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        揭秘中華鱘人工繁育“黑科技”

        2019-06-18 06:09:00三峽集團(tuán)中華鱘研究所
        中國(guó)三峽 2019年5期
        關(guān)鍵詞:中華鱘黑科技親魚(yú)

        ◎文、圖 | 三峽集團(tuán)中華鱘研究所

        中華鱘是一種古老的軟骨硬鱗魚(yú)類(lèi),屬于鱘形目魚(yú)類(lèi),是中生代殘存下來(lái)的極少數(shù)古代魚(yú)類(lèi)之一,被譽(yù)為“長(zhǎng)江魚(yú)王”。他們已經(jīng)在地球上繁衍生息了一億四千萬(wàn)年之久,他們的祖先甚至親歷了長(zhǎng)江的形成和變遷。他們生在長(zhǎng)江,長(zhǎng)在大海,為了繁衍后代,以超強(qiáng)的感知力和堅(jiān)韌不拔的毅力,從大海溯流搏擊,洄游數(shù)千里回到長(zhǎng)江,從不迷失方向。“千斤臘子”這句諺語(yǔ)是四川漁民們對(duì)中華鱘的形象化描述,形容中華鱘龐大的身形,在《詩(shī)經(jīng)·衛(wèi)風(fēng)·碩人》中還有“鮪發(fā)發(fā),葭揭揭”的記載,都說(shuō)明中華鱘曾是長(zhǎng)江沿岸常見(jiàn)的漁業(yè)資源。然而,由于種種原因,中華鱘的種群數(shù)量下降驚人,1988年被定為我國(guó)一級(jí)保護(hù)物種。

        與白鱀豚、白鱘相比,中華鱘是幸運(yùn)的。1982年,葛洲壩工程興建之際,為保護(hù)中華鱘等受工程影響的關(guān)鍵水生物種,經(jīng)水利部批準(zhǔn)成立的中華鱘研究所,成為我國(guó)第一個(gè)真正意義的魚(yú)類(lèi)增殖放流站,并逐漸成長(zhǎng)為中華鱘等長(zhǎng)江珍稀魚(yú)類(lèi)保護(hù)的中堅(jiān)力量,是三峽集團(tuán)深入踐行長(zhǎng)江大保護(hù)的重要組成部分。

        經(jīng)過(guò)多年的不懈努力,研究所在中華鱘研究保護(hù)方面相繼取得了一系列突破性成果:1984年,中華鱘人工繁殖成功;1986年,采用人工合成激素替代傳統(tǒng)手段催產(chǎn)繁殖,結(jié)束了捕殺野生中華鱘獲得催產(chǎn)素的歷史;1995年,大規(guī)模、大規(guī)格中華鱘養(yǎng)殖技術(shù)取得重大突破。從上個(gè)世紀(jì)八十年代至今,中華鱘研究所持續(xù)向長(zhǎng)江、珠江等流域增殖放流中華鱘超過(guò)500萬(wàn)尾,有效地保護(hù)了中華鱘物種。2009年至2011年,中華鱘研究所不斷攀登科研高峰,成功實(shí)施了三次中華鱘全人工繁殖,攻克了純淡水條件下中華鱘蓄養(yǎng)成熟的難題,探索出了中華鱘種群繁衍的有效途徑,使中華鱘保護(hù)工作擺脫了對(duì)野生資源的依賴。這項(xiàng)成果通過(guò)了國(guó)內(nèi)頂級(jí)專(zhuān)家的鑒定,被確認(rèn)為國(guó)際領(lǐng)先水平。2013年至今,中華鱘物種保護(hù)前沿技術(shù)向縱深發(fā)展,突破中華鱘單雌性繁殖技術(shù)。2014年10月,子一代中華鱘順利實(shí)現(xiàn)多次成熟并繁殖成功,標(biāo)志著中華鱘全人工繁殖技術(shù)——“中華鱘親本再成熟”這一關(guān)鍵技術(shù)有了實(shí)質(zhì)性突破。2016年構(gòu)建中華鱘親魚(yú)遺傳譜系,為中華鱘人工種群可持續(xù)繁殖提供技術(shù)保障;同時(shí)開(kāi)展中華鱘基因組研究,譜系研究及遺傳管理研究、開(kāi)展中華鱘基因組學(xué)研究,為更深層次的中華鱘研究與保護(hù)工作奠定基礎(chǔ)。

