孫民長(zhǎng)

(河南省滑縣中醫(yī)院,河南 安陽(yáng)456400)

菊花為常見藥材之一,多用于治療頭痛眩暈、心胸?zé)峒澳砍嗄[痛等。然而由于菊花的密度相對(duì)較小,流通性較差,普通飲片不利于進(jìn)行定量小包裝與藥房調(diào)劑[1]。為有效解決此問(wèn)題,相關(guān)人員研發(fā)出了壓制飲片技術(shù),該技術(shù)利用物理壓縮的方法,將飲片制作成一定形狀,便于直接使用包裝材料進(jìn)行相應(yīng)的封裝處理,有利于藥師對(duì)其進(jìn)行直接調(diào)配。另外,煮散顆粒多以傳統(tǒng)中藥煮散理論為依托,僅改變對(duì)藥材的粉碎程度,有效保持了傳統(tǒng)意義上湯劑煎煮過(guò)程,根據(jù)患者病情進(jìn)行藥量增減,具有吸收迅速、療效較好的優(yōu)勢(shì)。

1 儀器及測(cè)試藥品

1.1 儀器 高效液相色譜儀;色譜工作站;C18色譜柱;分析天平;小型中藥粉碎機(jī);電熱鼓風(fēng)干燥箱;超聲波清洗器。

1.2 測(cè)試 藥品菊花煮散顆粒(實(shí)驗(yàn)室自制);菊花傳統(tǒng)飲片(四川新荷花中藥飲片股份有限公司,批號(hào):0910114);色譜甲醇(美國(guó)Fisher公司);水(實(shí)驗(yàn)室自制超純水);3,5-O-二咖啡?；鼘幩?中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)107643-201507);異綠原酸A(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)111723-200805);綠原酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)110753-200413)。

2 方法及結(jié)果

2.1 菊花飲片測(cè)試溶液制備

(1)壓制飲片測(cè)試溶液的制備 通過(guò)精密稱取的方式稱取10份菊花壓制飲片,共計(jì)30 g,在藥品中加入10倍量的水,靜置30 min。取其中5份樣品分別進(jìn)行煎煮,煎煮時(shí)間分別為5、10、15、20、30 min,煎煮完成后過(guò)濾,濾液定容到250 mL,備用。取剩余5份樣品,煎煮30 min后濾過(guò),將濾液收集備用;隨后向?yàn)V渣中加入10倍量的水后再進(jìn)行煎煮,煎煮時(shí)間分別為5、10、15、20、30 min,濾過(guò)后,將兩次濾液合并,再將其定容到250 mL,備用。

(2)傳統(tǒng)飲片測(cè)試溶液的制備 通過(guò)精密稱取的方式稱取10份菊花傳統(tǒng)飲片,共計(jì)30 g,制備方法同上。

(3)煮散顆粒測(cè)試溶液的制備 通過(guò)精密稱取的方式稱取10份菊花煮散顆粒,共計(jì)30 g,制備方法同上。

2.2 測(cè)試的色譜條件 選取C18色譜柱;檢測(cè)波長(zhǎng)為328 nm,流動(dòng)相為乙腈(A)-0.1%的磷酸水(B)和梯度洗脫;進(jìn)樣量為10μL,柱溫控制在30℃,按綠原酸計(jì),理論塔板數(shù)應(yīng)≥3 000。

2.3 對(duì)照品的制備 通過(guò)精密稱取的方式稱取3,5-O-二咖啡?；鼘幩?、異綠原酸A及綠原酸。上述3種物質(zhì)質(zhì)量分別為13.46 mg、15.55 mg、12.01 mg,將其分別放置于10 m L容量瓶?jī)?nèi)并加入甲醇,使其溶解至相應(yīng)的刻度后搖勻,即得到儲(chǔ)備液。精密吸取儲(chǔ)備液3次,每次1 m L,將其置于10 m L容量瓶?jī)?nèi)并加入甲醇,配制成濃度為0.134 6 mg/m L、0.155 5 mg/m L、0.120 1 mg/m L的溶液。

2.4 方法學(xué)實(shí)驗(yàn)

