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        某地區(qū)GH高危人群HSV-2基因檢測(cè)結(jié)果分析

        2019-07-09 11:34:00楊戈通訊作者陳明清崔凡雍剛謝震沈柱林昭春
        醫(yī)藥前沿 2019年14期
        關(guān)鍵詞:差異檢測(cè)

        楊戈(通訊作者) 陳明清 崔凡 雍剛 謝震 沈柱 林昭春

        (1 四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所 四川 成都 610072)

        (2 四川省醫(yī)療衛(wèi)生服務(wù)指導(dǎo)中心 四川 成都 610041)

        生殖器皰疹(Genital herPes,GH)是由單純皰疹病毒(HerPes simPlex virus,HSV)感染所致的常見(jiàn)病毒性性傳播疾病,皮損易復(fù)發(fā)性及HSV致癌性是臨床關(guān)注熱點(diǎn)。既往認(rèn)為GH多由單純皰疹病毒Ⅱ型(HerPes simPlex virus-tyPe2,HSV-2)感染引起[1],但隨著近年來(lái)生態(tài)環(huán)境以及性接觸方式的改變,由單純皰疹病毒Ⅰ型(HerPes simPlex virus-tyPe 1,HSV-1)感染所致的GH比例有所增加[2]。為了解本地區(qū)HSV-2感染情況,本研究回顧性分析本地區(qū)361例疑似GH患者HSV-2脫氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)篩查情況,并比較不同性別、年齡和季節(jié)陽(yáng)性檢出率的差異,現(xiàn)報(bào)道如下。

        1.資料與方法

        1.1 一般資料

        2017年8 月~2018年1月在四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所門診就診的疑似GH患者。排除標(biāo)準(zhǔn):近3月內(nèi)接受系統(tǒng)或局部免疫/抗病毒治療,合并自身免疫性疾病、感染性疾病(包括其他性傳播疾病及HIV感染)、嚴(yán)重系統(tǒng)性疾病、糖尿病、妊娠等以及有再次感染風(fēng)險(xiǎn)者。所有患者均自愿進(jìn)行HSV-2核酸檢測(cè),并簽署知情同意書(shū)。根據(jù)不同年齡分為≤20歲組、21~30歲組、31~40歲組、41~50歲組、51~60歲組及≥61歲組,按性別分為男性組和女性組,根據(jù)檢測(cè)時(shí)間不同,分為秋季組(8~10月)和冬季組(11月-次年1月)。

        1.2 方法

        所有患者均采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(realtime fluorescence quantitative Polymerase chain reaction,F(xiàn)Q-PCR)檢測(cè)HSV-2DNA。步驟如下:(1)采集標(biāo)本:先用消毒棉簽拭去皮損表面分泌物,以無(wú)菌手術(shù)刀片采取皮損組織液及脫落細(xì)胞,將其放入裝有滅菌生理鹽水的樣本管中,旋緊管蓋,做好標(biāo)本標(biāo)注和日期,于-20℃保存,并在1周內(nèi)檢測(cè)。(2)采用FQ-PCR技術(shù)對(duì)樣本中HSV-2DNA進(jìn)行檢測(cè)。AFD9600型實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀由杭州安杰思醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn),單純皰疹病毒Ⅱ型核酸測(cè)定試劑盒由中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司生產(chǎn)。主要步驟包括DNA提取、PCR擴(kuò)增、結(jié)果分析及質(zhì)量控制等,操作嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行并在超凈工作臺(tái)中完成。所有儀器設(shè)備均運(yùn)轉(zhuǎn)正常,所有檢測(cè)試劑均在有效期內(nèi)。標(biāo)本收集和實(shí)驗(yàn)方法均通過(guò)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。計(jì)算各組陽(yáng)性檢出率(Positive detection rate,PDR)。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

        數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料采用率(%)表示,進(jìn)行χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料采用(±s)表示,進(jìn)行t檢驗(yàn),P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2.結(jié)果

