郭晶晶，烏日娜，安飛宇，李 洋，祝新媛，武俊瑞*

（沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110866）

心血管疾病是導(dǎo)致人類(lèi)死亡的主要原因之一，其造成的死亡人數(shù)占全球總死亡人數(shù)的29%左右[1-2]。膽固醇對(duì)幾種生理功能至關(guān)重要，對(duì)某些激素和維生素的形成是必要的，是細(xì)胞膜和神經(jīng)細(xì)胞的重要組成部分[3]。然而，血清膽固醇水平升高被廣泛認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病和中風(fēng)等心血管疾病的危險(xiǎn)因素[4-6]。流行病學(xué)和臨床研究表明：在膽固醇含量與心血管疾病之間存在著顯著的正相關(guān)，血清膽固醇下降1%可將心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)下降3%[7-9]。雖然膽固醇是人體組織細(xì)胞所不可缺少的重要物質(zhì)，但攝入的食物也會(huì)影響血漿脂質(zhì)水平，疾病管理的主要預(yù)防措施之一是通過(guò)飲食和藥物治療來(lái)控制血液膽固醇和甘油三酯水平，最顯著的是通過(guò)使用他汀類(lèi)藥物[10-11]。其他預(yù)防措施包括低膽固醇低脂肪食物的攝入、高膳食纖維食物的攝入，或者含有益生菌食物的攝入，例如雙歧桿菌、植物乳桿菌等[12-14]。國(guó)內(nèi)外越來(lái)越多的研究表明補(bǔ)充益生菌可以改善脂質(zhì)代謝，降低血清膽固醇含量[15-17]。

植物乳桿菌是公認(rèn)的一種益生菌，存在于許多食品中，同時(shí)也存在于人體胃腸道中，對(duì)人體健康具有良好的促進(jìn)作用[18]。植物乳桿菌具有很多生理功能，如增強(qiáng)機(jī)體免疫力、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收、維持腸道內(nèi)菌群平衡等，許多研究表明植物乳桿菌也具有降低血清膽固醇的作用[19-20]。Nguyen等[21]通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)從嬰兒腸道中分離出的植物乳桿菌PH04具有降膽固醇的功能。胡夢(mèng)坤等[22]從泡菜中篩選出一株高效降膽固醇的植物乳桿菌LP1103，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其在體內(nèi)也有高效的降膽固醇作用。張健等[23]通過(guò)研究證實(shí)了植物乳桿菌L01對(duì)喂食高脂膳食的大鼠脂質(zhì)代謝中的降膽固醇功效。Li Chuan等[24]也通過(guò)大鼠模型實(shí)驗(yàn)證明了植物乳桿菌NCU116的降膽固醇作用。

許多學(xué)者研究了來(lái)自發(fā)酵乳制品和泡菜等制品中的乳酸菌的降膽固醇特征，然而很少有關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵豆醬中乳酸菌的降膽固醇作用的研究，因此，本研究旨在評(píng)估從東北傳統(tǒng)發(fā)酵豆醬中篩選出的植物乳桿菌WW在喂食高膽固醇飲食的大鼠中的益生特征和降膽固醇潛力。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

植物乳桿菌WW（L. plantarum WW），分離自東北自然發(fā)酵豆醬。

32 只5 周齡清潔級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量約為120～135 g，購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司，許可證號(hào)：SCXK（遼）2015-0001。

高脂飼料（基礎(chǔ)飼料87.7%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同）、膽固醇2%、豬油10%、膽酸鈉0.3%）購(gòu)自遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)股份有限公司。

MRS液體培養(yǎng)基為本實(shí)驗(yàn)室自制；15%脫脂乳培養(yǎng)基 內(nèi)蒙古金德瑞貿(mào)易有限責(zé)任公司。

總膽固醇（totalcholesterol，TC）試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein-cholesterol，HDL-C）試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇（lowdensity lipoprotein-cholesterol，LDL-C）試劑盒、甘油三酯（triglyceride，TG）試劑盒、總膽汁酸（total bile acid，TBA）試劑盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）試劑盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）試劑盒、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）試劑盒 南京建成生物工程研究所。

二甲苯、無(wú)水乙醇、濃鹽酸、硫酸鋁、碘酸鈉、檸檬酸 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；蘇木精 北京索萊寶科技有限公司；曙紅Y（醇溶） 生工生物工程股份有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

