方玲 卞紅正 趙宏梅

摘? 要：建立了水果、蔬菜中阿維菌素殘留QuEChERS提取凈化方法，采用超高壓液相-串聯(lián)質(zhì)譜儀（UPLC-MS/MS，ESI源）檢測(cè)其殘留濃度。以4種蔬菜、2種水果為例，乙腈提取其中的阿維菌素，經(jīng)優(yōu)化比例后的PSA、GCB和C18的混合物凈化后，氮吹濃縮，甲醇定容后經(jīng)超高壓液相-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定，添加回收率均在70%～100%，RSD在8%以下，符合農(nóng)藥殘留要求。該方法靈敏可靠，具有操作簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：QuEChERS;UPLC-MS/MS;阿維菌素

中圖分類(lèi)號(hào) S481.8? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A? ?文章編號(hào) 1007-7731（2019）09-0106-3

Abstract：In this study，a QuEChERS method for the extraction and purification of abamectin residue in fruits and vegetables was established，and the detection method was determined by UPLC-MS /MS，ESI source.Four kinds of vegetables and two kinds of fruits were extracted with acetonitrile，and the mixture of PSA，GCB and C18 was purified with optimized proportion.After nitrogen blowing，concentration and methanol volume were determined by ultrahigh pressure liquid-tandem mass spectrometer. The addition recovery was 70%，100%，and the RSD was below 8%，meeting the requirements of pesticide residue.The method is sensitive and reliable，simple and reproducible.

Key words：QuEChERS;HPLC/MS（ESI）;Abamectin

阿維菌素（Abamectin）是一種抗生素類(lèi)殺蟲(chóng)、殺螨、殺線蟲(chóng)劑，屬昆蟲(chóng)神經(jīng)毒劑，具有廣譜、高效、低殘留和對(duì)人畜及環(huán)境安全等特點(diǎn)。隨著阿維菌素的廣泛使用，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定，在西葫蘆等一些蔬菜中的殘留限量值為0.01mg/kg。在近幾年的國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全例行監(jiān)測(cè)（風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)）中，阿維菌素在水果、蔬菜中檢出率較高，并且超標(biāo)率也高于其它農(nóng)藥。目前常用的檢測(cè)方法有液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用法2類(lèi)，其中液相色譜法又分為紫外法和熒光法2種。紫外檢測(cè)器是廣譜檢測(cè)器，但阿維菌素的干擾大，且靈敏度不高。熒光法須經(jīng)衍生化試劑柱后衍生反應(yīng)，前處理復(fù)雜，工作量較大。液質(zhì)聯(lián)用法在國(guó)標(biāo)中使用的的是APCI源，APCI源產(chǎn)生單電荷離子，不利于像阿維菌素（分子量是873.09）等大分子物質(zhì)檢測(cè)。本實(shí)驗(yàn)，針對(duì)復(fù)雜基質(zhì)采用QuChERS方法提取凈化，定容后經(jīng)超高壓液相-串聯(lián)質(zhì)譜儀配合ESI源定性定量測(cè)定，具有前處理簡(jiǎn)單、快速，容易操作等特點(diǎn)，極大地提高了工作效率。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

1.1.1 試劑 阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)品：1000mg/L液標(biāo)，購(gòu)自天津環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院;乙腈、甲醇、甲苯均為色譜純;氯化鈉、無(wú)水硫酸鎂均在250℃下干燥8h;PSA、GCB、C18均購(gòu)自艾杰爾公司;水為超純水，使用前過(guò)0.22μm濾膜。

1.1.2 儀器 Waters XEVO TQ MS液質(zhì)聯(lián)用儀（ESI源、自動(dòng)進(jìn)樣器、Masslynx工作站，PL602-S電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司），Centrifuge 5430離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf，5000轉(zhuǎn)/min），A439高速勻漿機(jī)（美國(guó)Hestix Scientific），N-EVAPTM112氮吹儀（Oraganomation Associates Jnc USA）。

1.2 樣品采集 由市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)普通白菜、結(jié)球甘藍(lán)、番茄、茄子、蘋(píng)果、梨子各2kg。

1.3 樣品處理 樣品制備：樣品在鋪有牛皮紙（1個(gè)樣品換一次紙）的菜板上切成小塊，用四分法取樣品約500g，樣品在細(xì)胞破壁機(jī)中粉碎，將粉碎后的試樣裝入樣品盒中，備用。

