郭 健
(白城中醫(yī)院,吉林 白城 137000)
巴戟天屬于“四大南藥”之一,耐斯糖屬于寡糖。巴戟天耐斯糖能夠起到抗抑郁的作用,在醫(yī)學上廣為應(yīng)用[1]。本次研究分別采用潤法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對巴戟天進行處理,從而得出不同炮制去心法對巴戟天耐斯糖含量的影響。
1.1 試藥與儀器:為順利完成本次研究,需要在研究之前提前將所需儀器準備好,本次研究需要用到純凈水、巴戟天、1200高效液相色譜儀、耐斯糖對照品、流動相、衛(wèi)星植物粉碎機、電子天平、SEDERESEDEX85 ELSD檢測器[2]。
1.2 方法:將200 g巴戟天清洗干凈,平均分為6份,設(shè)為A組、B組、C組、D組、E組、F組,A組采用清蒸法,將巴戟天放至置蒸器內(nèi)蒸至濕潤狀態(tài)。B組采用潤法,用純凈水慢慢將巴戟天潤透。C組采用泡后蒸法,先將對巴戟天浸泡一段時間,泡至4成透就可取出,再將巴戟天放到置蒸器內(nèi)蒸透。D組采用泡法,用熱水將對巴戟天泡透。E組采用鹽蒸法,用鹽水將處理好的巴戟天攪拌均勻,然后將其密封悶潤,等到鹽水被吸收完后,將巴戟天和食用鹽放至置蒸器內(nèi),巴戟天、水、食用鹽的比例為50∶5∶1。F組采用煮法,將巴戟天內(nèi)加入甘草汁攪拌均勻,然后放入煮制容器內(nèi),加之煎湯,用小火煮至容器內(nèi)的湯被吸收完即可。每100 kg巴戟天需要放入6 kg甘草和50 kg煎湯[3]。
制好巴戟天就需要制備相關(guān)溶液,首先設(shè)定適合的色譜條件,色譜柱為Welch AQ_C18,以甲醇和水為3∶97的比例配置流動相,進樣量為10 μL,色譜柱和漂移管的溫度分為25 ℃和40 ℃。然后需要配置供試品的溶液,稱取0.5 g上述各組的樣品,在稱取時要確保精準,切不可存在偏差。稱取后放入具塞錐形瓶中,加入提前配置好的等量流動相,隔水加熱30 min,放至常溫,稱量每組前后的質(zhì)量變化,記錄下來,用流動相將缺失的質(zhì)量補上,搖晃均勻后靜置,最后用上清液過濾,取續(xù)濾液。在制備供試品時只需要取25 mL耐斯糖對照品于容量瓶中,添加流動相將溶液溶解成0.2148 mg/mL的溶液[4]。制作好需要的溶液后則需要運用方法學考察,按照原先設(shè)定的色譜條件,取10 μL的對照品溶液,進行5次峰面積檢測,得到精密度狀況RSD為1.0%,證明精密度較好。在進行重復性檢測時,選取5份0.5 g的采用潤法進行處理的樣品粉末,測定峰面積,RSD為0.9%,證明重復性較好。在進行穩(wěn)定性檢測時,將選取的潤發(fā)樣品溶液放置在室溫內(nèi),在每隔5 h測峰面積,RSD為1.5%,證明穩(wěn)定性較好。在進行回收率檢測時,選取5份0.1 g的潤法樣品粉末,加入等量的耐斯糖對照品,按照制備供試品溶液的方法進行處理,測定峰面積為0.5%,平均回收率為100.02%。分別取3份0.5 g采用潤法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對巴戟天進行處理的樣品,按照制備樣品溶液的辦法進行處理,并測定其各自的峰面積[5]。
1.3 評價指標:比較經(jīng)過潤法、泡后蒸法、清蒸法、煮法、泡法以及鹽蒸法對處理后的巴戟天含糖量,得出不同炮制去心法對巴戟天耐斯糖含量的影響。
1.4 統(tǒng)計學方法:使用SPSS 21.0軟件對研究得到的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理,得到的統(tǒng)計數(shù)據(jù)用來進行表示,用t來對計量資料檢驗,計數(shù)資料的檢驗則通過χ2,率(%)為計數(shù)資料,得到的差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
鹽蒸法的樣品含量為(4.365±0.056),峰面積RSD為1.2%,清蒸法的樣品含量為(4.286±0.018),峰面積RSD為0.4%,泡法的樣品含量為(3.184±0.017),峰面積RSD為0.5%,泡后蒸餾法的樣品含量為(4.201±0.036),峰面積RSD為0.8%,煮法的樣品含量為(4.784±0.052),峰面積RSD為1.2%,潤法的樣品含量為(5.234±0.052),峰面積RSD為1.1%,經(jīng)過方法學檢測后可以得出精密度、重復性、穩(wěn)定性都較好。差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。
耐斯糖屬于巴戟天寡糖,是易溶于水的白色結(jié)晶體,因此,在進行炮制去心時采用水泡的方法往往使巴戟天的含糖量減少過多,最好采用潤的方式對巴戟天進行處理。泡法和泡后蒸法就是將巴戟天直接泡在水中,在水中浸泡的過程中許多的耐斯糖就會溶解,因此采用這兩種方法處理后的巴戟天含糖量偏小。采用清蒸法和鹽蒸法這種蒸的方法幾乎不會造成耐斯糖的溶解,但耐斯糖會因高溫蒸汽而分解,含糖量也偏小。潤法去心過程中,能夠使細胞結(jié)構(gòu)疏松,且巴戟天會將水分吸收,雖然耐斯糖會溶解,但并不會流失。因此,采用潤法去心進行處理巴戟天耐斯糖含量消耗丟失的最少。
表1 巴戟天耐斯糖的含量