DZX-50KBS型立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海申安醫(yī)療器械廠；UV-4802紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì) 尤尼柯（上海）儀器有限公司；生物潔凈工作臺(tái) 蘇州市華宇凈化設(shè)備有限公司；5418R小型臺(tái)式冷凍離心機(jī)德國(guó)Eppendorf公司；DNP-9080型生化培養(yǎng)箱、QH01-9030A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海精宏試驗(yàn)儀器有限公司；冷藏冷凍箱 青島海爾股份有限公司；ELX-800酶標(biāo)儀 美國(guó)BioTek公司；DH36001B電熱恒溫培養(yǎng)箱 天津泰斯特公司；H-2050R超速冷凍離心機(jī)湖南湘儀公司；RM2235石蠟切片機(jī) 德國(guó)Leica公司；DP73顯微鏡 日本Olympus公司。

1.3 方法

1.3.1 菌種的活化與菌懸液的制備

將L. plantarum WW活化3 代，以2%接種量接種于MRS培養(yǎng)基中，37 ℃培養(yǎng)12 h，將培養(yǎng)液6 000 r/min離心3 min，用無(wú)菌生理鹽水洗滌2 次，收集菌體，用15%的無(wú)菌脫脂乳復(fù)溶成菌懸液，菌落計(jì)數(shù)，調(diào)整菌液濃度至1h1010CFU/mL，用于大鼠灌胃。

1.3.2 動(dòng)物分組及飼養(yǎng)

3 2 只S D大鼠1 2 h亮暗循環(huán)飼養(yǎng)，室內(nèi)溫度20～22 ℃，相對(duì)濕度60～65%，保持動(dòng)物房通風(fēng)、透光和清潔衛(wèi)生。實(shí)驗(yàn)前大鼠自由攝食飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，將大鼠按照各組之間平均體質(zhì)量無(wú)顯著差異分為4 組：正常對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼料＋無(wú)菌水、高脂模型組飼喂高脂飼料＋無(wú)菌水、脫脂乳對(duì)照組飼喂高脂飼料＋無(wú)菌脫脂乳、菌液干預(yù)組飼喂高脂飼料＋菌懸液（1h1010CFU/mL），每組8 只。每只大鼠灌胃量為10 mL/kg mb，每天上午定時(shí)灌胃，連續(xù)灌胃12 周。

1.3.3 動(dòng)物樣品采集

每天記錄各組大鼠的攝食量，每周記錄體質(zhì)量。收集各組大鼠最后3 d的糞便，－80 ℃保存，用于糞便指標(biāo)的檢測(cè)。12 周飼養(yǎng)結(jié)束后，稱(chēng)量體質(zhì)量，禁食過(guò)夜，靜脈取血，用于血清血脂的檢測(cè)。解剖取肝臟、脾臟、腎臟和心臟，用冷的生理鹽水沖洗干凈后濾紙吸干水分，分別稱(chēng)質(zhì)量，按式（1）計(jì)算臟器指數(shù)。

摘取腹部脂肪、腎周脂肪及附睪脂肪，分別稱(chēng)質(zhì)量并按式（2）計(jì)算脂肪系數(shù)。

從大鼠肝臟最大肝葉中（同一部位）切取相同大小的組織塊，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%甲醛溶液中固定24 h，進(jìn)行HE組織染色。其余肝臟用液氮迅速冷凍，－80 ℃冰箱保存，并盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.3.4 樣品指標(biāo)測(cè)定

1.3.4.1 血清指標(biāo)測(cè)定

將取得的血液樣品于3 000 r/min離心15 min，小心吸取上層血清，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求測(cè)定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、TBA、MDA、ALT、AST水平。

1.3.4.2 肝臟指標(biāo)測(cè)定

準(zhǔn)確稱(chēng)取肝臟質(zhì)量，按1∶9（m/V）的比例加入9 倍的生理鹽水，冰浴條件下機(jī)械勻漿，2 500 r/min離心10 min，制備成質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的勻漿上清液。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求測(cè)定肝臟中TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT和AST水平。

1.3.4.3 肝臟組織HE染色

將肝臟組織進(jìn)行脫水、石蠟包埋，切成厚5 μm的薄片，放在60 ℃溫箱中2 h，烘干。將切片脫蠟至水后用蘇木精和伊紅染液進(jìn)行染色，然后脫水、透明、封片，最后于顯微鏡下觀察染色效果，于200 倍鏡下拍照。

1.3.4.4 糞便指標(biāo)測(cè)定

準(zhǔn)確稱(chēng)取糞便質(zhì)量，按1∶9（m/V）的比例加入生理鹽水，冰浴條件下機(jī)械勻漿，2 500 r/min離心10 min，制備成質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%的勻漿上清液。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求測(cè)定糞便中TC、TG和TBA水平。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和顯著性檢驗(yàn)。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 L. plantarum WW對(duì)大鼠體質(zhì)量和攝食量的影響

