趙 莉 ，武 娟 ，萬定榮 ，魯 晶 ，蒲 銳 ，梁淑彩*

(1．武漢大學(xué) 藥學(xué)院，湖北 武漢 430072；2. 中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，湖北 武漢 430074)

艾葉在我國被廣泛應(yīng)用于針灸療法中，具有悠久的歷史。艾葉也是直接供內(nèi)服或外用的傳統(tǒng)中藥，具有溫經(jīng)止血、散寒調(diào)經(jīng)、安胎等功效，其有效成分包括揮發(fā)油、黃酮、鞣質(zhì)等。明代以后，產(chǎn)于湖北蘄春縣一帶的蘄艾一直被公認(rèn)為艾葉的道地藥材，但在宋代時(shí)期，產(chǎn)于河南湯陰的艾葉(湯陰北艾)曾被認(rèn)為是道地艾葉。關(guān)于道地艾葉的明確記載首見于宋代蘇頌的《本草圖經(jīng)》[1]：“艾葉，舊不著所出州土，但云生田野，今處處有之，以復(fù)道者為佳。云此種灸百病尤勝?！钡皬?fù)道”所指何地不詳[2]。明代《本草綱目》[3]中提到：“艾葉<本草>不著土產(chǎn)，但云生田野，宋時(shí)以湯陰復(fù)道者為佳，四明者圖形。近代惟湯陰者謂之北艾，四明者謂之海艾。自成化以來，則以蘄州者為勝，用充方物，天下重之，謂之蘄艾?！崩顣r(shí)珍明確指出了宋代以湯陰復(fù)道的北艾為佳，并指明復(fù)道屬湯陰縣管轄?！稖幙h志》[4]中記載：“伏道也為名醫(yī)扁鵲的墓地之一，并有著名的艾園?！爆F(xiàn)代，黃璐琦院士在北艾產(chǎn)地考訂中提出“復(fù)道”即為今河南省湯陰縣的伏道鎮(zhèn)[5]。

目前，河南省湯陰縣非常重視艾產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，形成了較為完善的艾產(chǎn)業(yè)鏈。截止2017年底，全縣艾草種植面積達(dá)到1萬畝[6]。為從現(xiàn)代藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的角度考察湯陰北艾的質(zhì)量，我們對20余份湯陰艾葉樣品中揮發(fā)油、總黃酮及鞣質(zhì)含量進(jìn)行了測定，對其出絨率進(jìn)行了檢測，還將其中9批不同干燥方式的艾葉在實(shí)驗(yàn)室制成艾絨，并進(jìn)行了燃燒熱值測定，初步探討湯陰北艾的品質(zhì)，并為其開發(fā)利用提供相關(guān)參考。

1 儀器、試藥與藥材

1.1 儀器

UV-1800PC型紫外-可見分光光度計(jì)(上海美譜達(dá)儀器有限公司)；98-1-B型電子調(diào)溫電熱套(天津市泰斯特儀器有限公司)；揮發(fā)油提取器(武漢杰恒達(dá)工貿(mào)有限公司)；HKPL-4000B全自動量熱儀(鶴壁市恒科儀器儀表有限公司)；AB256-S型1/10萬電子分析天平(瑞士METTLER TOLEDO)；KQ5200B 型超聲波清洗器(昆山市超聲波儀器有限公司)；DFD-700型水浴鍋(東方電工)；FW100高速萬能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司)。

1.2 試藥與藥材

1.2.1 試藥 全部試劑均為分析純；水為超純水。芹菜素對照品(批號：11901-201102，供含量測定用，純度為99.6%)、沒食子酸對照品(批號：110831-200302，供含量測定用)，均購于中國食品藥品檢定研究院。磷鉬鎢酸試液按照2015版《中國藥典》四部通則8002進(jìn)行配制[7]。

