王洪志 楊林 熊波 羅軍

摘要：目的? 探討CK20、Ki67、Ras P21蛋白三種腫瘤標(biāo)志物在正常膀胱組織、不同類型腺性膀胱炎及膀胱腺癌組織中表達(dá)的特點(diǎn)。方法? 將腺性膀胱炎經(jīng)典型（泌尿上皮型）20例、腸上皮型20例、前列腺上皮型20例，正常膀胱組織20例、膀胱腺癌組織20例，采用免疫組織化學(xué)法，檢查CK20、Ki67、Ras P21在各分型腺性膀胱炎中的表達(dá)，并與正常膀胱組織、膀胱腺癌組織組進(jìn)行比較。結(jié)果? 腸上皮型和前列腺上皮型腺性膀胱炎 CK20、Ki67、Ras P21陽性表達(dá)與正常膀胱黏膜組織比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而經(jīng)典型（泌尿上皮型）CK20、Ki67、Ras P21的表達(dá)與正常膀胱黏膜組織比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），腸上皮型和前列腺上皮型腺性膀胱炎及膀胱腺癌中CK20、Ki67、Ras P21高表達(dá)。腸上皮型和前列腺上皮型腺性膀胱炎可能為癌前病變。結(jié)論? 對于腸上皮型及前列腺型腺性膀胱炎，應(yīng)進(jìn)行積極的手術(shù)治療及抗癌藥物膀胱灌注，并嚴(yán)密術(shù)后隨訪。

關(guān)鍵詞：腺性膀胱炎;分型;CK20;Ki67;Ras P21

中圖分類號：R694.3? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.13.026

文章編號：1006-1959（2019）13-0094-03

Abstract：Objective? To investigate the expression of three tumor markers of CK20， Ki67 and Ras P21 in normal bladder tissues， different types of glandular cystitis and bladder adenocarcinoma. Methods? 10 cases of classic cystitis （urinary epithelial type）， 10 cases of intestinal epithelium， 10 cases of prostate epithelium， 10 cases of normal bladder tissue and 10 cases of bladder adenocarcinoma were examined by immunohistochemistry. The expression of Ki67 and Ras P21 in each glandular cystitis was compared with normal bladder tissue and bladder adenocarcinoma.Results? The positive expressions of CK20， Ki67 and Ras P21 in intestinal epithelial type and prostatic epithelial glandular cystitis were significantly different from those in normal bladder mucosa （P<0.05）. The expression of classic （urinary epithelial） CK20， Ki67， Ras P21 was not significantly different from normal bladder mucosa （P>0.05）， intestinal epithelial and prostatic epithelial cystitis and bladder adenocarcinoma. CK20， Ki67， and Ras P21 are highly expressed. Intestinal epithelial and prostatic epithelial glandular cystitis may be precancerous lesions.Conclusion? For intestinal epithelial and prostatic glandular cystitis， active surgical treatment and anti-cancer drug bladder infusion should be performed and followed up closely.

Key words：Glandular cystitis;Typing;CK20;Ki67;Ras P21

腺性膀胱炎（glandular cystitis）是一種膀胱粘膜上皮增生性病變，病因不明，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為是由于殘余胚胎的發(fā)展和膀胱黏膜上皮化生所致。腺性膀胱炎有經(jīng)典型（泌尿上皮型）、腸上皮型、前列腺上皮型3種病理組織學(xué)類型。自1958年Shaw提出腺性膀胱炎可能發(fā)展為腺癌以來，許多學(xué)者傾向于認(rèn)為腺性膀胱炎為膀胱癌的癌前病變，有發(fā)展成膀胱腺癌的可能，亦可與腺癌并存，因此越來越引起臨床醫(yī)學(xué)的重視，主張采用積極的治療手段[1]。但近年來有關(guān)腺性膀胱炎的報(bào)告明顯增多，與膀胱腺癌的低發(fā)病率不相一致。過多的外科治療和抗腫瘤藥物的膀胱灌注化療有“過度治療”之嫌。研究表明，尿路上皮細(xì)胞的CK20表達(dá)與細(xì)胞分化有關(guān)，正常表達(dá)時限于表層（偶爾中層）細(xì)胞，如分化異常，這種表達(dá)限制消失，出現(xiàn)全層細(xì)胞表達(dá)[2]。Ki67作為細(xì)胞周期中核抗原的決定簇，在細(xì)胞周期中所有處于活動期的細(xì)胞均可表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)與腫瘤的復(fù)發(fā)、分級和分期有關(guān)。Ras P21基因突變是促發(fā)正常膀胱粘膜細(xì)胞惡變的一條重要途徑。通過免疫組化方法，檢測不同病理分型的腺性膀胱炎等病變標(biāo)本中CK20、Ki67、Ras P21的表達(dá)，本研究試圖通過分析這三種腫瘤標(biāo)志物在正常膀胱組織與不同類型腺性膀胱炎及膀胱腺癌組織中表達(dá)的特點(diǎn)，尋找提示高危腺性膀胱炎的類型，以期對不同類型腺性膀胱炎進(jìn)行針對性治療。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1標(biāo)本來源? 收集重慶市璧山區(qū)人民醫(yī)院2013年11月～2018年9月收治的腺性膀胱炎經(jīng)典型（泌尿上皮型）20例 、腸上皮型20例、前列腺上皮型20例，正常膀胱組織20例、膀胱腺癌組織20例。