在大鼠12 周飼養(yǎng)期間未出現(xiàn)異常體征，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后大鼠體質(zhì)量增加量、總攝食量的記錄結(jié)果如表1所示。

表1 各組大鼠的體質(zhì)量增加量、總攝食量（n＝8）Table1 Body mass gain and total food intake of rats in each group (n= 8)

在4 組大鼠12 周的飼養(yǎng)過(guò)程中，每組大鼠體征正常，沒(méi)有死亡現(xiàn)象。由表1可知，4 組大鼠初始體質(zhì)量沒(méi)有顯著差異，在12 周飼養(yǎng)結(jié)束后，相對(duì)于正常對(duì)照組，高脂模型組大鼠的最終體質(zhì)量顯著增加（P＜0.05），體質(zhì)量增加量也顯著升高（P＜0.05），總攝食量顯著增加（P＜0.05），這說(shuō)明高脂飲食能夠引起大鼠體質(zhì)量的增加，初步確定高脂模型構(gòu)建成功；相對(duì)于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組，菌液干預(yù)組的大鼠總攝食量顯著降低（P＜0.0 5），同時(shí)體質(zhì)量增加量也有所降低（P＞0.05），這說(shuō)明L. plantarum WW能夠通過(guò)減少大鼠的攝食量來(lái)抑制體質(zhì)量的增加。

2.2 L. plantarum WW對(duì)大鼠臟器指數(shù)和脂肪系數(shù)的影響

表2 各組大鼠的臟器指數(shù)、脂肪系數(shù)（n＝8）Table2 Indexes of organ and fat of rats in each group (n= 8)

從表2中臟器指數(shù)可以看出，4 組大鼠的心臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和脾臟指數(shù)差異不顯著（P＞0.05），這說(shuō)明L. plantarum WW對(duì)大鼠的心臟、腎臟和脾臟無(wú)毒副作用。從肝臟指數(shù)情況來(lái)看，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組肝臟指數(shù)顯著高于正常對(duì)照組和菌液干預(yù)組（P＜0.05），而且菌液干預(yù)組的肝臟指數(shù)略低于正常對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），這說(shuō)明高脂飲食引起了脂肪在肝臟的堆積，而L. plantarum WW能夠有效地降低脂肪在肝臟的堆積，進(jìn)而緩解肝臟的損傷。從脂肪系數(shù)來(lái)看，相對(duì)于正常對(duì)照組，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組大鼠的腹部脂肪系數(shù)、腎周脂肪系數(shù)和附睪脂肪系數(shù)顯著升高（P＜0.05），而灌胃L. plantarum WW菌懸液后，腹部脂肪系數(shù)、腎周脂肪系數(shù)和附睪脂肪系數(shù)均顯著降低（P＜0.05），說(shuō)明L. plantarum WW能夠有效降低高脂大鼠體內(nèi)的脂肪量。

2.3 L. plantarum WW對(duì)大鼠肝臟組織病理形態(tài)學(xué)的影響

通過(guò)對(duì)各組大鼠肝臟組織進(jìn)行HE染色來(lái)進(jìn)一步確定L. plantarum WW對(duì)高脂飲食引起的肝臟脂肪堆積的改善作用。

圖1 L. plantarum WW對(duì)大鼠肝臟組織病理形態(tài)學(xué)的影響（×200）Fig.1 Effect of L. plantarum WW on pathological morphology of liver tissue (× 200)

由圖1可見(jiàn)，根據(jù)組織切片觀察，正常飲食大鼠肝細(xì)胞呈索狀排列，細(xì)胞質(zhì)呈紅色，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央。然而，在高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組大鼠的肝臟中觀察到胞漿中有明顯的空泡形成和增加的脂質(zhì)沉積，其特征為圓形細(xì)胞，邊緣核和脂肪空泡化。灌胃L. plantarum WW后減輕了大鼠肝組織中的脂質(zhì)沉積和空泡化的程度，與正常飲食的大鼠肝臟類(lèi)似，但未恢復(fù)到正常水平。因此進(jìn)一步說(shuō)明L. plantarum WW能夠有效減少脂肪在肝臟的堆積，緩解高脂飲食引起的肝臟損傷。

2.4 L. plantarum WW對(duì)大鼠血清血脂水平的影響

表3 L. plantarum WW對(duì)大鼠血清血脂水平的影響（n＝8）Table3 Effect of L. plantarum WW on serum lipid levels in rats (n= 8)

