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        雞新城疫抗體檢測技術(shù)在診斷中的實踐分析

        2019-07-25 04:39:53譚逢誼
        農(nóng)家科技下旬刊 2019年6期
        關(guān)鍵詞:實踐

        譚逢誼

        摘 要:我國經(jīng)濟建設(shè)進程不斷加快,使養(yǎng)殖業(yè)有較好的發(fā)展,對我國經(jīng)濟發(fā)展具有較大的促進作用。其中,在對家禽進行養(yǎng)殖的過程中,易引發(fā)不同疾病,尤其在對雞的養(yǎng)殖過程中,易出現(xiàn)雞瘟,對人們健康造成一定的影響。其中新城疫疾病,主要癥狀有神經(jīng)紊亂、呼吸困難以及漿膜出血等,嚴重危害雞的健康生長。新城疫抗體檢測技術(shù)能夠?qū)υ摬〔【M行有效抑制,在診斷的過程中有較好的實踐效果。

        關(guān)鍵詞:雞新城疫;抗體檢測技術(shù);實踐

        我國在對雞飼養(yǎng)的過程中,雞新城疫疾病對雞的健康生長造成較大的威脅,在實踐過程中存在雞非典型新城疫及新城疫強毒株感染與免疫問題,是雞發(fā)病的主要因素。若雞體內(nèi)新城疫抗體無法達到相應(yīng)的標準,便會引發(fā)新城疫疾病,這就需要采用新城疫抗體檢測技術(shù)進行有效的診斷,以此在實踐過程中有較好的應(yīng)用效果,具有較高的診斷價值。

        一、新城疫病毒概述及結(jié)構(gòu)

        1.新城疫病毒概述

        新城疫病毒也作為雞瘟,是新城疫的病原體,該病毒有囊膜的單股負鏈RNA病毒,屬于副粘病毒科,其具有較大的傳染性,能夠引起家禽呼吸道、消化道病變,有較高的出血量,在較大程度上會對家禽類動物有較大的傳染性。

        2.新城疫病毒結(jié)構(gòu)

        新城疫病毒主要呈現(xiàn)出球狀,直徑約為300 nm,其結(jié)構(gòu)模式為,兩個外模蛋白、基質(zhì)蛋白以及核殼體。此外,該病毒RNA基因組長度約為15 kb,編碼有6個蛋白,外模標案蛋白為融合蛋白,可以有效與靶細胞膜進行有效的融合,以此使病毒大量復制。

        二、影響雞新城HI抗體檢測的因素

        1.溫度的影響

        在對新城疫HI抗體進行檢測的過程中,若室溫較高,會在一定使紅細胞解凝時間減少,若室溫較低時紅細胞解凝時間增加。若室溫過高時,應(yīng)將不同試劑放置在4度的環(huán)境中,以便備用。因室溫較高時會加快反應(yīng)速度,因此應(yīng)使判定結(jié)果提前,不能在解凝過程中進行判定,否則會使抗體水平無法相應(yīng)降低。若溫度較低時,需要對HI反應(yīng)時間實施有效的延長。

        2.抗原的影響

        抗原也會對HI 抗體檢測產(chǎn)生一定的影響,若抗原老舊時,在對紅細胞凝聚的過程中,會出現(xiàn)下降的狀態(tài),并且使凝集后解凝時間變短,這對檢測雞新城疫抗體不利,因此需要采用新的抗原對雞新城疫HI抗體實施有效的檢測。

        3.雞紅細胞濃度的影響

        在對雞新城疫抗體進行檢測的過程中,會使用到不同比例的懸浮液,比如采用1%的紅細胞懸浮液、0.5的紅細胞懸浮液,無論何種懸浮液均需要在配制的過程中保證其準確性。一般情況下,紅血球濃度相對較大,其HI值相對較小,反之HI值較大。在此過程中,應(yīng)當對紅細胞離心過程中,離心速度與時間的有效控制,只有這樣才能配制出準確的懸浮液,同時懸浮液在使用的過程中需要混合均勻,以此確保濃度的均勻。

