黃唯　來祝檁　韓惠云

[摘要] 血站是采集、儲存血液，并向臨床或血液制品生產(chǎn)單位供血的醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)。隨著醫(yī)療行業(yè)的迅速發(fā)展，臨床獻(xiàn)血與血制品的管理與越來越走向正規(guī)化。血站的質(zhì)檢是血站的管理核心，血制品合格輸入關(guān)系著千千萬萬家庭的生命安全。目前臨床常見血液篩查方式是血清學(xué)檢測和核酸檢測兩類，能夠檢測出獻(xiàn)血者是否感染艾滋病、梅毒、乙肝等病原體，確保血制品安全，本文探討核酸檢測在血站的應(yīng)用。核酸檢測可直接檢測出病原體的基因組，提高血液檢測的工作效率，降低病原體的傳播。開展血站核酸檢測是保障血液安全的管基金措施，在血站核酸檢測中充分做好實(shí)驗室管理，嚴(yán)格各項無菌操作，能夠保障檢測的精密度，不斷提高血液制品的質(zhì)量，確保臨床今后用血安全。

[關(guān)鍵詞] 血站;核酸檢測;關(guān)鍵控制點(diǎn)

[中圖分類號] R440 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）04（b）-0145-02

Analysis of Key Control Points for Nucleic Acid Detection in Blood Stations

HUANG Wei， LAI Zhu-lin， HAN Hui-yun

Jiaozuo Downtown Blood Station， Jiaozuo， Henan Province， 454000 China

[Abstract] Blood station is a medical and health institution that collects and stores blood and supplies blood to clinical or blood product production units. With the rapid development of the medical industry， the management of clinical blood donation and blood products is becoming more and more formalized. The quality check of the blood station is the core of the blood station management， and the qualified input of blood products is related to the life safety of thousands of families. At present， the common clinical blood screening methods are serological detection and nucleic acid detection. It can detect whether blood donors are infected with AIDS， syphilis， hepatitis B and other pathogens to ensure the safety of blood products. This paper discusses the application of nucleic acid detection in blood stations. Nucleic acid detection can directly detect the genome of the pathogen， improve the efficiency of blood testing， and reduce the spread of pathogens. Carrying out blood bank nucleic acid testing is a fund-funding measure to ensure blood safety. In the blood station nucleic acid testing， the laboratory management is fully done， and strict aseptic operations can ensure the precision of testing， continuously improve the quality of blood products， and ensure clinical Use blood safely in the future.

[Key words] Blood station; Nucleic acid detection; Critical control points

隨著無償獻(xiàn)血事業(yè)的迅速發(fā)展，獻(xiàn)血人群也越來越多，輸血是搶救和治療危重患者的重要手段之一，臨床獻(xiàn)血人群也在逐年增加，為確保血液質(zhì)量的完好性，血液檢測十分重要[1]。血站依據(jù)相關(guān)規(guī)范將采血過程及管理分為很多細(xì)節(jié)內(nèi)容，要求每一個環(huán)節(jié)都應(yīng)嚴(yán)格管理，確保血制品質(zhì)量。該站從2014年5月至今已完成30萬份核酸樣本檢測，現(xiàn)結(jié)合實(shí)際工作，淺談血站核酸檢測實(shí)驗室需要注意的關(guān)鍵控制點(diǎn)。

1? 核酸實(shí)驗室各區(qū)域劃分

保證核酸檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠，其重要一點(diǎn)就是防污染，因此要嚴(yán)格按照核酸實(shí)驗室規(guī)范要求合理劃分實(shí)驗室區(qū)域。目前該站已建成兩個核酸檢測實(shí)驗室，按要求和工作需要均分成三個區(qū)域：試劑儲存區(qū)（一區(qū)）、樣本處理區(qū)（二區(qū)）、擴(kuò)增區(qū)（三區(qū)）。各區(qū)域完全獨(dú)立，不能相通;各區(qū)域具有獨(dú)立的通風(fēng)系統(tǒng)：一區(qū)到三區(qū)壓力依次遞減，一區(qū)、二區(qū)保持正壓或常壓狀態(tài)，三區(qū)保持負(fù)壓狀態(tài)。兩個核酸實(shí)驗室分別配備了浩源和華益美兩個廠家的核酸檢測系統(tǒng)，可以互為備份，以應(yīng)對緊急情況的發(fā)生。

