買爾哈巴·吾恩阿里比

（伊寧市農業(yè)農村局動物衛(wèi)生監(jiān)督所，新疆伊寧 835000）

1 發(fā)病情況及臨床癥狀

2019年5月15日，伊寧市某奶牛場一頭奶牛于清晨4時開始陰門流出大量血液，但牛無臨產(chǎn)癥狀，獸醫(yī)對牛進行了引產(chǎn)，該牛產(chǎn)下一母犢為死胎，產(chǎn)后該牛飲食欲廢絕，至5月14日胎衣未下，且陰門流出紅褐色血液。14日晚12時該牛出現(xiàn)嚴重的呼吸困難，且有疼痛表現(xiàn)，獸醫(yī)對牛進行了強心補液及抗生素治療，在輸液過程中牛因心衰竭呼吸困難而死亡。

2 剖檢變化

肺、子宮子葉嚴重感染，出血性壞死，顏色發(fā)黑，切開肺流出黑褐色的液體，小腸黏膜充血、出血嚴重。其他器官基本正常。

3 病料采集

無菌采取病死牛的病理變化明顯的肺、子宮子葉等器官進行分離鑒定。

4 病原菌分類與鑒定

4.1 病原菌的分離培養(yǎng)

4.1.1 組織涂片

取病牛的肺及子宮子葉組織分別涂片，革蘭氏、瑞特氏、堿性美藍染色，鏡檢。在肺組織革蘭氏染色涂片中可見大量兩端鈍圓，無芽孢及莢膜、單在或成對革蘭氏陰性中等大小桿菌，美蘭染色可見著色不均的顆?；騼啥藵馊局械葪U菌。子宮子葉組織革蘭氏染色可見大量革蘭氏陰性大、中等桿菌，革蘭氏陽性球菌及大桿菌[1]。

4.1.2 增菌培養(yǎng)

將采集的肺、子宮子葉組織分別接種于普通肉湯、厭氣肝湯，37℃培養(yǎng)24小時，觀察生長情況。結果肺組織的肉湯培養(yǎng)物渾濁、在表面形成初期為綠色后期變成淡褐色的薄膜，培養(yǎng)物發(fā)綠，染色鏡檢培養(yǎng)物可見革蘭氏陰性中等桿菌。在對子宮子葉厭氣肝湯培養(yǎng)物的染色鏡檢中可見大量革蘭氏陰性大、中等桿菌，革蘭氏陽性球菌及大桿菌。

4.1.3 純培養(yǎng)及分離培養(yǎng)

取肺組織肉湯培養(yǎng)物在普通培養(yǎng)基上劃線進行純培養(yǎng)。取子葉培養(yǎng)物在鮮血瓊脂上用焦性沒食子酸法進行厭氧純培養(yǎng)和在普通瓊脂上劃線進行需氧菌的純培養(yǎng)。染色鏡檢，可見四株菌，即革蘭氏陰性大，中等桿菌，革蘭氏陽性球菌及大桿菌。無菌取上述四株菌的單個菌落分別接種于普通瓊脂，鮮血瓊脂，SS瓊脂，普通肉湯，厭氣肝湯，37°C培養(yǎng)24小時，肺組織的培養(yǎng)物在普通瓊脂上長出，較大、光滑、扁平、濕潤、邊緣整齊的菌落，培養(yǎng)物發(fā)綠色，肉湯培養(yǎng)物渾濁呈黃綠色。子葉培養(yǎng)物在SS培養(yǎng)基上長出粉紅色、較大、隆起邊緣整齊的菌落。在普通培養(yǎng)基上長出針尖大小的灰白色菌落，在鮮血培養(yǎng)基上進行的厭氧培養(yǎng)長出不容血且邊緣不整齊的較大菌落。

4.2 生化鑒定

取上述致死小白鼠菌株的普通瓊脂培養(yǎng)物進行氧化酶實驗，結果為陰性。取培養(yǎng)物接種ATB EXPRESSION細菌自動鑒定及藥敏測試儀ID32E試條上37℃培養(yǎng)24h，上機鑒定，其結果見表1。

表1

5 防制

（1）加強飼養(yǎng)管理，立即停止飼喂發(fā)霉麩皮，避免因不斷攝入發(fā)霉飼料產(chǎn)生的有毒物質引起中毒，為綠膿桿菌的感染提供機會。

（2）牛舍內應用福爾馬林徹底消毒，搞好環(huán)境衛(wèi)生。

（3）本實驗室的藥敏結果顯示，該菌對環(huán)丙沙星最敏感，其次為羧芐青霉素、諾氟沙星。氧氟沙星，慶大霉素效果不明顯。對頭孢拉定、氨芐西林、青霉素等藥物不敏感。