從表3中可以看出，高脂飲食大鼠血清中的TC、TG、LDL-C濃度顯著高于正常對(duì)照組（P＜0.05），說(shuō)明高脂模型造模成功。與高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組相比，菌液干預(yù)組血清中TC、TG、LDL-C的濃度顯著降低（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組分別降低了28.92%、22.47%和28.99%，相對(duì)于脫脂乳對(duì)照組分別降低了26.73%、21.29%和26.87%，這說(shuō)明L. plantarum WW能夠有效降低高脂飲食大鼠的血清血脂水平。HDL-C主要功能是轉(zhuǎn)運(yùn)磷脂和膽固醇，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白，能促進(jìn)外周組織中膽固醇的消除，防止冠心病的發(fā)生[25]。從表3可以看出，菌液干預(yù)組血清中HDL-C的濃度顯著高于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組（P＜0.05），說(shuō)明L. plantarum WW能夠幫助降低患動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。

2.5 L. plantarum WW對(duì)大鼠血清MDA和TBA濃度的影響

圖2 L. plantarum WW對(duì)大鼠血清MDA（A）和TBA（B）濃度的影響Fig.2 Effect of L. plantarum WW on MDA (A) and TBA (B) contents in serum

MDA是不飽和脂肪酸過(guò)氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，血清MDA水平被認(rèn)為是由膽固醇引起的氧化應(yīng)激的表達(dá)，通過(guò)測(cè)定血清中MDA濃度來(lái)判斷脂質(zhì)過(guò)氧化的程度和氧自由基的含量，氧自由基含量高會(huì)增加心血管疾病的發(fā)生幾率[26-27]。從圖2A可以看出，與正常對(duì)照組相比，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組血清中MDA的濃度顯著升高（P＜0.05），灌胃L. plantarum WW后血清中MDA濃度顯著降低（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組分別降低了32.21%和37.83%，說(shuō)明L. plantarum WW可以通過(guò)降低MDA濃度來(lái)緩解脂質(zhì)過(guò)氧化程度。

TBA是膽固醇在肝臟分解代謝的最終產(chǎn)物，與膽固醇的吸收、代謝及調(diào)節(jié)有著密切的關(guān)系，血清TBA水平變化可敏感地反映肝臟功能[28]。從圖2B可以看出，與正常對(duì)照組相比，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組血清中TBA的濃度顯著升高（P＜0.05），灌胃L. plantarum WW后血清中TBA濃度顯著降低（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組分別降低了22.67%和21.72%，接近于正常水平。說(shuō)明L. plantarum WW能夠有效降低高脂飲食引起的血清TBA濃度升高，從而減少肝臟實(shí)質(zhì)性損傷。

2.6 L. plantarum WW對(duì)大鼠肝臟血脂各指標(biāo)水平的影響

由表4可知，與正常對(duì)照組相比，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組肝臟TC、TG、LDL-C含量顯著升高（P＜0.05），而在灌胃L. plantarum WW后，肝臟TC、TG、LDL-C水平顯著降低（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組分別降低了31.32%、26.09%和16.36%，相對(duì)于脫脂乳對(duì)照組分別降低了23.31%、28.42%和20.69%，其中TC水平接近于正常值。從HDL-C水平來(lái)看，菌液干預(yù)組、高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組顯著低于正常對(duì)照組（P＜0.05），菌液干預(yù)組大鼠肝臟HDL-C含量高于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。以上結(jié)果表明L. plantarum WW能夠有效降低高脂飲食引起肝臟中血脂水平的升高，進(jìn)而對(duì)肝臟起到一定的保護(hù)作用。

表4 L. plantarum WW對(duì)大鼠肝臟血脂水平的影響（n＝8）Table4 Effect of L. plantarum WW on lipid levels in liver of rats (n= 8)

2.7 L. plantarum WW對(duì)大鼠血清和肝臟ALT和AST活力的影響

圖3 L. plantarum WW對(duì)血清和肝臟ALT和AST活力的影響Fig.3 Effect of L. plantarum WW on ALT and AST activity in serum and liver

轉(zhuǎn)氨酶是催化氨基酸和酮酸之間氨基轉(zhuǎn)移的一類(lèi)酶，其中ALT和AST是評(píng)價(jià)肝功能的重要指標(biāo)，當(dāng)肝臟組織受到損傷時(shí)，由于細(xì)胞膜通透性增加，肝細(xì)胞漿內(nèi)的ALT和AST釋放到血液中，導(dǎo)致肝臟和血清中兩者水平有所升高[29-30]。從圖3中可以看出，高脂模型組與脫脂乳對(duì)照組血清和肝臟中ALT和AST活力顯著高于正常對(duì)照組（P＜0.05），菌液干預(yù)組血清和肝臟中ALT和AST活力顯著低于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組，血清中ALT和AST活力分別降低了28.65%和29.32%，肝臟中ALT和AST活力分別降低了26.62%和22.89%。結(jié)果表明L. plantarum WW能夠通過(guò)有效降低高脂飲食引起的血清和肝臟中ALT和AST活力的升高來(lái)緩解肝損傷。