工作人員在實(shí)驗前應(yīng)檢查各區(qū)壓力，保持一區(qū)>二區(qū)>三區(qū)，一區(qū)、二區(qū)保持正壓或常壓狀態(tài)，三區(qū)處于負(fù)壓狀態(tài)。檢驗人員和物品按照從一區(qū)到二區(qū)到三區(qū)單向流動，不可逆向而行。各區(qū)都設(shè)有緩沖間，放置工作服和工作鞋，并專區(qū)專用，不可將工作服和工作鞋穿到所屬區(qū)域以外的地方。實(shí)驗室內(nèi)所有物品專用，并貼上各區(qū)標(biāo)簽，防止混用。

2? 核酸實(shí)驗室操作人員的管理

核酸檢測是新興的分子生物學(xué)技術(shù)，對檢驗人員有著嚴(yán)格的要求。核酸室預(yù)備檢驗人員應(yīng)進(jìn)行崗前培訓(xùn)，在獲得科室負(fù)責(zé)人同意后進(jìn)入實(shí)驗室學(xué)習(xí)，接受廠家的試劑及設(shè)備使用操作培訓(xùn)，可獨(dú)立操作并經(jīng)考核合格后方可進(jìn)入實(shí)驗室工作。并定期組織實(shí)驗室功能人員進(jìn)行業(yè)務(wù)學(xué)?；蜻M(jìn)修，定期要求每位工作人員進(jìn)行PPT講課，講課內(nèi)容為實(shí)驗室工作內(nèi)容，共同探討平時工作中遇到的具體問題，大家共同解決，共同提高工作質(zhì)量。

3? 核酸檢測實(shí)驗室質(zhì)量管理體系

為保證受血者的用血安全以及檢驗人員的安全，建立了核酸室質(zhì)量管理體系，它包括管理制度，崗位職責(zé)，標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程等。

①管理制度包括核酸實(shí)驗室防污染及生物安全制度、準(zhǔn)入制度和核酸實(shí)驗室管理制度;每班工作人員記錄本班工作任務(wù)，做到有據(jù)可依、有證可查。

②崗位職責(zé)包括標(biāo)本的接收、保存和處理、標(biāo)本的核酸檢測工作、檢驗報告的發(fā)布、室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評以及檢測結(jié)果陽性者的告知。

③標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程包括試劑配制操作規(guī)程、清潔消毒以及核酸提取和擴(kuò)增等儀器操作規(guī)程。每班人員記錄溫濕度計的度數(shù)，記錄冰箱的溫度計度數(shù)，登記當(dāng)班標(biāo)本，取出當(dāng)天實(shí)驗須配置和需要使用到的試劑，其余試劑收回冰箱放好。再準(zhǔn)備完畢后打開紫外燈消毒，記錄消毒燈管使用情況。

④定期消毒處置，每隔段時間使用相關(guān)儀器檢測標(biāo)本室及實(shí)驗室空氣指標(biāo)狀況，并根據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)消毒處置。并定期隨機(jī)抽查實(shí)驗室工作人員手部衛(wèi)生狀況，對于手部衛(wèi)生消毒不合格者，實(shí)施懲罰制度，提高實(shí)驗室工作人員無菌原則。

4? 核酸檢測操作過程

核酸檢測標(biāo)本的質(zhì)量直接影響檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此應(yīng)采用內(nèi)含枸櫞酸鹽或是EDTA抗凝劑的無菌、無DNA酶、無RNA酶、帶分離膠的真空采血管。標(biāo)本留樣為5 mL，采集完畢后，應(yīng)立即慢且輕地顛倒混勻5～8次，4 h之內(nèi)在低溫離心機(jī)中進(jìn)行離心，后保存在2～8℃的冰箱。接收標(biāo)本的人員如發(fā)現(xiàn)標(biāo)本有嚴(yán)重溶血、脂血、量少以及標(biāo)本信息不對照的情況，應(yīng)拒絕接收。標(biāo)本應(yīng)在72 h內(nèi)進(jìn)行檢測，如若不能完成，應(yīng)將標(biāo)本置于-20℃以下凍存，再次拿出檢驗前，標(biāo)本應(yīng)提前于2～8℃冰箱或室溫條件下復(fù)融[2]。