1.2.2 藥材樣品 收集于河南湯陰縣的伏道鎮(zhèn)、扁鵲廟、任固鎮(zhèn)等地，共22份艾葉樣品(見表1)。經(jīng)萬定榮教授鑒定，均為菊科植物艾(ArtemisiaargyiLevl. et Van.)的干燥葉。湯陰艾葉絨的制備方法同以下“2.5”項(xiàng)；用于比較的其他產(chǎn)地的艾絨由廠家提供。

表1 不同采收地點(diǎn)及時(shí)間收集的湯陰艾葉樣品

續(xù)表1 不同采收地點(diǎn)及時(shí)間收集的湯陰艾葉樣品

2 方法與結(jié)果

2.1 揮發(fā)油含量測定

取各樣品剪碎后，按照2015版《中國藥典》四部通則2204 揮發(fā)油測定法進(jìn)行測定。其中，各樣品取樣量為40.0 g，測定時(shí)加水量為600 mL。按干燥品計(jì)算揮發(fā)油百分含量(V/W，%)。具體檢測結(jié)果見表2。

2.2 總黃酮含量測定

取各樣品剪碎，稱取約1 g，精密稱定，參照文獻(xiàn)[8]記載的艾葉總黃酮含量測定法進(jìn)行測定。標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法步驟如下。

2.2.1 對照品溶液制備 取芹菜素對照品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每1 mL含0.05 mg芹菜素的溶液，即得。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密量取芹菜素對照品溶液0.5 mL、1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL，分別置于25 mL棕色容量瓶中，用70%甲醇溶液定容，搖勻。采用紫外-可見分光光度法，以70%甲醇溶液為空白，于338 nm波長處分別測定吸光度。以吸光度A為縱坐標(biāo)(Y)，對照品溶液的濃度(μg /mL)為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算得回歸方程為Y=0.080 8X-0.002 1(r=0.999 9)，表明在0.798 8～15.975 8 g/mL范圍內(nèi)，芹菜素濃度與吸光度呈良好的線性關(guān)系。

2.3 鞣質(zhì)含量測定

取各樣品剪碎后，按照2015版《中國藥典》四部通則2202鞣質(zhì)含量測定法測定，按干燥品計(jì)算樣品中鞣質(zhì)的含量。

2.4 燃燒熱值測定

參照GB/T 14402 “建筑材料及制品的燃燒性能、燃燒熱值的測定”法測定艾絨的燃燒熱值。

2.5 出絨率檢測

2.5.1 取樣法 從艾葉大樣本中隨機(jī)抽取160.0 g，采用四分法取10.0 g作為試驗(yàn)樣品。取兩份試驗(yàn)樣品的平均出絨率作為檢測結(jié)果。

2.5.2 檢測法 將10.0 g試驗(yàn)樣品放入高速粉碎機(jī)(轉(zhuǎn)速24 000 r/min)中粉碎，每30 s暫停至粉碎機(jī)略冷卻后繼續(xù)粉碎，粉碎時(shí)間共120 s。將粉碎后的樣品置于20目分樣篩中，反復(fù)過篩，除盡葉片粉末。取過篩后的艾絨稱重，計(jì)算其所占百分比。

2.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

按照上述方法對22批樣品進(jìn)行含量測定、燃燒熱值測定及出絨率檢測，其具體結(jié)果見表2。

表2 22批湯陰北艾樣品相關(guān)檢測結(jié)果

注：“-”表示該批樣品未檢測燃燒熱值。

2.7 結(jié)果分析

由表2的檢測結(jié)果可知，22份湯陰艾葉樣品中揮發(fā)油、總黃酮、鞣質(zhì)三類有效物質(zhì)的平均含量分別為0.98%、3.36%、1.74%，平均出絨率為15.68%。