試樣提?。簻?zhǔn)確稱(chēng)取10.0g試樣至于50mL離心管中，加入20mL乙腈，高速勻漿1min。加入4gNaCl和4g無(wú)水MgSO4混合后，劇烈振搖2min，高速離心3min（5000轉(zhuǎn)/min）。

凈化：吸入5mL上清液到10mL具塞離心管中（離心管中放有200mgPSA、200mgGCB、100mgC18的混合物），加入2.5mL甲苯，劇烈振搖1min，高速離心3min（5000轉(zhuǎn)/min）。吸取3mL液體至10mL離心管，在氮吹儀上55℃下氮吹至近干，用甲醇準(zhǔn)確定容至1mL，過(guò)0.22μm濾膜，上機(jī)待測(cè)。

1.4 儀器條件 色譜柱：Acquity UPLC BEH C18（50mm×2.1mm×1.7μm）;流動(dòng)相為甲醇和0.5‰的甲酸水溶液，采用梯度洗脫（梯度洗脫程序見(jiàn)表1）;柱溫：40℃;樣品室溫度：10℃;出峰時(shí)間：5.68min;（質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表2），EI源溫度：150℃;進(jìn)樣量： 3.0μL;載氣：氮?dú)?流速：1000L/h;運(yùn)行時(shí)間：10min。

2 結(jié)果與分析

2.1 準(zhǔn)確性 進(jìn)樣后阿維菌素的全掃圖（TIC）和定性離子、定量離子譜圖見(jiàn)圖1～3。由圖1～3可以看出，濃度為0.5mg/kg番茄響應(yīng)值較好，峰型對(duì)稱(chēng)平滑。濃度為0.05mg/kg結(jié)球甘藍(lán)的譜圖中，定性離子和定量離子譜圖重現(xiàn)性較好，靈敏度高;濃度為0.01mg/kg的梨子添加回收的譜圖中，TIC圖較光滑，而定性離子和定量離子的譜圖峰型完整，離子豐度比和標(biāo)液中一致，重現(xiàn)性很好，可以準(zhǔn)確定量。

2.2 回收率 阿維菌素分別用于番茄、茄子、普通白菜、梨子、蘋(píng)果、結(jié)球甘藍(lán)6種蔬菜、水果，按照0.01mg/kg，0.05mg/kg，0.5mg/kg添加水平，每個(gè)水平做3個(gè)平行，進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，回收率良好（具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表3）。由表3可以看出阿維菌素的平均回收率都在70%～100%之間，RSD在8%以下，符合農(nóng)藥殘留分析要求。

3 討論

QuEChERS方法由美國(guó)農(nóng)業(yè)部Anastassiades教授2003年開(kāi)發(fā)應(yīng)用以來(lái)，因其價(jià)格便宜、簡(jiǎn)單快速、容易操作等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，大大地提高了檢測(cè)的效率，降低了檢測(cè)的成本。國(guó)外蔬菜種類(lèi)比較單一，生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化，基質(zhì)比較簡(jiǎn)單;國(guó)內(nèi)蔬菜品種繁多，種植環(huán)境差異大，基質(zhì)相對(duì)復(fù)雜。本次試驗(yàn)優(yōu)化了QuEChERS前處理方法，適合復(fù)雜蔬菜、水果前處理，使之凈化更好。本次試驗(yàn)結(jié)合HPLC/MS（ESI）法來(lái)測(cè)定阿維菌素，ESI源為電噴霧離子化技術(shù)，使樣品先帶有電荷再?lài)婌F帶電，液滴在去溶劑化過(guò)程中形成樣品離子從而被檢測(cè);國(guó)標(biāo)中使用的是APCI源檢測(cè)阿維菌素，APCI源為大氣壓化學(xué)離子化技術(shù)，一般檢測(cè)弱極性、小分子有機(jī)物。APCI源測(cè)定阿維菌素時(shí)響應(yīng)值小，信號(hào)不穩(wěn)定;而使用ESI源，響應(yīng)值有極大的提高，穩(wěn)定性增強(qiáng)。因此，在阿維菌素農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，液質(zhì)聯(lián)用儀中使用ESI源是一種更好的選擇方案。優(yōu)化后的QuEChERS方法和HPLC/MS（ESI）兩者相結(jié)合符合農(nóng)藥檢測(cè)發(fā)展方向，是一種理想的檢測(cè)方法。

參考文獻(xiàn)

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[3]食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法23200.113-2016[S].

（責(zé)編：王慧晴）作者簡(jiǎn)介：方玲（1979—），女，安徽合肥人，助理農(nóng)藝師，主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)工作。? ?收稿日期：2019-04-10