肖超

（云南龍海天然植物藥業(yè)有限公司<技術(shù)質(zhì)量部> 云南 昆明 650501）

生物堿存在于自然界（主要為植物，但有的也存在于動物）中的一類含氮的堿性有機化合物，有似堿的性質(zhì)，所以過去又稱為贗堿。大多數(shù)有復(fù)雜的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，氮素多包含在環(huán)內(nèi)，有顯著的生物活性，是中草藥中重要的有效成分之一。具有光學活性。有些不含堿性而來源于植物的含氮有機化合物，有明顯的生物活性，故仍包括在生物堿的范圍內(nèi)。而有些來源于天然的含氮有機化合物，如某些維生素、氨基酸、肽類，習慣上又不屬于“生物堿"。

生物堿具環(huán)狀結(jié)構(gòu)，難溶于水，與酸可以形成鹽，有一定的旋光性和吸收光譜，大多有苦味。呈無色結(jié)晶狀，少數(shù)為液體。生物堿有幾千種，由不同的氨基酸或其直接衍生物合成而來，是次級代謝物之一，對生物機體有毒性或強烈的生理作用。在對生物堿類藥物進行鑒別和雜質(zhì)分析過程中，主要利用生物堿類藥物的特殊反應(yīng)，如顯色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等，本文主要分為鑒別實驗和特殊雜質(zhì)檢查兩部分。

1.鑒別實驗

1.1 一般鑒別反應(yīng)

（1）熔點測定 生物堿類藥物中，鹽酸罌粟堿和磷酸可待因的水溶液加堿后，可析出游離生物堿、罌粟堿、可待因和茶堿的沉淀，通過測定熔點加以鑒別。

（2）顯色反應(yīng) 生物堿可與生物堿顯色試劑作用，呈現(xiàn)不同的顏色。常用的生物堿顯色試劑對二甲氨基苯甲醛、香草醛、甲醛一硫酸試劑、硫酸鈰、硝酸、溴試液、鉬硫酸試劑、氯酸鉀、鐵氰化鉀和二氯化鐵等，其中三氯化鐵試劑可與含酚羥基的生物作用而顯色。

（3）沉淀反應(yīng) 生物堿在酸性溶液中可與生物堿沉淀試劑作用生產(chǎn)難溶于水的沉淀、絡(luò)合物、加成物等。常用的生物堿沉淀試劑有碘化汞鉀、碘化鉍鉀、碘～碘化鉀、氯化汞、鐵氯化鉀等。

（4）紫外吸收特征鑒別法 本類藥物的分子結(jié)構(gòu)中，凡是有雙鍵或共軛體系，在紫外區(qū)均有特征吸收，可以有效鑒別。

（5）紫外～可見分光光度法 大多數(shù)生物堿及有關(guān)合成物，在分子結(jié)構(gòu)中都含有不同數(shù)量的不飽和雙鍵或芳香環(huán)，因此可在紫外光區(qū)產(chǎn)生吸收。采用對照品比較法或吸收系數(shù)法可以對生物堿的制劑進行含量測定。

1.2 特殊鑒別反應(yīng)

（1）雙縮脲反應(yīng) 雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)所特有的，而為氨基酸所沒有的一種顏色反應(yīng)。一般分子中含有兩個氨基甲酪基（即肽鍵：～CO～NH～）的化合物與堿性溶液作用，生成紫色或者藍紫色的絡(luò)合物。

（2） Vitaili反應(yīng) 莨菪酸用發(fā)煙硝酸加熱處理，發(fā)生硝基化反應(yīng)，生成三硝基衍生物；再加氫氧化鉀醇液和一小粒固體氫氧化鉀，初顯深紫色，后轉(zhuǎn)暗紅色，最后顏色消失（產(chǎn)物為有色醌型物）。

（3）綠奎寧反應(yīng) 綠奎寧反應(yīng)系含氧喹啉（喹啉環(huán)上含氧）衍生物的特征反應(yīng)硫酸奎寧和硫酸奎尼丁都顯綠奎寧反應(yīng)，在藥物微酸性水溶液中，滴加微過量的溴水或氯水，再加入過量的氨水溶液，即顯翠綠色。

2.特殊雜質(zhì)檢查

除檢查一般雜質(zhì)和制劑通則規(guī)定的項目外，還要進行下列項目的檢查。

2.1 其它生物堿類或有關(guān)物質(zhì)的檢查

本類藥物在從植物體中提取、半合成或合成過程中會引入特殊雜質(zhì)——其它生物堿或有關(guān)物質(zhì)。例如，咖啡因中可能含有茶堿和柯柯豆堿；氫溴酸山莨菪堿中可能含有東莨菪堿。

（1）如用薄層色譜法檢查其它生物堿，規(guī)定用此法檢查的藥品有羅通定、氫溴酸山莨菪堿、氫溴酸加蘭他敏等；

（2）用化學方法檢查其它生物堿，用此法檢查藥品有鹽酸嗎啡、硫酸阿托品、硫酸奎尼丁和硝酸毛果云香堿和罌粟堿；

（3）用高效液相色譜法檢查，硫酸長春新堿中的其它生物堿。

（4）利用硫酸奎寧中“氯仿～乙醇中不溶物”的檢查鹽酸嗎啡中“其它生物堿”的檢查旋光性的差異：用于硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查對光選擇性吸收的差異：利血平生產(chǎn)或儲存過程中，光照和有氧存在下均易氧化變質(zhì)，氧化產(chǎn)物發(fā)出熒光。因此規(guī)定：供試品置紫外光燈（365nm）下檢視，不得顯明顯熒光。

2.2 制劑含量均勻度和溶出度的檢查

規(guī)定檢查利血平片、注射用硫酸長春新堿、注射用硫酸長春堿、氫溴酸東莨菪堿片、硫酸阿托品和磷酸可待因片的含量均勻度。檢查利血平片、茶堿緩釋片、氨茶堿片和磷酸可待因片的溶出度。

生物堿藥物中溶劑殘留量與含醇量的檢查，其中主要規(guī)定用氣相色譜法檢查秋水仙堿中的氯仿和醋酸乙酯，檢查阿片酊中的乙醇量。

3.結(jié)論

生物堿類藥物是日常生物中經(jīng)常遇到的藥物，其生產(chǎn)過程中同樣會遇到各種各樣的問題，如何準確的分辨各類生物堿、有效的祛除藥品中的特殊雜質(zhì)，對藥物的質(zhì)量有著至關(guān)重要的作用，本文通過總結(jié)生物堿藥物品質(zhì)檢測過程中所用的到的技術(shù)，可以有效的提高生物堿的鑒別效率。