(1)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一溶液,依據(jù)上述色譜條件,放置0、120、240、360、480、600、720 min后進(jìn)樣,測(cè)得上述3種物質(zhì)的峰面積相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)值分別為0.79%、1.52%、1.60%(n=6),證明溶液在室溫內(nèi)基本保持穩(wěn)定。

(2)精密度實(shí)驗(yàn) 通過(guò)精密吸取的方式,于1 d內(nèi)進(jìn)行6次連續(xù)進(jìn)樣,每次取量為10μL,按照上述色譜條件,測(cè)定上述3種物質(zhì)在1 d內(nèi)精密度RSD值。經(jīng)測(cè)定,上述3種物質(zhì)的1 d內(nèi)精密度分別為0.70%、1.09%、1.35%(n=6)。連續(xù)3 d進(jìn)行進(jìn)樣,測(cè)得其日間精密度分別為0.77%、1.49%、1.37%(n=6),證明儀器具有良好的精密度。

(3)重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 在上述色譜條件下,取供測(cè)試溶液10份,每份10 m L,測(cè)得3種物質(zhì)的RSD值分別為0.69%、1.09%、1.73%(n=6)。

(4)加樣回收率實(shí)驗(yàn) 通過(guò)精密稱取的方式,稱取6份樣品溶液,每份質(zhì)量為5 mL,分別向其中加入對(duì)照品溶液,其中3,5-O-二咖啡?；鼘幩崛芤汉彤惥G原酸A溶液各1 m L,綠原酸溶液2 m L,確保加入量和供試品中的各成分具有相當(dāng)?shù)暮?按照上述色譜條件,計(jì)算回收率與RSD值。經(jīng)過(guò)測(cè)定后得出,3種物質(zhì)回收率的平均值分別為96.95%、97.25%、96.90%,其RSD值分別為1.95%、0.76%、1.47%,證明其加樣回收率與要求相符。

2.5 干膏收率的測(cè)定 采用精密吸取的方式分別吸取3種測(cè)試溶液各15 m L,將其放置在已經(jīng)恒重的蒸發(fā)器皿內(nèi)。蒸干后,在105℃環(huán)境下干燥3 h,然后將其放置在干燥器中進(jìn)行冷卻,冷卻時(shí)間為30 min,隨后進(jìn)行重量的精密測(cè)定。

2.6 煎煮曲線結(jié)果 對(duì)菊花壓制飲片、傳統(tǒng)飲片及煮散顆粒在第1、2次煎煮過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)的溶出曲線進(jìn)行比較。數(shù)據(jù)顯示,飲片形式不同對(duì)煎煮溶出效果無(wú)影響,3種形式的飲片均可有效確保菊花的煎煮質(zhì)量,其中煮散顆粒的溶出速度較快,但與其他兩種形式相比并無(wú)明顯優(yōu)勢(shì)。見表1、表2。

表1 3種形式菊花飲片第1次煎煮溶出曲線

表2 3種形式菊花飲片第2次煎煮溶出曲線

3 討論

研究數(shù)據(jù)顯示,壓制飲片在3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸、異綠原酸A及綠原酸含量與干膏收率等方面略高于傳統(tǒng)飲片,但并無(wú)明顯優(yōu)勢(shì),證明壓制過(guò)后并不會(huì)對(duì)有效成分的溶出造成影響。對(duì)花草類藥材而言,壓制后有利于運(yùn)輸與存儲(chǔ),同時(shí)有利于藥師進(jìn)行藥劑的調(diào)配[2]。同時(shí),對(duì)煮散顆粒而言,隨著煎煮時(shí)間的延長(zhǎng),其煎出含量明顯降低。王蕊等[3]研究顯示,煮散顆粒的異綠原酸A的含量較低,可能由于高溫破壞,隨著煎煮時(shí)間的延長(zhǎng),煎出的含量也隨之降低,與本研究結(jié)果基本一致,證明菊花類藥材煎制時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。但是由于本研究時(shí)間較短,且研究環(huán)境有限,部分結(jié)果可能存在誤差,希望能在以后的研究中不斷改進(jìn)。

綜上所述,不同飲片形式不會(huì)影響菊花的煎煮質(zhì)量,其煎煮效果不受飲片形式的影響。