        最早的中華鱘人工繁殖中華鱘研究所成立之初,主要以網(wǎng)捕過(guò)壩的方式實(shí)施中華鱘保護(hù)工作,并開(kāi)始嘗試中華鱘人工繁殖技術(shù)的研究。最早的中華鱘人工繁殖技術(shù)均以成熟中華鱘腦垂體進(jìn)行催產(chǎn)。中華鱘研究所于1984年,采用這一傳統(tǒng)的方式進(jìn)行了嘗試,成功催產(chǎn)3組中華鱘親魚(yú),并孵化出24萬(wàn)余尾中華鱘幼苗,成功實(shí)現(xiàn)零的突破。該催產(chǎn)方式每年需要宰殺40至50尾成熟中華鱘,代價(jià)之大令人心痛,因此,采用“殺雞取卵”的方式進(jìn)行人工催產(chǎn)并非長(zhǎng)久之計(jì),必須找到一種能夠替代中華鱘腦垂體的催產(chǎn)劑。

        1982年,科研人員以網(wǎng)捕過(guò)壩的方式對(duì)中華鱘進(jìn)行保護(hù)。

        LRH-A催產(chǎn)的創(chuàng)新之路功夫不負(fù)有心人,中華鱘研究所科研人員通過(guò)幾年的不斷嘗試,于1985年,采用人工合成激素促黃體生成素釋放激素類(lèi)似物(LRH-A)代替鱘魚(yú)腦垂體進(jìn)行催產(chǎn)試驗(yàn)獲得成功,通過(guò)不斷完善,中華鱘人工繁殖不再需要犧牲親本的生命,對(duì)中華鱘物種保護(hù)工作具有重要意義。1987年,LHR-A代替腦垂體催產(chǎn)中華鱘的技術(shù)成果獲得國(guó)家科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。

        與此同時(shí),中華鱘研究所對(duì)鱘魚(yú)的研究更加廣泛和深入。研究所將中華鱘人工繁殖技術(shù)進(jìn)行了推廣,開(kāi)展了對(duì)國(guó)內(nèi)外各種鱘魚(yú)的人工繁殖技術(shù)研究,成功實(shí)現(xiàn)了匙吻鱘、史氏鱘等的人工繁殖。

        中華鱘苗種培育技術(shù)的革新利用LHR-A代替腦垂體催產(chǎn)中華鱘的成功,使人們看到了通過(guò)人工繁殖增殖中華鱘種群的希望。然而,在上世紀(jì)90年代之前,中華鱘幼苗培育技術(shù)一直處于較低水平,大規(guī)模、大規(guī)格苗種培育技術(shù)沒(méi)有取得突破,幼苗培育至開(kāi)口攝食階段后存活率極低,這就無(wú)法進(jìn)行大規(guī)格苗種培育。因此,在上世紀(jì)90年代中期,中華鱘放流基本以仔魚(yú)為主。為了攻克大規(guī)格苗種培育技術(shù)難關(guān),上世紀(jì)80年代中后期至90年代早期,中華鱘研究所技術(shù)人員在缺乏任何相關(guān)資料的情況下,從中華鱘生理、生態(tài)等各個(gè)方面入手,對(duì)苗種人工培育中的水質(zhì)、水溫、餌料、養(yǎng)殖設(shè)備設(shè)施、魚(yú)病等一系列影響中華鱘生存的因素進(jìn)行了廣泛的試驗(yàn)和研究,一步步攻克了中華鱘苗種培育的關(guān)鍵技術(shù)。

        1995年,中華鱘研究所在國(guó)內(nèi)率先突破大規(guī)格幼鱘培育技術(shù),將規(guī)?;嘤作\的成活率提高到70%以上,首次放流10厘米以上規(guī)格中華鱘幼鱘突破3萬(wàn)尾。1997年攻克了中華鱘營(yíng)養(yǎng)需求和馴食配合飼料技術(shù),國(guó)內(nèi)大規(guī)模鱘魚(yú)苗種培育的瓶頸得以打破,使苗種培育不再依賴活餌料,大大提高了培育苗種的數(shù)量和放流魚(yú)種的規(guī)格。

        活體無(wú)創(chuàng)傷采卵技術(shù)過(guò)去取卵,需要在中華鱘腹部開(kāi)一個(gè)小口才能成功將其腹中的卵取出,該種方式容易對(duì)中華鱘造成傷害,不利于親魚(yú)的產(chǎn)后康復(fù)。為了降低產(chǎn)卵對(duì)雌性親魚(yú)的傷害,研究所科研人員嘗試腹部按壓的方式進(jìn)行采卵,通過(guò)不斷調(diào)整力度,于2003年取得中華鱘活體無(wú)創(chuàng)傷采卵技術(shù)的成功。該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用使產(chǎn)后親魚(yú)得以?;睿⑼ㄟ^(guò)康復(fù)后再放回長(zhǎng)江。

