陳雪蓮 歐明才（通訊作者） 張鈺 胡琦 周婧瑤 楊麗涓 蘇星月

（四川省婦幼保健院 四川 成都 610045）

新生兒疾病篩查是一項(xiàng)提高人口健康素質(zhì)的重要措施，同時(shí)新生兒疾病篩查的實(shí)驗(yàn)室工作對國內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)界來說也是一個(gè)全新的領(lǐng)域[1]。為保證新生兒篩查結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，需要制定相關(guān)的技術(shù)規(guī)范和評價(jià)措施來對篩查的全過程進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制[2]?，F(xiàn)將我室2014年-2018年G6PD和17-OHP項(xiàng)目的質(zhì)評檢測結(jié)果總結(jié)如下。

1.資料與方法

1.1 樣本來源

所有質(zhì)評樣本均由衛(wèi)生部臨檢中心統(tǒng)一發(fā)放，2014年只發(fā)放2批次，后面每年都是發(fā)放3批次，每批樣本有5份未知濃度的濾紙干血斑，樣本全部密封裝于干燥塑料袋內(nèi)于2℃～8℃冰箱保存[3-4]。

1.2 儀器和試劑

熒光分析儀（FLX-800型，美國Biotek公司）、微量振蕩器（FWZ-I型，廣州豐華公司）、全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)（PW-960型，廣州匯松公司）、單孔手握式打孔機(jī)（No.97C3，上海瑞天文教用品有限公司）、12道可調(diào)移液器（百得30～300ml，北京sartoriust公司）、實(shí)驗(yàn)檢測試劑（G6PD和17-OHP測定試劑盒，芬蘭Labsystems公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

按照衛(wèi)生部臨檢中心的實(shí)驗(yàn)要求，每年對收到的干血斑樣本進(jìn)行G6PD和17-OHP濃度檢測，所有質(zhì)評樣本和常規(guī)樣本同等對待并在同一批次檢測[5]。我室G6PD和17-OHP濃度測定均采用熒光分析法，操作步驟按照各自試劑盒說明書進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)結(jié)果上報(bào)與普通的臨床上報(bào)不同，除了要上報(bào)定量檢測結(jié)果，還需根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的定性判斷標(biāo)準(zhǔn)，上報(bào)每份樣本的陰陽性結(jié)果。上報(bào)時(shí)間必須在規(guī)定的限期內(nèi)，超出限期上報(bào)結(jié)果無效，衛(wèi)生部臨檢中心將在1個(gè)月后反饋結(jié)果，并給予成績評分[5]。

1.4 室間質(zhì)評判斷標(biāo)準(zhǔn)

①定量判斷：將質(zhì)評樣本與常規(guī)樣本一起按常規(guī)操作測定，如當(dāng)次標(biāo)準(zhǔn)曲線良好且室內(nèi)質(zhì)控合格，則認(rèn)為定量結(jié)果可信。衛(wèi)生部臨檢中心的定量結(jié)果允許范圍為靶值±30%，超出此范圍者判為未通過(失控)[6]。②定性判斷：根據(jù)實(shí)驗(yàn)定量結(jié)果，參照自己實(shí)驗(yàn)室G6PD和17-OHP濃度的判斷標(biāo)準(zhǔn)對每份質(zhì)評樣本進(jìn)行臨床評估。本實(shí)驗(yàn)室G6PD濃度判定標(biāo)準(zhǔn)為≤2.8IU/gHb為陽性，＞2.8IU/gHb則為陰性；17-OHP濃度判定標(biāo)準(zhǔn)為≥30nmol/L為陽性，＜30nmol/L則為陰性；所有定性判斷結(jié)果與衛(wèi)生部臨檢中心反饋結(jié)果進(jìn)行比對，不符合者判斷為未通過(失控)[6]。

1.5 質(zhì)評結(jié)果評分標(biāo)準(zhǔn)

某個(gè)項(xiàng)目的得分=該項(xiàng)目的可接受結(jié)果數(shù)/該項(xiàng)目總的測定樣本數(shù)*100%；某個(gè)項(xiàng)目的評分結(jié)果≥80%，則判定該項(xiàng)目室間質(zhì)評合格；全部項(xiàng)目的得分=全部項(xiàng)目的可接受結(jié)果數(shù)/全部項(xiàng)目總的測定樣本數(shù)*100%；全部項(xiàng)目的評分結(jié)果≥80%，則該實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)評合格[3,7]。

2.結(jié)果

2.1 質(zhì)評樣本偏倚分布

四川省新篩查實(shí)驗(yàn)室近5年共接受衛(wèi)生部臨檢中心分發(fā)的14個(gè)批次，共計(jì)70份質(zhì)評樣本，G6PD和17-OHP濃度測定結(jié)果偏倚分布見圖1和圖2。G6PD測定結(jié)果偏倚分布范圍是-13.29%～66.67%，相對偏倚平均值為4.13%；17-OHP測定結(jié)果偏倚分布范圍是-10.18%～16.89%，相對偏倚平均值為1.14%。每年度的相對偏倚平均值見表1。