實(shí)驗過程中，檢驗人員需注意觀察加樣吸頭是否有堵塞或吸入的標(biāo)本量不夠，有無錯加或漏加，并及時處理[3]。拆分試劑包裝時注意檢查試劑包裝是否完好，有無異物，量是否足。切記整個實(shí)驗過程中，避免手從已開蓋的血樣標(biāo)本及試劑上方經(jīng)過，污染血樣和試劑[4]。操作動作輕緩，以免碰倒已開蓋的血樣標(biāo)本，造成實(shí)驗室的污染。處理標(biāo)本、陰陽性對照、質(zhì)控品以及試劑耗材時不能使用同一雙手套，需及時更換，做到手套專用，不可混用以保證實(shí)驗質(zhì)量[5]。嚴(yán)格按照說明書規(guī)定進(jìn)行檢測，對可以部分進(jìn)行復(fù)查，對于冰柜取出物品進(jìn)行檢查核對，檢查物品的質(zhì)量，核對物品的名稱及有效期。在每個關(guān)鍵位置貼上溫馨提示，減少差錯發(fā)生率。對實(shí)驗室物品進(jìn)行統(tǒng)一管理處置。

實(shí)驗結(jié)束后，用75%酒精對實(shí)驗室進(jìn)行密集噴灑可有效沉降氣溶膠，按比例配制好84消毒液擦拭桌面和地面，10 min后再用清水擦拭桌面清除殘留84消毒液。核酸檢測設(shè)備操作平臺用75%酒精噴濕的紗布擦拭完畢后用內(nèi)置紫外燈照射60 min。當(dāng)天實(shí)驗室產(chǎn)生的醫(yī)療廢物垃圾應(yīng)及時處理，避免氣溶膠對實(shí)驗室的污染。在實(shí)驗過程中使用一次性鞋套手套，將接受到的反應(yīng)管進(jìn)行擴(kuò)增分析，在分析完畢后，記錄具體結(jié)果，并及時發(fā)送報告，檢查報告無問題時，及時簽字，對于檢驗報告不完整時，及時收回給予糾正后及時發(fā)送，并檢查報告不全原因，給予針對性處置。實(shí)驗結(jié)束后記錄儀器工作時間及完好狀況。檢驗人員離開實(shí)驗室并開啟紫外燈對實(shí)驗室桌面和空氣照射60 min[6]。

血站核酸實(shí)驗室檢測工作的安全有效是血液質(zhì)量的重要保證。與臨床實(shí)驗室不同，血站實(shí)驗室出具的接測報告直接關(guān)系到血液是否可用于臨床，其結(jié)果具有非常重要的決策意義。因此應(yīng)得到檢驗人員的高度重視，以確保核酸實(shí)驗的檢測質(zhì)量，保障臨床用血安全。在完善各項步驟與物品的管理后，能夠有效確保血液制品的安全性，降低不良醫(yī)療事故的發(fā)生，確保臨床患者安全進(jìn)行輸血治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 中華人民共和國國家衛(wèi)生與計劃生育委員會.衛(wèi)計生發(fā)[2013]22號，全面推進(jìn)血站核酸檢測工作實(shí)施方案.

[2]? 國家衛(wèi)生計生委.血站技術(shù)操作規(guī)程（2015版）（Z）.2015-12-17.

[3]? 王瑞，吳碩，高峰，等.血站實(shí)驗室質(zhì)量監(jiān)控指標(biāo)體系的建立及其應(yīng)用[J].中國輸血雜志，2011，24（8）：713-715.

[5]? 門守山，呂連智，陳元鋒，等.血站核酸檢測實(shí)施后獻(xiàn)血者血液檢測模式的研究[J].中國實(shí)驗血液學(xué)雜志，2017，25（6）：1815-1819.

[6]? 李天官.核酸檢測技術(shù)在基層血站血液篩查中的應(yīng)用效果[J].臨床合理用藥雜志，2017，10（24）：107-109.