        全人工繁殖開(kāi)創(chuàng)中華鱘保護(hù)新篇章盡管中華鱘研究所通過(guò)捕獲成熟親魚(yú)實(shí)現(xiàn)了人工繁殖,但真正意義上的人工繁殖還未達(dá)成,我們還未獲得成熟的人工培育的中華鱘親魚(yú),因?yàn)槿斯し敝尺^(guò)程中使用的親魚(yú)還完全來(lái)自對(duì)中華鱘野生親魚(yú)的捕撈。進(jìn)入21世紀(jì),隨著中華鱘繁殖群體資源減少,捕撈野生親本的難度逐漸增大,部分年份甚至無(wú)法捕撈到野生的雄性成熟親魚(yú),且親魚(yú)的精子和卵子質(zhì)量也大幅下降,隨之帶來(lái)的捕撈強(qiáng)度的增加對(duì)中華鱘自然繁殖的壓力逐漸顯現(xiàn)。中華鱘物種保護(hù)不容樂(lè)觀,必須找到不依賴自然繁殖群體的新的物種保護(hù)方式。由于中華鱘是江海洄游性魚(yú)類(lèi),其在淡水中如何實(shí)現(xiàn)性成熟是一個(gè)工作難題,由于沒(méi)有現(xiàn)成的經(jīng)驗(yàn)可以借鑒,工作方法只能靠摸索。技術(shù)人員將野生成熟親魚(yú)和野生III期親魚(yú)的人工馴養(yǎng)等方面的經(jīng)驗(yàn)融會(huì)貫通,與子一代中華鱘親魚(yú)人工馴養(yǎng)的實(shí)際情況相結(jié)合,很快找到了包括水溫、水質(zhì)、水流、光照等環(huán)境因子在內(nèi)的子一代中華鱘親魚(yú)性腺發(fā)育周年養(yǎng)殖及環(huán)境綜合調(diào)控的研究方法,順利實(shí)現(xiàn)了子一代中華鱘親魚(yú)的性腺發(fā)育成熟。

        2009年10月,首次確認(rèn)一組子一代中華鱘親魚(yú)(一雌一雄)性腺發(fā)育成熟??蒲腥藛T對(duì)這一組親魚(yú)進(jìn)行了催產(chǎn)。4日下午2時(shí)28分,第一尾子二代中華鱘魚(yú)苗在中華鱘研究所三峽基地誕生,經(jīng)過(guò)91至108小時(shí)的孵化,共孵化出苗1.8萬(wàn)尾,中華鱘全人工繁殖獲得了首次成功,為中華鱘物種保護(hù)和資源的持續(xù)利用開(kāi)辟了新途徑,具有里程碑式意義。

        隨后的幾年中,中華鱘全人工繁殖連續(xù)4次獲得成功,分別獲得受精卵5萬(wàn)、10萬(wàn)、21萬(wàn)、30萬(wàn)粒,繁殖規(guī)模逐步達(dá)到野生親魚(yú)繁殖規(guī)模。2014年10月,子一代中華鱘順利實(shí)現(xiàn)多次成熟并繁殖成功,標(biāo)志著中華鱘全人工繁殖技術(shù)有了實(shí)質(zhì)性突破。

        中華鱘的全人工繁殖得以突破,是中華鱘保護(hù)的福音,但研究所科研人員沒(méi)有放松警惕,陸續(xù)開(kāi)展了更多更前沿的科研工作,為中華鱘保護(hù)工作開(kāi)辟更多的道路。

        中華鱘保護(hù)前沿技術(shù)向縱深發(fā)展為了能夠在極端條件下實(shí)現(xiàn)中華鱘繁殖,中華鱘研究所開(kāi)展了單性繁殖技術(shù)研究,并于2013年率先突破了中華鱘單雌性繁殖技術(shù),實(shí)現(xiàn)了“只有鱘媽媽也能生鱘寶寶”的奇跡,為中華鱘物種再加一層保護(hù)。

        為了保持中華鱘人工種群的遺傳多樣性,避免近親繁殖造成的種質(zhì)資源退化,維持中華鱘的進(jìn)化潛能,研究所于2016年完成構(gòu)建中華鱘人工種群梯隊(duì)遺傳譜系,對(duì)人工種群實(shí)行了科學(xué)的遺傳管理,為中華鱘人工繁殖的可持續(xù)發(fā)展提供保障。與此同時(shí),構(gòu)建了中華鱘基因組BAC文庫(kù),為更深層次地開(kāi)展中華鱘生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖以及疾病機(jī)理等方面的研究提供了資源庫(kù)。

