本研究發(fā)現(xiàn)COPD急性加重期患者JAK/STAT通路蛋白表達較對照組高，且隨著分級的升高，上述蛋白表達升高顯著；多索茶堿治療后肺功能明顯改善而該信號通路蛋白的表達水平降低，表明多索茶堿對COPD急性加重期患者肺功能有明顯的改善作用，且對JAK/STAT通路蛋白表達有明顯的下調(diào)作用。

JAK/STAT信號通路是細胞內(nèi)信號傳遞的重要方面，其相關(guān)蛋白表達異常也是呼吸系統(tǒng)疾病發(fā)病和藥物治療的潛在靶點[7]。在分析PI3K/Akt和JAK2/STAT3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在SO2抗大鼠肢體缺血再灌注致急性肺損傷中的作用時發(fā)現(xiàn)JAK2/STAT3和PI3K/Akt信號通路都參與了SO2抗肢體缺血再灌注致急性肺損傷的作用，JAK2/STAT3通路的活化，能夠使I/R損傷加重[8]。六味補氣膠囊對COPD肺氣虛證大鼠JAK/STAT通路的影響時也證實其通過下調(diào)JAK1、STAT3及p-STAT3，降低炎癥反應(yīng)，改善COPD肺氣虛證肺功能及癥狀體征[9]。以往的研究也發(fā)現(xiàn)清燥救肺湯能顯著抑制荷Lewis小鼠肺癌細胞增殖，其機制可能與降低p-JAK1表達及抑制STAT1蛋白磷酸化有關(guān)[10]。且保肺定喘湯能有效減輕COPD大鼠肺血管重構(gòu)，其機制可能與抑制JAK/STAT信號傳導(dǎo)通路有關(guān)[11]。以往的研究證實在布地奈德治療哮喘的同時合用中藥淫羊藿女貞子可通過調(diào)節(jié)JAK/STAT4-5蛋白的磷酸化表達產(chǎn)生協(xié)同增效作用，且外源性IL-27可能通過抑制JAK/STAT通路相關(guān)蛋白的磷酸化減輕肺纖維化[12-13]。 而同時，本研究也發(fā)現(xiàn)多索茶堿治療后患者肺功能明顯改善，且JAK/STAT通路蛋白水平表達降低，表明多索茶堿對COPD急性加重期患者肺功能有明顯的改善作用，且對JAK/STAT通路蛋白表達有明顯的下調(diào)作用。

綜上所述，多索茶堿對COPD急性加重期患者肺功能有明顯的改善作用，且對JAK/STAT通路蛋白表達有明顯的下調(diào)作用。