表1 2014-2018年度G6PD和17-OHP相對偏倚平均值

2.2 定量結(jié)果評分

70份G6PD質(zhì)評樣本測定結(jié)果中68份通過，定量判斷符合率為97.14%(68/70)；70份17-OHP質(zhì)評樣本測定結(jié)果中70份通過，定量判斷符合率為100%(70/70)，失控見表2。

表2 2份定量失控質(zhì)評樣本結(jié)果

2.3 定性結(jié)果評分

70份G6PD質(zhì)評樣本反饋結(jié)果中，陰性32份，陽性38份，定性判斷符合率為100%(70/70)；70份17-OHP質(zhì)評樣本反饋結(jié)果中，陰性25份，陽性45份，定性判斷符合率為100%(70/70)。

2.4 總質(zhì)評結(jié)果評分

70份質(zhì)評樣本定量和定性判斷總評分見表3，所有項(xiàng)目每批及年度總評分結(jié)果均≥80%，獲得室間質(zhì)評成績合格證書。

表3 質(zhì)評樣本定量和定性結(jié)果評分

3.討論

3.1 室間質(zhì)評結(jié)果分析

四川省新篩實(shí)驗(yàn)室從2014年開始進(jìn)行G6PD和17-OHP項(xiàng)目的檢測并參加全國室間質(zhì)量評價(jià)。2014年-2018年，共接受衛(wèi)生部臨檢中心分發(fā)的14批次共計(jì)70份質(zhì)評樣本，G6PD相對偏倚平均值為4.13%，17-OHP相對偏倚平均值為1.14%?；谕瑯拥臏y定方法，我室G6PD和17-OHP的相對偏移平均值比其他實(shí)驗(yàn)室小，說明實(shí)驗(yàn)室的操作相對穩(wěn)定，結(jié)果均一性較好[3,6]。70份質(zhì)評樣本，所有項(xiàng)目每批及年度總評分結(jié)果均≥80%，表明我室的檢測能力合格，檢測結(jié)果是可信的。

3.2 質(zhì)評樣本失控原因和在控經(jīng)驗(yàn)

2份G6PD測定結(jié)果定量判斷未通過，且結(jié)果都高于靶值的允許范圍，筆者分析造成失控的原因：①實(shí)驗(yàn)采用的3mm的手握式打孔機(jī)，由于人為用力不均，且打孔片不夠鋒利，導(dǎo)致樣本周圍會(huì)有一些小碎屑的產(chǎn)生，這些小碎屑通過底物的洗脫和反應(yīng)，導(dǎo)致濃度測定值升高，建議更換自動(dòng)打孔器或者采用支架法。②微量移液器的使用不當(dāng)，實(shí)驗(yàn)中推進(jìn)移液器按鈕過快，產(chǎn)生反沖和氣泡，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性[8]。③2016年第一次質(zhì)控時(shí)間剛好處于實(shí)驗(yàn)員輪崗更換階段，新的實(shí)驗(yàn)員輪崗到此項(xiàng)目，有操作的不熟悉，導(dǎo)致凍干底物和稀釋液的配制，混勻不均，質(zhì)控樣本結(jié)果偏高。對于G6PD項(xiàng)目，結(jié)果偏高，就意味著實(shí)驗(yàn)中假陰性率的升高，漏診率的升高。目前我國新生兒篩查已經(jīng)立法，由于工作的疏忽，特別是漏診將導(dǎo)致承擔(dān)法律責(zé)任，因此，新生兒篩查的實(shí)驗(yàn)室工作來不得任何疏忽，要引起實(shí)驗(yàn)室的密切注意[9]。17-OHP的定量和定性結(jié)果都通過，除了該項(xiàng)目負(fù)責(zé)人嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和精益求精的職業(yè)操守，還與實(shí)驗(yàn)室配置的儀器密切相關(guān)，17-OHP項(xiàng)目洗板機(jī)、振蕩器、移液槍、加樣槽等，都采用專項(xiàng)專用，不與其他項(xiàng)目混用。

3.3 展望

新生兒疾病篩查質(zhì)量是一個(gè)全球性的問題，據(jù)相關(guān)資料顯示，目前尚沒有一個(gè)篩查方法能夠確保漏診率為零[10]。為了保證實(shí)驗(yàn)室的篩查質(zhì)量，必須做好室內(nèi)和室間質(zhì)控，把漏診率降到最低，確保實(shí)驗(yàn)室的篩查質(zhì)量，使所有新生兒能夠得到及時(shí)準(zhǔn)確的篩查，為提高人口健康素質(zhì)的基本國策添磚加瓦[11]。