郭鴻雁，劉慶峰

1首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院臨檢中心，北京100069

2中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京1000530

原發(fā)性肝癌是臨床中常見的惡性腫瘤，嚴(yán)重威脅患者的生命健康。肝癌的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與環(huán)境、遺傳、病毒感染等多種因素有關(guān)，任何年齡段均可發(fā)生肝癌，若不接受治療，患者的5年生存率小于5%[1]。肝癌患者的早期臨床癥狀并不明顯，大多數(shù)患者在確診時(shí)已處于中晚期，錯(cuò)過了最佳治療時(shí)期，增加了臨床治療難度，且治愈率極低[2-3]。因此，提高肝癌的早期診斷率，并給予患者適當(dāng)?shù)闹委熓茄娱L其生存時(shí)間的有效方法[4]。甲胎蛋白是目前臨床診斷原發(fā)性肝癌最有效的腫瘤標(biāo)志物，也是最普遍的腫瘤標(biāo)志物之一，但其靈敏度和特異度欠佳，導(dǎo)致早期原發(fā)性肝癌的確診率較低，易出現(xiàn)漏診或誤診[5]。隨著醫(yī)療水平的不斷進(jìn)步，蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)不斷提高，新的腫瘤標(biāo)志物也相繼被發(fā)現(xiàn)，高爾基體蛋白73、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶均被認(rèn)為是有價(jià)值的肝癌血清標(biāo)志物，對提高早期原發(fā)性肝癌的診斷率具有積極作用[6]。本研究對早期原發(fā)性肝癌患者、肝硬化患者及健康體檢者的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73及甲胎蛋白水平進(jìn)行檢測，旨在探討上述指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對早期原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年7月至2016年8月于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院接受治療的肝病患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理學(xué)檢查確診為早期原發(fā)性肝癌，或符合2010年版《慢性乙型肝炎防治指南》[7]中肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重心、腎功能障礙；②合并免疫系統(tǒng)功能障礙；③合并凝血功能障礙。根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入94例肝病患者，其中早期原發(fā)性肝癌患者48例（肝癌組），肝硬化患者46例（肝硬化組）。另選擇同期于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院進(jìn)行體檢的45例健康體檢者作為對照組。肝癌組中，男25例，女23例；年齡32～58歲，平均（45.89±4.57）歲。肝硬化組中，男24例，女22例；年齡31～57歲，平均（45.62±4.60）歲；對照組中，男22例，女23例；年齡32～57歲，平均（45.71±4.52）歲。3組研究對象的性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

抽取3組研究對象的清晨空腹外周靜脈血4 ml，離心后分離血清，置于-20℃冰箱中備用。采用電化學(xué)發(fā)光法檢測血清甲胎蛋白水平，采用生化分析儀檢測血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶水平，采用免疫層析法檢測血清高爾基體蛋白73水平。聯(lián)合檢測時(shí)，任意一個(gè)指標(biāo)為陽性即診斷為陽性。血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶的正常值為3～50 U/L，高爾基體蛋白73的正常值為24.9～43.4 ng/ml，甲胎蛋白的正常值為＜25 ng/ml。

1.3 觀察指標(biāo)及評價(jià)方法

比較肝癌組、肝硬化組及對照組的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平。以病理診斷結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”，計(jì)算血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73、甲胎蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢測診斷早期原發(fā)性肝癌的靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度。靈敏度=真陽性例數(shù)/（真陽性+假陰性）例數(shù)×100%，特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性+假陽性）例數(shù)×100%，準(zhǔn)確度=（真陽性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)×100%。其中，肝癌組48例患者均進(jìn)行了病理檢查；肝硬化組患者中，29例患者進(jìn)行了病理檢查；對照組未進(jìn)行病理檢查。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組比較采用方差分析，多組內(nèi)兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平的比較

肝癌組、肝硬化組和對照組的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。肝癌組患者的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平均高于肝硬化組和對照組，肝硬化組患者的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1 3組研究對象血清 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平的比較（±s）

表1 3組研究對象血清 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平的比較（±s）

注：a與對照組比較，P<0.05；b與肝硬化組比較，P<0.05

組別肝癌組（n=48）肝硬化組（n=46）對照組（n=45）F值P值γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（U/L）95.8±5.5a b 65.2±6.2a 17.8±3.3 2675.935 0.000高爾基體蛋白73（ng/ml）256.3±31.3a b 142.1±20.1a 43.5±3.5 1108.368 0.000甲胎蛋白（ng/ml）196.0±24.3a b 125.6±12.1a 6.0±1.8 1681.512 0.000