        三、新城疫發(fā)病癥狀

        由于一些因素的影響,我國不同地區(qū)雞的飼養(yǎng)出現(xiàn)了一些問題,發(fā)病率較高,甚至一些地區(qū)發(fā)病率高達90%,死亡率也在逐年上升,對雞的健康養(yǎng)殖造成較大威脅。其主要癥狀有:呼吸困難、體溫高、排不同顏色稀便以及下痢等,甚至還會出現(xiàn)兩腿麻痹、不能站立以及神經(jīng)等癥狀,這在較大程度上威脅雞群的健康生長。

        四、剖檢變化

        氣管出血、喉頭以及小腸一些部位出現(xiàn)點狀、斑塊狀出血,甚至出現(xiàn)潰瘍;腺胃乳頭、腺胃與肌胃交界處出血,盲腸扁桃體出血、潰瘍、腫脹;脾臟腫大有白色壞死點;腎、肺、肝基本正常,無明顯變化。

        五、實驗室診斷

        1.細菌涂片和分離培養(yǎng)

        將病雞脾臟、肝臟以及腦組織取出并作為組織觸片,通過革蘭氏染色與美蘭染色鏡檢,檢測結(jié)果顯示為發(fā)現(xiàn)任何細菌。再將上述病料接種SS瓊脂平板、普通瓊脂平板,在37度環(huán)境中24 h,結(jié)果發(fā)現(xiàn)無細菌。

        2.病毒分離

        取出死亡雞腦、脾臟,研磨后凍融2次,用含有青霉素、鏈霉素的無菌生理鹽水進行稀釋,其稀釋比例為1:5,再將其4000r/min離心15 min,將上清液取出,放置于4度的冰箱中12 h,以作備用。首先進行雞胚接種:將病料進行雙抗處理,并通過尿囊腔接種30枚11日齡的SPF雞胚,一般情況下將每胚量控制在0.2 ml,最用量石蠟將其封孔進行孵化,清除死亡雞胚,4 h照蛋一次,把死亡雞胚放置在4度的冰箱中進行冷藏。其次進行病毒鑒定:(1)病毒血凝試驗:在進行血凝試驗的過程中,首先取出雞胚集中的尿囊液,通過微量法將血凝版進行一定比例的稀釋,同時設(shè)置生理鹽水對照孔,再向每個孔內(nèi)加入1%的紅細胞,需要注意的是需要在雞的體內(nèi)獲取紅細胞,振蕩搖勻,并放置于25度的環(huán)境中,40 min觀察結(jié)果。待生理鹽水對照孔中的紅細胞沉到孔底后對結(jié)果實施判定,如果有一定的凝集性,表明雞在發(fā)病的過程中,病原體有較高的血凝性;(2)在判定結(jié)果中,前4孔依然存在不同程度的凝集,主要是因ND陽性血清降低所致,且病毒濃度相對較高,從第5孔開始病毒對紅細胞的凝集作用被ND陽性血清所抑制,在雞腦脾分離出的病毒具有對膿細胞凝集的特點,同時還被ND陽性血清抑制,表明分離病毒與NDV有一定的相關(guān)性。具體數(shù)據(jù)由表1所示。

        3.抗體檢測

        在病雞廠中按照5%采樣30只,實施有效的ND抗體檢測,檢測結(jié)果顯示,30只病雞有27只出現(xiàn)抗體表現(xiàn)出異常上升,結(jié)合臨床癥狀與剖檢變化,表明雞群感染了ND強度。

        六、發(fā)生非典型ND的緊急措施

        發(fā)生非典型ND方法主要從以下幾個方面入手:1.通過接種疫苗對未被傳染的雞群畸形疫苗的接種,一般情況下采用倍量Clone-30疫苗進行接種,也可以使用倍量IV疫苗滴鼻點眼的方法提升抗體,還能夠通過肌肉注射的方式注射油乳劑滅活苗,此外還能夠通過口服的方式V4弱毒疫苗實施有效預防。在對雞群進行預防的過程中,應(yīng)根據(jù)實際病情針對性選擇預防藥物與接種方法,不宜使用大劑量的I系疫苗,主要是因此種疫苗會使雞群產(chǎn)生一定的應(yīng)急反應(yīng),對雞的下蛋率造成較大的影響,并且會減緩雞群的恢復時間,在此基礎(chǔ)上也增加了死亡率;2.將感染較為嚴重的病雞隔離診治,并對已經(jīng)死亡病雞通過焚燒的方式避免病毒的蔓延,同時還需要對飼養(yǎng)環(huán)境進行有效的消毒,以此確保飼養(yǎng)環(huán)境不被病毒侵害,使雞群有一個良好的生長環(huán)境;3.在進行疫苗的接種時,應(yīng)只對健康雞進行接種,患病雞不能進行接種,能夠使用抗血清以及抗ND卵黃液實施有效的治療,同時還能在飼料與水中添加抗菌類藥物,以此可有效防止繼發(fā)感染細菌病,為雞身體素質(zhì)的提升奠定良好的基礎(chǔ)。