        中華鱘標(biāo)記追蹤及放流效果評(píng)估

        4月13日,三峽集團(tuán)舉行2019年長(zhǎng)江三峽中華鱘放流活動(dòng),此次放流活動(dòng)放歸了700尾子二代中華鱘,并從中選擇30尾身強(qiáng)體壯的鱘魚(yú)植入了聲吶標(biāo)記。中華鱘達(dá)到性成熟的時(shí)間一般為9至12齡,而本次選取的30尾中華鱘年齡已達(dá)到了8至10齡,這些鱘魚(yú)在未來(lái)幾年將陸續(xù)達(dá)到性成熟并返回長(zhǎng)江進(jìn)行繁殖。為了保證這些“大齡”中華鱘在海洋發(fā)育成熟后返回長(zhǎng)江進(jìn)行繁殖時(shí)被發(fā)現(xiàn),并得到更好的保護(hù),本年度的聲吶標(biāo)記均使用了長(zhǎng)壽命標(biāo)記,保證其在植入中華鱘腹腔后可連續(xù)工作10年左右。

        為什么選擇聲吶標(biāo)記目前常用的魚(yú)類(lèi)標(biāo)記方法有體外掛牌標(biāo)記、被動(dòng)整合式雷達(dá)標(biāo)記(PIT標(biāo)記)、魚(yú)類(lèi)熒光標(biāo)記(VIE標(biāo)記)、微型線碼標(biāo)記(CWT標(biāo)記)、聲吶標(biāo)記等。體外掛牌標(biāo)記容易識(shí)別但也容易脫落,主要用作短期標(biāo)記;PIT標(biāo)記、VIE標(biāo)記和CWT標(biāo)記可在魚(yú)體中長(zhǎng)期保存,但識(shí)別魚(yú)體標(biāo)記編號(hào)需要將魚(yú)體捕獲后近距離識(shí)別,僅適用于池塘等小面積水體中使用;聲吶標(biāo)記則兼具保存時(shí)間長(zhǎng)久和監(jiān)測(cè)距離遠(yuǎn)的特性,對(duì)中華鱘降河洄游這種長(zhǎng)距離、大范圍活動(dòng)的監(jiān)測(cè)工作來(lái)說(shuō)最為適合。

        聲吶標(biāo)記植入中華鱘腹腔

        如何植入聲吶標(biāo)記開(kāi)展超聲波標(biāo)記植入手術(shù)前,對(duì)選定的標(biāo)記鱘魚(yú)進(jìn)行編號(hào)并逐尾測(cè)量其體重、體長(zhǎng)、全長(zhǎng)等生物學(xué)指標(biāo),建立放流中華鱘檔案。

        聲吶標(biāo)記需要植入到魚(yú)體腹腔,才能達(dá)到長(zhǎng)久保存的目的。因?yàn)閮?nèi)臟主要集中在腹腔前部,腹腔后部只有性腺等少數(shù)器官,且空腔體積相對(duì)較大,便于標(biāo)記植入,手術(shù)切口一般在中華鱘生殖孔前3至6塊腹骨板之間,偏離腹中線約1厘米處位置。聲吶標(biāo)記植入后,迅速進(jìn)行傷口縫合并做消毒防水處理。手術(shù)完成后將標(biāo)記魚(yú)放入暫養(yǎng)區(qū)進(jìn)行康復(fù)養(yǎng)殖,確保放流前標(biāo)記魚(yú)身體狀況良好,創(chuàng)口愈合良好,超聲波標(biāo)記信號(hào)發(fā)射正常。

        中華鱘追蹤的新亮點(diǎn)截至目前,三峽集團(tuán)中華鱘研究所已累計(jì)向長(zhǎng)江放流中華鱘超過(guò)500萬(wàn)尾。為了科學(xué)、客觀、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)中華鱘放流效果,更好地保護(hù)好中華鱘這一珍稀物種,科研人員融合了超聲波遙測(cè)技術(shù)和物聯(lián)網(wǎng)思維,建立了覆蓋宜昌至河口水域近1800公里長(zhǎng)江中下游河段的中華鱘洄游監(jiān)測(cè)系統(tǒng),為中華鱘研究和保護(hù)工作增添了一大利器。該系統(tǒng)是目前國(guó)內(nèi)覆蓋范圍最廣、最全面的魚(yú)類(lèi)放流效果監(jiān)測(cè)評(píng)估系統(tǒng)。

        中華鱘研究所于2014至2018年連續(xù)開(kāi)展了中華鱘放流標(biāo)記追蹤工作,通過(guò)中華鱘洄游監(jiān)測(cè)系統(tǒng)取得了大量現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù),對(duì)放流中華鱘降河入海過(guò)程中在長(zhǎng)江中下游的洄游規(guī)律及入海率有了較為系統(tǒng)的評(píng)估。在總結(jié)和評(píng)估往年放流效果的基礎(chǔ)上,2019年度中華鱘監(jiān)測(cè)工作在長(zhǎng)江支流方面又有了新的拓展。本年度將對(duì)松滋河、漢江、芒稻河和洞庭湖、鄱陽(yáng)湖等長(zhǎng)江重要支流河湖進(jìn)行布控,監(jiān)控放流中華鱘進(jìn)入支流水體的情況,了解中華鱘在支流水體中的活動(dòng)規(guī)律及分布情況,為中華鱘的全方位保護(hù)提供更加全面的信息。