2.2 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73、甲胎蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢測對早期原發(fā)性肝癌的診斷效能

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白單獨(dú)檢測診斷早期原發(fā)性肝癌的靈敏度分別為56.25%（27/48）、58.33%（28/48）和 54.17%（26/48），均低于3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的87.50%（42/48）。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白單獨(dú)檢測診斷早期原發(fā)性肝癌的準(zhǔn)確度分別為67.53%（52/77）、67.53%（52/77）和63.64%（49/77），均低于3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的80.52%（62/77）。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73、甲胎蛋白單獨(dú)及聯(lián)合檢測診斷早期原發(fā)性肝癌的特異度分別為86.21%（25/29）、82.76%（24/29）、79.31%（23/29）、68.97%（20/29）。（表2）

表2 3種血清腫瘤標(biāo)志物單獨(dú)及聯(lián)合診斷早期原發(fā)性肝癌與病理診斷結(jié)果的對照

3 討論

原發(fā)性肝癌是臨床中最常見的惡性腫瘤之一，由于確診時(shí)間較晚，治療效果差，導(dǎo)致病死率較高。早期診斷對提高原發(fā)性肝癌的治療效果尤為關(guān)鍵。研究表明，肝癌的惡性程度較高，病情進(jìn)展快，預(yù)后差，臨床診斷主要依靠影像學(xué)檢查和腫瘤標(biāo)志物檢測，而影像學(xué)檢查無法確定腫瘤的良惡性[4]。甲胎蛋白是既往臨床診斷原發(fā)性肝癌的最常用的指標(biāo)，但數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表明，大約30%的肝癌患者甲胎蛋白水平正常，其靈敏度較低[8]。另有研究證實(shí)，甲胎蛋白與其他腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可提高早期原發(fā)性肝癌的診斷率[9]。

高爾基體蛋白73屬于高爾基體中的一種跨膜蛋白，在正常機(jī)體組織中，高爾基體蛋白73主要在膽管上皮細(xì)胞中表達(dá)，在肝細(xì)胞中表達(dá)較少甚至不表達(dá)，但在肝細(xì)胞受到病毒感染，或出現(xiàn)肝癌、肝硬化時(shí)，高爾基體蛋白73表達(dá)異常升高，高爾基體蛋白73表達(dá)可能與維持高爾基體結(jié)構(gòu)的完整性有關(guān)，而細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變與腫瘤的發(fā)生具有密切關(guān)系[10-11]。研究表明，肝細(xì)胞中高爾基體蛋白73表達(dá)的增量調(diào)節(jié)是肝癌患者血清高爾基體蛋白73升高的主要原因，表明高爾基體蛋白73可能成為診斷早期原發(fā)性肝癌的血清標(biāo)志物[12]。另有研究指出，原發(fā)性肝癌患者的γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶表達(dá)水平異常升高，其診斷原發(fā)性肝癌的靈敏度和特異度均較高，可作為診斷早期原發(fā)性肝癌的腫瘤標(biāo)志物[13]。本研究結(jié)果表明，肝癌組患者的血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白水平均高于肝硬化組和對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明以上3項(xiàng)指標(biāo)在原發(fā)性肝癌患者血清中的表達(dá)水平較高，可作為臨床輔助診斷早期原發(fā)性肝癌的重要血清標(biāo)志物。

甲胎蛋白對肝癌的早期診斷具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值，高爾基體蛋白73、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶在肝癌的臨床檢測和診斷中也有一定的應(yīng)用，但迄今為止并未發(fā)現(xiàn)一種血清腫瘤標(biāo)志物能夠100%地檢測出早期肝癌。本研究結(jié)果表明，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白聯(lián)合檢測診斷早期原發(fā)性肝癌的靈敏度和準(zhǔn)確度分別為87.50%和80.52%，均高于3項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測的結(jié)果。分析原因可能是多種血清腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可減少單一腫瘤標(biāo)志物檢測導(dǎo)致的誤診、漏診，提高診斷準(zhǔn)確度，彌補(bǔ)單一腫瘤標(biāo)志物檢測的不足[14-15]。研究表明，多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測可提高早期原發(fā)性肝癌的檢出率，對提高患者的生存率具有重要作用[16-17]。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果基本一致，證明了γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白聯(lián)合檢測的有效性，對評估患者病情具有重要作用，是診斷早期原發(fā)性肝癌的有效方法。

綜上所述，γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、高爾基體蛋白73和甲胎蛋白聯(lián)合檢測對早期原發(fā)性肝癌具有較高的診斷價(jià)值，是臨床診斷肝癌的有效方法，對原發(fā)性肝癌高危人群的篩查具有重要意義。