        七、雞新城疫抗體檢測技術(shù)在診斷中的應(yīng)用

        根據(jù)實際情況進行ND抗體檢測為基礎(chǔ)的雞場,以此能夠有效提升免疫接種的密度,對質(zhì)量的提升具有較大的促進作用,以此使雞體內(nèi)的不同抗體具有較高的穩(wěn)定性,比如循環(huán)抗體、高滴度的中和抗體,由此可以選擇一下免疫程序:10日齡雞使用NDII系或者IV系滴鼻點眼首免,25日齡采用II系疫苗進行再次滴鼻點眼,并且在此基礎(chǔ)上進行肌肉注射ND油乳劑滅活苗,一般情況下注射量保持在0.3 ml/只;60日齡雞進行聯(lián)苗注射,還可以進行弱毒注射;120日齡雞聯(lián)苗或者油苗注射,種雞在350日齡實施二次油苗接種。

        1.確定雛雞首免日齡

        鄒雞一般在母源抗體消失或者接近消失時實施首免,以此能夠得到較為理想的免疫效果。一般情況下對鄒雞在1日齡時進行采血,并對HI效價進行檢查。若是大型、高密度的飼養(yǎng)場中,抽樣率應(yīng)大于0.1%,若雞群越小,抽樣率越大,一般抽樣率為2%最為理想。通過一定的計算求出HI抗體效價均值,再通過公式進行有效的推算,以此計算出首免日齡,首免日齡一般為4.5(1日齡HI抗體效價均值-4)+5。比如,某地區(qū)某批雛雞1日齡Hl抗體效價均值為6log2,表明其首免日齡=4.5(6-4)+5=14。

        2.首免后定期抽檢,適時強化免疫

        首免后10 d采取血樣進行抽樣檢查,若IH抗體效價均值降至4log2以下,需要進行二免,或以下時進行二免。二免后15 d在進行血樣的采取,若抗體效價在5log2以下,應(yīng)進行二次疫苗的接種,之后需要將IH效價保持在5log2以上,同日齡的種雞與其他雞相比應(yīng)高一個滴度,若在該標準以下,需要及時采取疫苗的接種,直到IH抗體效價均值保持在2log2以上為止,由此可以斷定免疫發(fā)揮了其應(yīng)有的作用,如若不需要對其進行補免。

        八、結(jié)語

        綜上所述,我國在進行雞的飼養(yǎng)過程中,由于一些外部因素的影響,使雞發(fā)生的疾病越發(fā)增多且復雜,其中雞新城疫疾病是危害雞群健康發(fā)展的疾病之一,所以需要采用雞新城疫抗體檢測技術(shù)對新城疫抗體實施有效的監(jiān)測,能夠保證監(jiān)測的準確性,再采取有效的措施實施針對性診斷治療,以此有效提高雞群的健康生長。

        參考文獻:

        [1]李愛英. 雞新城疫抗體檢測影響因素探討[J]. 獸醫(yī)導刊, 2017(18):176-176.

        [2]佚名. 高職院校雞新城疫抗體水平檢測技能探索與實踐[J]. 職業(yè)技術(shù), 2018(12):92-95.

        [3]蘇琪, 李小麗. 西安市雞新城疫免疫抗體水平調(diào)查與分析[J]. 動物醫(yī)學進展, 2017(6):102-106.

        [4]鄭藝杰. 龍海市雞新城疫免疫抗體水平調(diào)查[J]. 中國畜禽種業(yè), 2017(8):5-6.

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