        只有鱘媽媽也能生鱘寶寶

        在中國(guó)的神話故事里,女?huà)z自己一個(gè)人便創(chuàng)造了人類(lèi),成為了人類(lèi)的第一個(gè)母親。而在動(dòng)物世界中,沒(méi)有父親母親同時(shí)存在一般是不能生出小寶寶的。但科學(xué)技術(shù)就是這么的神奇,讓神話故事里才能發(fā)生的事情變?yōu)榱爽F(xiàn)實(shí)。如今,采用人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育技術(shù),就能實(shí)現(xiàn)只有媽媽也能生出小寶寶的“神話故事”。

        為了應(yīng)對(duì)極端情況下僅存留單個(gè)性別個(gè)體的繁衍問(wèn)題,中華鱘研究所進(jìn)行了單雌性生殖技術(shù)研究。該技術(shù)通過(guò)人工誘導(dǎo)激活中華鱘卵子,使其發(fā)育成正常個(gè)體,從而實(shí)現(xiàn)“只有鱘媽媽也能生出鱘寶寶”。

        多年以前,中科院水生生物研究所的白鱀豚館中喂養(yǎng)著最后一尾白鱀豚“淇淇”,二十多年來(lái)一直找不到配偶,因此沒(méi)有留下任何子嗣,孤獨(dú)地離開(kāi)了世界。杜合軍,作為一名水生生物研究所畢業(yè)的博士,曾經(jīng)深刻地體會(huì)過(guò)那種眼睜睜看著一個(gè)物種的離去卻無(wú)能為力的痛楚。如今,杜合軍博士成了中華鱘研究所物種保護(hù)研究室的學(xué)科帶頭人,成為一名資深的水生生物保護(hù)專(zhuān)家,他不希望在白鱀豚身上發(fā)生的悲劇在中華鱘身上重演。

        近年來(lái)中華鱘野生種群資源持續(xù)衰退,由于中華鱘雌性平均壽命明顯長(zhǎng)于雄性,在資源衰退過(guò)程中出現(xiàn)明顯的雌雄比例失衡現(xiàn)象。2007年、2008年最后幾次科研捕撈調(diào)查結(jié)果顯示,洄游至葛洲壩下的雌性中華鱘個(gè)體比例已是雄性的7倍。

        “假設(shè)我們只能獲得雌性中華鱘時(shí),這種用其他魚(yú)種滅活精子激活中華鱘魚(yú)卵發(fā)育的方式,就對(duì)中華鱘人工繁殖有重大的現(xiàn)實(shí)意義?!倍藕宪娬f(shuō),“最好的繁殖方式當(dāng)然是兩性繁殖,但我們不得不防范極端的情況發(fā)生,做好這項(xiàng)研究,做好技術(shù)準(zhǔn)備?!?/p>

        為此,研究所科研團(tuán)隊(duì)搜集資料、設(shè)計(jì)方案、優(yōu)化條件,一次又一次開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。杜合軍博士團(tuán)隊(duì)利用滅活的中華鱘精子激活卵子,促使卵子發(fā)育成個(gè)體。在整個(gè)過(guò)程中,精子只作為“激活源”,入卵后不形成雄核,子代的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自卵子,亦稱(chēng)為雌核發(fā)育。2013年,世界上第一批只有媽媽的中華鱘寶寶在研究所的實(shí)驗(yàn)室誕生,標(biāo)志著中華鱘人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育技術(shù)取得成功。該技術(shù)為中華鱘的保護(hù)提供了新的技術(shù)手段,在鱘魚(yú)類(lèi)保護(hù)史中具有里程碑式的意義。

        雌核發(fā)育成功取決于兩項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)的突破,主要是“精子滅活”和“卵子染色體加倍”,精子滅活既要保證精子活力又要保證精子遺傳物質(zhì)失活,研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)自制實(shí)驗(yàn)裝備,不斷優(yōu)化稀釋比例、紫外照射強(qiáng)度、時(shí)間等實(shí)驗(yàn)參數(shù),而卵子染色體加倍則需要精準(zhǔn)掌握卵子發(fā)育時(shí)期,確保單細(xì)胞染色體加倍。中華鱘單性繁殖技術(shù)的突破,為中華鱘及長(zhǎng)江中其它瀕危鱘類(lèi)的單性繁殖保護(hù)提供了技術(shù)保障。