上述艾葉樣品中有9份為陰干品，2份為曬干品，3份采用3天陰后再2天曬干的方式干燥。陰干樣品的揮發(fā)油、總黃酮和鞣質(zhì)含量(平均值分別為1.08%、4.01%、1.98%)明顯或顯著高于3天陰攤后再2天曬干的樣品(平均含量分別為1.00%、3.27%、1.49%)和曬干樣品(平均含量分別為0.66%、2.36%、1.39%)。表明艾葉采用陰干的干燥方式更有利于保留有效成分，保證藥材質(zhì)量。

所測定的湯陰北艾絨樣品中，4份陰干樣品(5、8、14和17號)制得的艾絨的平均燃燒熱值(18 952.66 J/g)高于3份陰攤3天再曬干2天的樣品(平均值18 827.50 J/g)，以及2份曬干的樣品(平均值為18 471.00 J/g)。表明灸用艾葉原材料也應(yīng)使用陰干的干燥方法。

3 討論

艾葉在臨床上主要有藥用和灸用兩大用途。對艾葉進(jìn)行質(zhì)量評價(jià)時(shí)，針對不同的用途，其質(zhì)量分析方法、指標(biāo)及側(cè)重點(diǎn)應(yīng)有所不同。艾葉作為口服或外用等直接藥用原料時(shí)，應(yīng)考察其有效物質(zhì)(揮發(fā)油、總黃酮、鞣質(zhì))的含量。作為艾灸療法的原材料時(shí)，則應(yīng)以其作用機(jī)制為基礎(chǔ)進(jìn)行考察[9]，但目前艾灸療法的作用機(jī)制并未完全明確，普遍認(rèn)為是物理效應(yīng)、藥化效應(yīng)與綜合效應(yīng)三者的共同作用[10]。其中，物理效應(yīng)包括溫?zé)嵝?yīng)與輻射作用，筆者認(rèn)為溫?zé)嵝?yīng)是產(chǎn)生艾灸療效的主要原因，因此可推測，在一定范圍內(nèi)，艾絨燃燒時(shí)產(chǎn)生的熱量越高，其質(zhì)量應(yīng)越好。

研究結(jié)果表明，艾葉的干燥方式對其有效物質(zhì)含量及制得艾絨的燃燒熱值影響均較大，為保障藥材質(zhì)量，無論是藥用還是灸用，都建議盡可能采用陰干的方式進(jìn)行干燥。

研究結(jié)果還表明，22份湯陰北艾樣品中揮發(fā)油、總黃酮、鞣質(zhì)的平均含量分別為0.98%、3.36%、1.74%。胡吉清等[11]研究表明，國內(nèi)20個(gè)產(chǎn)地艾葉(產(chǎn)于湖南綏寧、浙江富陽、福建南平、江蘇南京、廣西南寧、湖北襄陽、湖北蘄春、重慶萬州、陜西西安等20個(gè)地區(qū))樣品中三類有效物質(zhì)的平均含量分別為0.98%、3.30%、2.01%。比較可知，湯陰北艾揮發(fā)油和總黃酮平均含量與國內(nèi)多產(chǎn)地艾葉的平均含量相當(dāng)，鞣質(zhì)含量略低于全國平均水平。以三類有效物質(zhì)的含量為評價(jià)指標(biāo)，從藥用角度(直接內(nèi)服和外用)的整體上分析，湯陰北艾的品質(zhì)良好。但對于灸用艾葉的質(zhì)量，我們還檢測了幾份國內(nèi)其他產(chǎn)區(qū)曬干艾葉制備的艾絨(實(shí)驗(yàn)室自制)的燃燒熱值(平均值為18 281.41 J/g)，與兩份曬干的湯陰艾葉樣品所制備的艾絨(實(shí)驗(yàn)室自制)的平均燃燒熱值(18 471.00 J/g)比較，初步表明從灸用角度來看，湯陰北艾的質(zhì)量應(yīng)該是偏優(yōu)的。不過影響灸用艾絨質(zhì)量的因素較多，且本實(shí)驗(yàn)檢測的樣品數(shù)量有限，這一結(jié)論還有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證。