李軍紅 馮 科 梁小娟 周 靜

(廣西柳州市人民醫(yī)院優(yōu)生遺傳門診，柳州市 545001，電子郵箱：ljhong0725@sohu.com)

染色體病是一種常見的遺傳性疾病，是由于染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常而引起的疾病，可導(dǎo)致智力低下、生長發(fā)育遲緩和多發(fā)畸形，是新生兒發(fā)病和死亡的重要原因之一[1]，逐漸成為影響兒童健康和出生人口素質(zhì)的重大公共衛(wèi)生問題，給社會和家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)。本研究對1 460例新生兒臍血細(xì)胞染色體核型進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2015年1月至2018年10月在本院分娩的1 460例新生兒。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)孕母年齡19～45歲，分娩孕周為35～42周；(2)在孕期未做產(chǎn)前篩查，或者孕期超聲提示胎兒軟指標(biāo)異常，或有產(chǎn)前診斷指征(高齡、產(chǎn)前篩查高危、不良孕史、超聲提示羊水過多或過少、孕早期接觸過導(dǎo)致胎兒先天缺陷的物質(zhì)等)但拒絕產(chǎn)前診斷的高危孕婦。

1.2 方法 新生兒娩出后抽取臍帶血2 mL，用肝素抗凝，取混合后的抗凝血0.5 mL注入淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基(廣州達(dá)輝生物技術(shù)公司生產(chǎn))中，混勻后置37℃溫箱中培養(yǎng)72 h。收獲細(xì)胞時提前2 h加入50 μL秋水仙素，使細(xì)胞分裂停止，染色體處于分裂中期狀態(tài)時轉(zhuǎn)移至10 mL離心管，1 800 r/min離心10 min，棄上清液后，加入0.075 mol/L的氯化鉀低滲液8 mL，混勻后置于37℃水浴箱中低滲30 min，然后加入甲醇和冰醋酸(3 ∶1)混合的固定液1 mL混勻，10 min后1 800 r/min離心10 min，棄上清液，加入8 mL固定液混勻靜置30 min，然后再1 800 r/min離心10 min，棄上清液，再次加入8 mL固定液混勻后直接1 800 r/min離心10 min，棄上清液后加入0.5 mL固定液得到細(xì)胞懸液，最后把懸液滴到玻片上，在75℃烤箱里烤片3 h。第二天對制作好的玻片進(jìn)行染色體G顯帶處理。每例新生兒分析5個以上核型，計(jì)數(shù)中期分裂相20個以上，如出現(xiàn)嵌合型細(xì)胞系則計(jì)數(shù)100個分裂象。

2結(jié)果

1 460例新生兒中，染色體核型異常28例，檢出率為1.92%，其中常染色體異常19例，檢出率為1.30%，性染色體異常9例，檢出率為0.62%。19例常染色體異常中，數(shù)目異常8例，檢出率為0.55%；結(jié)構(gòu)異常11例，檢出率為0.75%。染色體多態(tài)性變異54例，檢出率3.70%。異常染色體核型檢測情況見表1，染色體多態(tài)性核型檢出情況見表2。

表1 28例染色體異常核型

注：*為標(biāo)記染色體。

表2 54例染色體多態(tài)性核型

3 討 論

本研究中1 460例新生兒的染色體異常率為1.92%，高于崔向英等[2]報(bào)告的0.6%，考慮為近年來人們不良生活方式，環(huán)境污染日益嚴(yán)重，各種物理、化學(xué)、生物感染，孕婦高齡導(dǎo)致染色體畸變所致。因此，應(yīng)加強(qiáng)對高危孕婦進(jìn)行產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷，對于孕期未行產(chǎn)前診斷者，在其新生兒出生時應(yīng)留取臍帶血做染色體檢測，這是對妊娠期未行產(chǎn)前診斷的有益補(bǔ)充，有利于早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，在二級預(yù)防中有不可替代的作用[3]。及時發(fā)現(xiàn)異常染色體患兒，可為優(yōu)生優(yōu)育提供有價值的臨床診斷依據(jù)，對提高人口素質(zhì)具有重要意義。

3.1 染色體異常與唐氏綜合征 唐氏綜合征又稱21三體綜合征，是人類第一個被確診的染色體疾病，表現(xiàn)為智力障礙，生長發(fā)育遲緩，特殊面容和多發(fā)畸形等，其發(fā)生機(jī)理為生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂或受精卵在有絲分裂時，21號染色體不分離。該病群體發(fā)病率為0.125%～0.167%，且發(fā)病率隨孕母年齡增加而升高[4]，目前尚無有效的治療方法。本研究中21三體綜合征檢出率為0.34%，較群體發(fā)生率升高，考慮為研究對象是高危妊娠孕婦所致。該病患者存活時間較長，但因出現(xiàn)智力障礙給家庭帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)及精神壓力，因此預(yù)防和控制唐氏綜合征患兒的出生是優(yōu)生優(yōu)育的重要內(nèi)容。通過對孕婦開展產(chǎn)前篩查及超聲軟指標(biāo)(如頸項(xiàng)透明層)的篩查，對高風(fēng)險的孕婦實(shí)施產(chǎn)前診斷，是降低和防止唐氏綜合征的主要措施，尤其在國家開放“二孩”政策后，高齡孕婦數(shù)量增加，而高齡孕婦卵細(xì)胞有老化趨勢，發(fā)生唐氏綜合征的風(fēng)險率升高，重視高齡孕婦的遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷工作，可降低唐氏綜合征患兒的出生率，減少出生缺陷，提高人口素質(zhì)。