        放流現(xiàn)場(chǎng)的青年志愿者 攝影/劉華

        中華鱘野化訓(xùn)練

        模擬野外條件的養(yǎng)殖環(huán)境

        中華鱘是以動(dòng)物性食物為主的偏肉食性魚(yú)類(lèi),天然水體中的中華鱘,幼魚(yú)期主要攝食營(yíng)底棲生活的動(dòng)物;而在人工養(yǎng)殖條件下,中華鱘主要攝食人工配合飼料。室內(nèi)飼養(yǎng)的中華鱘習(xí)慣搶食人工飼料,而缺乏搜尋、識(shí)別和捕捉自然餌料(如小型魚(yú)類(lèi)、蝦、螺)的能力。由于人工馴食形成了爭(zhēng)搶的習(xí)慣,中華鱘在自然環(huán)境中取食時(shí),會(huì)因缺乏辨別/選擇能力誤食與餌料混在一起的雜質(zhì)如砂石、樹(shù)枝等進(jìn)入食道,無(wú)法消化,進(jìn)而引起病癥可能造成死亡。因此,在放流之前進(jìn)行針對(duì)自然餌料的覓食能力訓(xùn)練,就十分必要。

        在人工培育條件下,中華鱘生長(zhǎng)環(huán)境與自然條件存在較大差異,主要表現(xiàn)為:(1)水流條件差異。養(yǎng)殖水體相對(duì)靜止、生境單一,長(zhǎng)期在此環(huán)境中生長(zhǎng)可導(dǎo)致感知水流、克服水流能力的缺乏,從而在復(fù)雜的水流環(huán)境中迷失方向,同時(shí)缺乏抗擊激流的能力,隨波逐流。(2)餌料差異。人工養(yǎng)殖條件下長(zhǎng)期攝食配合飼料,若不進(jìn)行人工馴食轉(zhuǎn)化,可能使得放流魚(yú)在野生環(huán)境中食性轉(zhuǎn)化過(guò)程漫長(zhǎng),甚至無(wú)法轉(zhuǎn)換,增加死亡率。據(jù)東海所調(diào)查,在河口就曾發(fā)現(xiàn)大量攝食小石塊的放流魚(yú)。(3)捕食能力差異。養(yǎng)殖中華鱘與野生中華鱘相比,游泳能力不足,捕食及反捕食能力偏弱。(4)環(huán)境適應(yīng)能力差異。人工養(yǎng)殖條件下,養(yǎng)殖池內(nèi)均為光滑平面體,而自然環(huán)境下水體底部環(huán)境復(fù)雜,捕食環(huán)境也很復(fù)雜,若不進(jìn)行環(huán)境適應(yīng)能力的馴化,會(huì)使放流個(gè)體在自然條件下捕食能力減弱。

        2019年1月至3月,中華鱘研究所對(duì)2017年子二代(2齡)中華鱘進(jìn)行野化試驗(yàn)。主要涉及食性轉(zhuǎn)化和捕食能力的增強(qiáng)。

        在人工養(yǎng)殖條件下,中華鱘長(zhǎng)期攝食配合飼料,放流前要將它們的食性轉(zhuǎn)變?yōu)榛铕D,可使得中華鱘在野外能更好的攝食。經(jīng)過(guò)兩周的食性轉(zhuǎn)化后,中華鱘能大量攝食活餌,表明食性轉(zhuǎn)化成功。對(duì)中華鱘活餌料的投喂,涉及到泥鰍、蟶子、海蝦、小河蝦、小鯽魚(yú)、麥穗魚(yú)、底層野生小魚(yú)、小河蚌、螺螄等。

        食性轉(zhuǎn)化成功后,在喂養(yǎng)池中增加底質(zhì)(卵石和河沙),以增加環(huán)境復(fù)雜性,并將活餌投喂在卵石和河沙區(qū)域。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間地野化訓(xùn)練,中華鱘在河沙區(qū)域和卵石區(qū)域都能較好地進(jìn)行主動(dòng)攝食。經(jīng)過(guò)野化的中華鱘放流后,就能很好地適應(yīng)自然環(huán)境,提高生存率。

        放流之前對(duì)中華鱘進(jìn)行食性轉(zhuǎn)化和復(fù)雜環(huán)境中覓食能力的訓(xùn)練,有助于提高中華鱘對(duì)自然餌料的攝食能力,而且還能提高中華鱘在自然環(huán)境中的生存能力,提高放流中華鱘的存活率。

        中華鱘早期性別鑒定技術(shù)