        2.1 入選對(duì)象基本情況

        361 例入選患者男性72.30%(261例),女性27.70%(100例),平均(39.38±13.38)歲,總體PDR 36.29%(131/361)。各組性別、季節(jié)和年齡上具有可比性(t=0.682、0.753,P=0.496、0.452均>0.05)。秋季組男女比例145:57,冬季組116:43,經(jīng)χ2檢驗(yàn)兩組性別比例差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.061,P=0.805>0.05)。

        2.2 不同性別和年齡陽(yáng)性檢出率的差異比較

        各性別組陽(yáng)性檢出率,經(jīng)χ2檢驗(yàn),兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.824,P=0.364>0.05);不同年齡段陽(yáng)性檢出率不同,經(jīng)χ2檢驗(yàn),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=1.646,P=0.342>0.05),見(jiàn)表1。不同年齡段HSV-2DNA陽(yáng)性男女患者分布趨勢(shì)見(jiàn)表2,經(jīng)Fisher's精確概率法檢驗(yàn),組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.625>0.05)。尚發(fā)現(xiàn)2例年齡>80歲檢測(cè)陽(yáng)性的男性患者。

        表1 不同性別、年齡和季節(jié)HSV-2檢出情況比較

        表2 不同年齡段HSV-2DNA檢測(cè)陽(yáng)性性別分布

        2.3 不同季節(jié)陽(yáng)性檢出率的差異比較

        秋季組為34.16%,冬季組為38.99%,經(jīng)χ2檢驗(yàn),兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=0.900,P=0.343>0.05),見(jiàn)表1。秋季組檢測(cè)陽(yáng)性男女比例52:17,冬季組為39:23,經(jīng)χ2檢驗(yàn),組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=2.390,P=0.122>0.05)。

        3.討論

        HSV感染為人類常見(jiàn)的皰疹病毒感染之一。根據(jù)血清型不同,可分為HSV-1和HSV-2。一般認(rèn)為HSV-1主要是腰以上的感染,HSV-2則是腰以下的感染[3]。HSV除了引起易復(fù)發(fā)的單純皰疹和生殖器皰疹外,尚可引起角膜炎、腦膜炎、腦炎,甚至壞死性肝炎[4]。妊娠期婦女HSV原發(fā)感染還可誘發(fā)流產(chǎn)、死產(chǎn)、胎兒畸形等不良妊娠結(jié)局。故HSV的核酸篩查十分必要,有助于及早發(fā)現(xiàn)和治療HSV感染,減少其在高危人群的傳播,減少不良結(jié)局的發(fā)生。雖然近年來(lái)發(fā)現(xiàn)HSV-1感染引起的生殖器皰疹比例增加[5],但后者仍以HSV-2感染為主[6]。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HSV-2核酸具有穩(wěn)定性、靈敏度、特異性均高的特點(diǎn)[7],本次采用該法檢測(cè)HSV-2核酸,確保檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定、準(zhǔn)確和可靠。

        361 例患者HSV-2DNA陽(yáng)性檢出率36.29%,低于既往報(bào)道的成都地區(qū)單純皰疹病毒Ⅱ型55.65%的陽(yáng)性檢出率[8],可能與入選患者就診季節(jié)生殖器皰疹發(fā)病率相對(duì)較低有關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)不同性別患者的總體陽(yáng)性檢出率以及不同年齡段和季節(jié)的分組陽(yáng)性檢出率均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與國(guó)內(nèi)其他研究結(jié)果類似[9-10],與既往報(bào)道本地區(qū)男性感染率低于女性不同[8],提示本地區(qū)男性HSV-2感染率有上升趨勢(shì),需加強(qiáng)HSV-2感染患者性伴侶同時(shí)篩查和防治。不同年齡段雖然陽(yáng)性檢出率有差異,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,與國(guó)內(nèi)其他報(bào)道一致[8-11]。盡管如此,21~50歲年齡段陽(yáng)性檢出率最高,結(jié)合患者平均年齡,說(shuō)明本地區(qū)HSV-2感染仍集中于性活躍人群。還發(fā)現(xiàn)2例年齡大于80歲HSV-2陽(yáng)性的男性患者,提示應(yīng)加強(qiáng)對(duì)老年高危人群的病毒篩查和防治。入選患者秋冬兩季陽(yáng)性檢出率差異不顯著,有待擴(kuò)大樣本進(jìn)一步研究。

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