吳 寬, 武占敏, 郝興安, 吳云鋒

(1.楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物工程分院 陜西 楊凌 712100,2.內(nèi)蒙古鄂爾多斯市植保植檢站，內(nèi)蒙古鄂爾多斯 017000 3.西北農(nóng)林科技大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院, 陜西 楊凌 712100)

在國內(nèi)，黃矮病是影響小麥產(chǎn)量和質(zhì)量的一種重要病毒病[1]。小麥黃矮病曾于1960、1964、1966、1970、1973、1978、1980、1988、 1999年在西北干旱地區(qū)多次大面積流行危害, 造成小麥大面積減產(chǎn)。陜西省是小麥黃矮病發(fā)生的重災(zāi)區(qū), 全省各地小麥黃矮病的發(fā)病情況較重, 該地區(qū)流行病原為GAV、GPV和PAV。小麥?zhǔn)芎?，葉片黃化、植株矮縮，穗子變小，產(chǎn)量降低。目前，由于生產(chǎn)上缺乏優(yōu)質(zhì)抗病毒病品種，對(duì)小麥黃矮病的主要防治措施是噴施抗病毒藥物和殺蟲劑[2]。因此，篩選高效、低毒的生物源抗病毒劑尤為重要[3～4]，筆者研究對(duì)實(shí)驗(yàn)室提取制備的甾烯醇原藥進(jìn)行了小麥黃矮病的毒力測(cè)定及田間藥效試驗(yàn)，旨在為生產(chǎn)上提供綠色防控藥劑。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2016-2018年西北農(nóng)林科技大學(xué)植物病毒實(shí)驗(yàn)室溫室進(jìn)行。甾烯醇原藥、大麥黃矮病毒GAV和麥二叉蚜(Schizaphisgramimum)由實(shí)驗(yàn)室提供，毒源小麥和蚜蟲在人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度20℃，光周期為16 h∶8 h(L∶D)。對(duì)照藥劑選用1.5%植病靈水乳劑，由曲阜市爾福農(nóng)藥廠生產(chǎn)，小麥品種選用小偃6號(hào)。

1.2 病毒接種與施藥方法

將小麥種子播種到塑料苗盆中，置于有防蟲網(wǎng)的溫室內(nèi)培養(yǎng)，4片葉期進(jìn)行試驗(yàn)處理。毒力測(cè)定的方法是接種病毒2d后噴施藥物，甾烯醇原藥稀釋為2.5、5、7.5、10、12.5、15 mg·L-15個(gè)濃度梯度，用小型噴霧器噴施葉面，對(duì)照藥劑植病靈按使用說明施藥，用帶GAV的麥二叉蚜傳播接種小麥(每株3～4頭)，預(yù)防試驗(yàn)方法是噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液2 d后接種病毒，治療試驗(yàn)為接種病毒2 d后施藥，發(fā)病對(duì)照為只接種病毒不施藥，每個(gè)處理52～55株，重復(fù)3次。

1.3 病情調(diào)查與藥效、毒力計(jì)算

處理后每15 d調(diào)查1次發(fā)病株數(shù)、發(fā)病嚴(yán)重度，計(jì)算發(fā)病率、防治效果。發(fā)病率(%)=發(fā)病株數(shù)/處理總株數(shù)×100，相對(duì)防效(%)=(對(duì)照發(fā)病率-處理發(fā)病率)/對(duì)照發(fā)病率×100。毒力是指藥劑本身對(duì)病蟲草的抑制或致殘作用和程度。半致死劑量(LD50)即致死中量，一次給藥有半數(shù)(50%)受試動(dòng)物死亡所需的劑量或濃度，單位為 mg·kg-1。參考方法[5～7]計(jì)算毒力回歸線，將藥劑各濃度及其防治效果的原數(shù)據(jù)換算成各濃度對(duì)數(shù)值(x)和防效機(jī)率值(y)，求得各藥劑防效機(jī)率值與濃度對(duì)數(shù)值回歸(y=a+bx)，計(jì)算LC50。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 甾烯醇原藥對(duì)黃矮病的毒力測(cè)定

給小麥接種病毒后噴施不同濃度2.5、5、7.5、10、12.5、15 mg·L-1甾烯醇原藥，調(diào)查發(fā)現(xiàn)對(duì)小麥黃矮病毒病有一定的防治效果，使用濃度為15 mg·L-1，防治效果為77.42%。對(duì)甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病的毒力回歸方程為y=4.4513+1.036x,相關(guān)系數(shù)r=0.9656,有效抑制中濃度LC50=3.38 mg·L-1(表1)，95%置信限在2.3558～4.8633，卡方值(χ2) 為97.48。

2.2 預(yù)防試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液2d后接種病毒，處理區(qū)葉片呈現(xiàn)深綠，植株長勢(shì)旺盛，相對(duì)預(yù)防效為77.62%，未噴藥對(duì)照區(qū)小麥葉片普遍變黃，植株矮化，無效分蘗增多，發(fā)病株率達(dá)到92.31%，甾烯醇原藥防治效果優(yōu)于對(duì)照藥劑處理(表 1)。

表1 甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病的毒力測(cè)定

表2 甾烯醇對(duì)小麥黃矮病的預(yù)防效果

注:數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，差異顯著(P<0.05，TukeyHSD法)。

2.3 治療試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明接種病毒2 d后噴施15 mg·L-1甾烯醇原藥稀釋液，甾烯醇處理區(qū)大多數(shù)植株葉片綠色，個(gè)別植株發(fā)病，治療效果為76.16%，而對(duì)照藥劑的相對(duì)防效為71.59%，未噴藥對(duì)照發(fā)病率達(dá)到94.23%(表3)。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)論

甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病毒病有良好的防治效果，使用濃度為15 mg·L-1，防治效果達(dá)到77.42%。甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病的有效抑制中濃度LC50=3.38 mg·L-1。田間藥效試驗(yàn)表明甾烯醇原藥既可以預(yù)防，也能較好治療小麥黃矮病，是一種新的植物源病毒抑制劑。

表3 甾烯醇對(duì)小麥黃矮病的治療效果

4 討論

據(jù)統(tǒng)計(jì)，2016年我國小麥播種面積24 187 Khm2，小麥種植面積大，黃矮病的防治一直是小麥生產(chǎn)中的技術(shù)難題，該病通過蚜蟲傳播，所以，蚜蟲爆發(fā)遷飛會(huì)引起黃矮病的大流行，威脅糧食安全[8]。為了有效控制該病害，國內(nèi)外開展了大量研究。目前生產(chǎn)防治中主要應(yīng)用的抗病毒制劑有寧南霉素、寡糖鏈蛋白、毒氟磷、植病靈等[9]，被廣泛應(yīng)用于小麥、果樹、蔬菜、花卉、水稻等作物病毒病防治，解淀粉芽胞桿菌用于小麥黃花葉病的生物防治[10]。

筆者研究開展了甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病的毒力測(cè)定和田間防效試驗(yàn)，毒力測(cè)定結(jié)果表明甾烯醇原藥對(duì)小麥黃矮病較好的防治效果，發(fā)病率低于對(duì)照藥物，說明甾烯醇對(duì)小麥黃矮病有良好的防治效果，可以作為小麥黃矮病的綠色防控藥劑[11]。