        中華鱘無(wú)第二性征,在外表上無(wú)法進(jìn)行雌雄特征鑒別,性別鑒定問(wèn)題長(zhǎng)期以來(lái)一直困擾著養(yǎng)殖業(yè)及學(xué)術(shù)界。過(guò)去雖然已有B超、體壁開(kāi)口、穿刺、激素檢測(cè)以及體型數(shù)據(jù)推算等性別鑒定方法,但都需要在年齡達(dá)到5齡以上才能進(jìn)行鑒定,并且這些技術(shù)在鑒定雌雄方面存在準(zhǔn)確性較低的缺點(diǎn)。對(duì)中華鱘人工種群性別鑒定是平衡性別比例、篩選適合親魚(yú)、高效利用養(yǎng)殖資源的前提,性別鑒定越早越有利于人工種群的管理和親魚(yú)梯隊(duì)的建設(shè)。

        中華鱘研究所科研團(tuán)隊(duì)結(jié)合中華鱘身體結(jié)構(gòu)特征,通過(guò)改裝醫(yī)用電子內(nèi)窺鏡,建立了一套適合中華鱘的內(nèi)窺鏡技術(shù)。在整個(gè)探索過(guò)程中,科研人員首先以偶然死亡的3~4齡的中華鱘為材料,采用內(nèi)窺鏡技術(shù)獲取雌雄性腺的內(nèi)窺鏡圖譜,比較雌雄圖譜的差異,以此做為鑒定參考。然后以同等規(guī)格的雜交鱘為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,確定內(nèi)窺鏡微創(chuàng)手術(shù)開(kāi)口的最佳位置和大小,使手術(shù)后的鱘魚(yú)能夠保持良好的狀態(tài),傷口能在兩周之內(nèi)愈合。最終,將確定好的內(nèi)窺鏡技術(shù)方案應(yīng)用于中華鱘的人工繁殖工作中。通過(guò)內(nèi)窺鏡技術(shù),科研人員可以對(duì)中華鱘的性腺進(jìn)行觀察,實(shí)現(xiàn)性腺可視化,能夠精準(zhǔn)地鑒定雌雄,并將中華鱘性別鑒定時(shí)間縮短到4齡以前。

        同時(shí),該團(tuán)隊(duì)在開(kāi)展的中華鱘轉(zhuǎn)錄組研究中,通過(guò)對(duì)性腺軸測(cè)序篩選出大量性別特異表達(dá)基因,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步開(kāi)發(fā)出雌雄性別特異表達(dá)標(biāo)記,只需要剪一點(diǎn)鰭條,利用RT-PCR技術(shù)就可以鑒定其性別。中華鱘研究所科研人員通過(guò)對(duì)103尾2齡至10齡以上(其中2~3齡中華鱘子二代80尾)已知性別的樣本進(jìn)行驗(yàn)證,對(duì)于區(qū)分雌雄個(gè)體的準(zhǔn)確率為100%。該技術(shù)可以將性別鑒定提前至2齡。利用RT-PCR分子遺傳標(biāo)記方法且具有損傷小、鑒定準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。

        中華鱘早期性別的鑒定,有助于制定更加合理的人工增殖放流方案、探究中華鱘性腺發(fā)育規(guī)律,指導(dǎo)親魚(yú)培育和繁殖,更加有利于合理優(yōu)化種群的性別結(jié)構(gòu),更有效利用養(yǎng)殖資源,更加合理構(gòu)建中華鱘親魚(yú)梯隊(duì)。

        科研人員通過(guò)內(nèi)窺鏡鑒定中華鱘早期性別

        中華鱘遺傳譜系構(gòu)建

        人類(lèi)近親之間生育的子女會(huì)加大罹患疾病的概率,魚(yú)類(lèi)也一樣,通過(guò)近親繁殖獲得的后代,不僅成活率低,還會(huì)對(duì)其種質(zhì)資源造成破壞,降低物種的遺傳多樣性,大大影響物種的延續(xù)。

        中華鱘為典型的大型溯河產(chǎn)卵洄游性魚(yú)類(lèi),是我國(guó)國(guó)家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物。建立中華鱘人工養(yǎng)殖群體,實(shí)現(xiàn)全人工繁殖是人工保存中華鱘物種、實(shí)施遷地保護(hù)不可或缺的途徑,而遺傳譜系構(gòu)建是遷地保護(hù)技術(shù)研究中不可或缺的組成部分。給中華鱘親本梯隊(duì)建立“家譜”,讓親緣關(guān)系最遠(yuǎn)的進(jìn)行配對(duì)繁殖,對(duì)于保障和提升種群質(zhì)量具有重大意義。

        遺傳多樣性是物種賴以生存和進(jìn)化的物質(zhì)基礎(chǔ),保護(hù)物種其實(shí)就是要保護(hù)物種的遺傳多樣性。建立中華鱘的遺傳譜系就是為了最大限度地避免近交,盡可能地保護(hù)野生中華鱘種群的遺傳多樣性。人工繁殖的數(shù)量不是越多越好,重要的是遺傳基因是否保存更全面。目前,中華鱘親魚(yú)梯隊(duì)主要是2008年以前為數(shù)不多的野生親魚(yú)繁育留存的后代,且在2008年后無(wú)野生資源補(bǔ)充,因此,如何有效保存中華鱘遺傳多樣性,建立中華鱘人工養(yǎng)殖群體的遺傳譜系是中華鱘保護(hù)亟需解決的問(wèn)題。