3.2 性染色體異常與Turner綜合征和卡爾曼綜合征 本研究中，檢出性染色體異常9例，其中45,X 3例，臨床表現(xiàn)為Turner綜合征(又稱先天性卵巢發(fā)育不全)，其在活產(chǎn)女嬰中的發(fā)生率為0.02%，99%的病例會在早期自發(fā)流產(chǎn)[5]。Turner綜合征其最常見原因?yàn)樾匀旧w不分離，主要發(fā)生于父方，與孕婦年齡無關(guān)。所有患兒均表現(xiàn)為身材矮小，與染色體有關(guān)的卵巢早衰多見，而其他臟器(包括骨骼、淋巴水腫、耳聾、心血管、甲狀腺、泌尿生殖系統(tǒng))異常情況較少，多數(shù)Turner綜合征女性智力正常，但有可能存在發(fā)育遲緩、失語和行為問題。Turner綜合征無法治愈，但可以通過合理的治療來減輕癥狀：在性成熟期及成人期接受治療，包括生長激素和低劑量的雄激素治療，可明顯增加身高，雌激素替代治療常用于促進(jìn)第二性征發(fā)育以及維持正常的骨密度和組織健康。另外，在1 460例新生兒中，共檢出3例47,XXY，檢出率為0.21%。47,XXY是人類最常見的染色體異常，是由染色體增加而導(dǎo)致的第二大常見疾病，即卡爾曼綜合征，又稱性幼稚-失嗅綜合征，臨床表現(xiàn)為不育、睪丸小、身高高于平均身高、體毛稀疏、有女性化表現(xiàn)，一般無智力遲緩現(xiàn)象。雖然染色體異常不可逆轉(zhuǎn)，但有多種方法可以治療其相關(guān)癥狀。研究顯示，于12歲左右開始采用雄激素替代治療，可使多數(shù)男性擁有正常性生活[6]。本研究中檢出性染色體異常9例，檢出率為0.62%，高于既往研究報(bào)告的0.10%[7]，考慮由本研究對象主要為高危孕婦所致。

3.3 染色體多態(tài)性 染色體多態(tài)性主要是異染色質(zhì)的變異，結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)集中分布在著絲粒、端粒區(qū)、隨體、次縊痕和Y染色體長臂[8]，主要包括D/G組染色體變異，1、9、16號染色體次縊痕增加或減少，9號染色體臂間到位，大Y和小Y染色質(zhì)變異等。異染色質(zhì)的變異有可能影響生殖細(xì)胞減數(shù)分裂時的染色體配對聯(lián)合，甚至影響配子的形成，或者因?yàn)槲恢眯?yīng)，使一些與生殖相關(guān)的基因沉默，從而引起生殖異常。目前染色體多態(tài)性與臨床效應(yīng)間的關(guān)聯(lián)仍存在爭議[9]。本研究檢出新生兒染色體多態(tài)性54例，追蹤其父母外周血染色體檢測結(jié)果，其中42例為父母一方攜帶有相同的染色體多態(tài)性，考慮為遺傳效應(yīng)，表型無異常，建議隨訪這些染色體多態(tài)性新生兒長大后的生殖功能情況。男性染色體大Y是由于異染色質(zhì)中的DNA過多重復(fù)造成，可能會導(dǎo)致女方流產(chǎn)、胚胎停育及死胎等不良妊娠結(jié)局。本研究共檢出9號染色體臂間倒位28例，檢出率為1.92%，高于何琳琳等[10]報(bào)告的0.9%。9號染色體臂間倒位的遺傳效應(yīng)主要取決于重復(fù)或缺失片段的長短及其所含基因的致死效應(yīng)，其倒位片段越短，配子和合子正常發(fā)育的可能性就越小，因此發(fā)生流產(chǎn)及死產(chǎn)的概率就越高。傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為，染色體多態(tài)性是屬于正常的變異，但越來越多的研究表明染色體多態(tài)性與不良的生殖功能相關(guān)[11]。

3.4 染色體平衡易位 染色體平衡易位指兩條染色體發(fā)生斷裂后相互交換，僅是位置改變，而無遺傳物質(zhì)的增加或減少。人群中平衡易位的發(fā)生率為0.167%～0.2%[12]，平衡易位攜帶者智力、發(fā)育通常正常。本研究中檢出染色體平衡易位的新生兒5例，表型均正常。染色體平衡易位者在生育年齡形成的配子中，僅有1/18為正常配子，1/18為不平衡配子但表型正常，16/18為不平衡配子，均有重復(fù)和缺失。而不平衡配子與正常配子結(jié)合后，?？蓪?dǎo)致不良妊娠結(jié)局，如流產(chǎn)、胚胎停育、出生缺陷或染色體異常，且男性的易位染色體可干擾正常染色體在減數(shù)分裂中的配對或分離，產(chǎn)生雜合體，臨床表現(xiàn)為嚴(yán)重的生精阻滯即無精癥[13]，往往需要行胚胎植入前遺傳學(xué)診斷助孕。

綜上所述，妊娠期未行產(chǎn)前診斷的高危孕婦的染色體異常檢出率較高，應(yīng)對其娩出的新生兒行臍血染色體核型分析，以及時發(fā)現(xiàn)異常染色體患兒，早期干預(yù)和治療染色體異常引起的疾病，提高人口素質(zhì)。