1.1.2試劑? Rabbit anti-K-ras，購自SANTA CRUZ北京中杉金橋公司分裝）;兔抗人K-ras多克隆抗體，此抗體和人的K-ras蛋白反應(yīng);Mouse anti-CK20克隆號Ks20.8，購自DAKO公司，可以與人的CK20蛋白特異反應(yīng);Rabbit anti-Ki-67克隆號MIB，購自DAKO公司，可以與人的Ki-67蛋白特異反應(yīng)。

1.2方法? 免疫組化試劑盒（ABC法）等免疫組化ABC法。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)： Ki-67陽性定位在細(xì)胞核，K-ras P21陽性定位在細(xì)胞漿/膜，CK20陽性定位在細(xì)胞漿。判讀標(biāo)準(zhǔn)：染色陰性：0無目標(biāo)細(xì)胞染色。染色陽性：1+：1%～25%細(xì)胞染色;2+：26%～50%細(xì)胞染色;3+：51%～75%細(xì)胞染色;4+：75%細(xì)胞染色。Ki67判讀評分標(biāo)準(zhǔn)0：即陰性，無陽性染色細(xì)胞存在;1+：陽性染色細(xì)胞<5%;2+：陽性染色細(xì)胞5%～9%;3+：陽性染色細(xì)胞10%～49%;4+：陽性染色細(xì)胞≥50%，見圖1。以上分級標(biāo)準(zhǔn)參考CAP Immunohistochemisty Survey MK中的計(jì)分系統(tǒng)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理? 采用SPSS 13.0版統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包CROOSTABS檢驗(yàn)以（%）表示，以α=0.05為統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測水準(zhǔn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

正常膀胱粘膜、三種分型腺性膀胱炎及膀胱腺癌組織中CK20、Ki67、Ras P21的表達(dá)結(jié)果見表1。正常膀胱粘膜、膀胱移行細(xì)胞癌分別三種類型腺性膀胱炎組比較（只有12.5%的理論數(shù)<5，用多個樣本率的比較）：①正常膀胱粘膜、腺性膀胱炎經(jīng)典型（泌尿上皮型）組中CK20、Ki67、Ras P21的表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;②正常膀胱粘膜與腺性膀胱炎（腸上皮型）、腺性膀胱炎（前列腺上皮型）組中CK20、Ki67、Ras P21的表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;③腺性膀胱炎（腸上皮型）、腺性膀胱炎（前列腺上皮型）與膀胱腺癌組中CK20、Ki67、Ras P21高表達(dá)。

3討論

腺性膀胱炎是目前認(rèn)為的一種癌前病變，但未完全證實(shí)。王洪志[3]等學(xué)者有實(shí)驗(yàn)結(jié)果揭示：腺性膀胱炎可能是正常膀胱粘膜發(fā)展成膀胱腺癌的一個中間階段，CK20、Ki67、Ras P21蛋白是發(fā)現(xiàn)腺性膀胱炎癌變的良好指標(biāo)，為早期診斷膀胱癌提供信息;對CK20、Ki67、Ras P21免疫組化陽性的腺性膀胱炎，臨床上應(yīng)積極治療并注意隨訪。臨床上腺性膀胱炎發(fā)病率較高，但是膀胱腺癌發(fā)病率卻較低，故需要進(jìn)一步研究不同分型腺性膀胱炎與膀胱腫瘤的關(guān)系，以便進(jìn)一步了解其之間的發(fā)展關(guān)系。

本研究通過將腺性膀胱炎進(jìn)行病理分組，研究CK20、Ki67、Ras P21腫瘤標(biāo)志物在各分型中的表達(dá)，并與正常膀胱黏膜與膀胱腺癌作比較，以期對腺性膀胱炎簡單分型來指導(dǎo)臨床治療。CK20、Ki67、Ras P21 是目前被公認(rèn)的膀胱癌的腫瘤標(biāo)志物，并與膀胱癌的發(fā)展、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，腫瘤的分級、分期有關(guān)[4，5]。本研究中，正常膀胱粘膜及腺性膀胱炎經(jīng)典型（泌尿上皮型）中CK20、Ki67、Ras P21蛋白呈弱陽性低表達(dá)，而腸上皮型及前列腺型腺性膀胱炎及膀胱腺癌CK20、Ki67、Ras P21蛋白陽性表達(dá)率較經(jīng)典型腺性膀胱炎明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。有文獻(xiàn)報(bào)道，廣泛的腸上皮化生現(xiàn)象及前列腺上皮化生是腺性膀胱炎不確定的惡變因素[6]，這一結(jié)論也與本研究結(jié)果相符。腸上皮型、前列腺型腺性膀胱炎CK20、Ki67、Ras P21表達(dá)率較高，與膀胱正常黏膜組比較，腸上皮型及前列腺型組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。這一結(jié)果似乎可解釋臨床上腺性膀胱炎轉(zhuǎn)變?yōu)榘螂紫侔┑牡桶l(fā)病率現(xiàn)象。

綜上所述，對臨床上腺性膀胱炎患者，主張進(jìn)行腸上皮型及前列腺型腺性膀胱炎進(jìn)行積極的手術(shù)治療及抗癌藥物膀胱灌注，并嚴(yán)密術(shù)后隨訪。對于經(jīng)典型（泌尿上皮型），在去除慢性刺激因素下進(jìn)行臨床觀察即可，當(dāng)然這一結(jié)果有待進(jìn)一步的循證醫(yī)學(xué)證實(shí)。

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收稿日期：2019-3-9;修回日期：2019-3-21

編輯/張建婷