        中華鱘研究所為了避免中華鱘“近親繁殖”導(dǎo)致的遺傳多樣性下降,科研人員對(duì)全部子一代中華鱘后備梯隊(duì)進(jìn)行了DNA檢測(cè),采用基因全序列分析技術(shù),構(gòu)建中華鱘后備親魚(yú)梯隊(duì)遺傳檔案和個(gè)體識(shí)別技術(shù),建立了遺傳譜系,對(duì)中華鱘梯隊(duì)實(shí)施了種群遺傳管理,制定最科學(xué)的繁殖配對(duì)策略,盡最大可能保存中華鱘人工種群的遺傳多樣性。

        子二代中華鱘?;瘜?shí)驗(yàn)

        在自然條件下,子一代中華鱘的親本——野生中華鱘,具有海河洄游特性。它們?cè)诘谐錾?、洄游到大海里生活,具有較長(zhǎng)時(shí)間海水生長(zhǎng)發(fā)育的經(jīng)歷;性成熟后,上溯洄游到長(zhǎng)江進(jìn)行繁殖,繁殖后又回到大海,等待下一次的繁殖,其間必須多次跨越鹽度屏障。由未經(jīng)海水的子一代中華鱘親魚(yú)繁育的子二代中華鱘,是否與天然條件下野生子一代中華鱘一樣,仍具有廣鹽性和較強(qiáng)的海水適應(yīng)能力?其滲透生理又是如何變化和調(diào)控的?相應(yīng)的鰓組織顯微結(jié)構(gòu)發(fā)生了哪些變化?為了回答這些問(wèn)題,中華鱘研究所對(duì)子二代中華鱘進(jìn)行了?;囼?yàn)。

        首先,科研人員采用階段遞增法,通過(guò)鹽度漸變,使子二代中華鱘順利達(dá)到30‰的海域鹽度。隨后,主要對(duì)子二代中華鱘的滲透生理變化過(guò)程及其調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究,觀察環(huán)境鹽度突變后的鰓組織結(jié)構(gòu)變化、測(cè)定并比較血清離子變動(dòng)、血清滲透壓變化及鰓Na+/K+-ATPase活性。

        淡水中的子二代中華鱘以高滲調(diào)節(jié)機(jī)制控制著體內(nèi)水-鹽代謝平衡,以適應(yīng)淡水環(huán)境中“排水保鹽”的需要。?;瘯r(shí),原有的高滲調(diào)節(jié)機(jī)制不再適用,引起體內(nèi)一系列的應(yīng)激反應(yīng)。表現(xiàn)為血清離子和滲透壓異常升高,并相繼出現(xiàn)大量吞咽海水等應(yīng)激行為來(lái)被動(dòng)調(diào)整滲透壓的升高。調(diào)滲組織發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能上的調(diào)整:鰓上泌氯細(xì)胞增生和成熟,并轉(zhuǎn)變?yōu)椤昂K汀泵诼燃?xì)胞,鰓上Na+/K+-ATPase活力迅速上升。隨著調(diào)滲組織結(jié)構(gòu)和功能的逐步調(diào)整,低滲調(diào)節(jié)機(jī)制被啟動(dòng),鰓開(kāi)始向外排出一價(jià)離子,腎減少了泌尿量并加強(qiáng)水分的重吸收。機(jī)體通過(guò)一系列“排鹽保水”新的水-鹽代謝方式,使血清[Na+]、[Cl-]和滲透壓回落,并重新維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。調(diào)滲組織結(jié)構(gòu)和功能的調(diào)整完成,標(biāo)志著子二代中華鱘幼魚(yú)完成了滲透生理調(diào)節(jié)機(jī)制的轉(zhuǎn)變。子二代中華鱘幼魚(yú)以這種完全不同于淡水環(huán)境中的低滲調(diào)節(jié)機(jī)制控制著體內(nèi)的水-鹽平衡,這種調(diào)節(jié)方式滿足了子二代中華鱘適應(yīng)海水高滲環(huán)境的需要。

        實(shí)驗(yàn)證明,子二代中華鱘海化時(shí)具有較強(qiáng)的滲透生理調(diào)節(jié)能力和高鹽度海水的適應(yīng)能力,為中華鱘物種保護(hù)對(duì)策的調(diào)整提供科學(xué)依據(jù),同時(shí)也對(duì)我國(guó)其他瀕危水生野生動(dòng)物保護(hù)的科學(xué)規(guī)劃具有借鑒意義。

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