2.8 L. plantarum WW對(duì)大鼠糞便TC、TG和TBA含量的影響

表5 L. plantarum WW對(duì)大鼠糞便中TC、TG和TBA含量的影響（n＝8）Table5 Effect of L. plantarum WW on TC, TG and TBA levels in feces of rats (n= 8)

由表5可知，與正常對(duì)照組相比，高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組糞便中TC、TG含量顯著升高（P＜0.05），這說(shuō)明高脂飲食中含量過(guò)高的膽固醇無(wú)法在體內(nèi)被消化吸收，隨糞便排出了體外。菌液干預(yù)組糞便中TC、TG含量相對(duì)高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組顯著升高（P＜0.05），分別比高脂模型組高17.02%和21.53%，說(shuō)明L. plantarum WW能夠促進(jìn)大鼠體內(nèi)膽固醇隨糞便的排出。

TBA與膽固醇的吸收、代謝和調(diào)節(jié)有著密切的關(guān)系，促進(jìn)膽汁酸在腸道的排泄是降低體內(nèi)膽固醇代謝的主要途徑[31]。從表5中可以看出，高脂飲食大鼠糞便中TBA含量顯著高于正常對(duì)照組大鼠（P＜0.05），灌胃L. plantarum WW后糞便中TBA含量顯著升高，與高脂模型組相比升高了27.00%，說(shuō)明L. plantarum WW能有效促進(jìn)大鼠體內(nèi)TBA的排泄，從而降低血清中膽固醇的含量，減少心血管疾病的發(fā)生。

3 討 論

高脂血癥通常表現(xiàn)為血清TC、TG和LDL-C水平的升高，伴隨著HDL-C水平降低，與心血管疾病密切相關(guān)[32]。眾所周知，高脂飲食可增加血液中的TC、TG和LDL-C水平，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的風(fēng)險(xiǎn)增加，而高水平的HDL-C可降低心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。此外，LDL-C被認(rèn)為是血清脂質(zhì)中最危險(xiǎn)的因素，這是由于氧化型LDL-C向動(dòng)脈壁滲透的增加導(dǎo)致了動(dòng)脈粥樣硬化斑塊病變[33-34]。本研究通過(guò)飼喂高脂飲食來(lái)建立大鼠高脂模型，5 周齡SD大鼠飼喂高脂飼料12 周后，血清中TC、TG、LDL-C水平顯著升高（P＜0.05），HDL-C含量顯著降低（P＜0.05），表明高脂模型建立成功。L. plantarum WW灌胃12 周后顯著降低了血清中TC、TG、LDL-C濃度（P＜0.05），并且提高了HDL-C濃度（P＜0.05），與高脂模型組相比血清TC、TG、LDL-C濃度分別降低了28.92%、22.47%和28.99%。丁盼盼等[35]研究發(fā)現(xiàn)高脂小鼠灌胃L. plantarum L-3 30 d后血清中TC、TG含量分別降低了31.3%和20.44%；在Bao Yan等[34]的研究中，以大鼠為模型，將L. plantarum P-8實(shí)驗(yàn)菌株灌胃大鼠4 周后發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于高脂模型組，菌液組大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量分別降低了53.83%、47.68%和39.91%；而在Nguyen等[21]的研究中發(fā)現(xiàn)給小鼠模型灌胃L. plantarum PH04 14 d后，小鼠血清中TC、TG水平分別只降低了7%和10%。本研究與已報(bào)道研究結(jié)果相似但存在一定差異，主要可能與菌株類(lèi)型、飼養(yǎng)時(shí)間、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、菌液灌胃量等相關(guān)。

炎癥標(biāo)志物濃度升高、肝臟中脂肪的積累和血清脂質(zhì)水平的升高，可能導(dǎo)致胰島素抵抗、血脂異常和心血管疾病，此外，肝臟中過(guò)量的脂肪堆積可能導(dǎo)致肝臟氧化應(yīng)激和肝臟損傷[36]。從本研究中肝臟指數(shù)可以看出，菌液干預(yù)組顯著低于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組（P＜0.05）；從肝臟組織病理形態(tài)學(xué)分析來(lái)看，灌胃L. plantarum WW后減輕了其肝組織中的脂質(zhì)沉積和空泡化的程度，這與Li Chuan等[24]的研究結(jié)果類(lèi)似。從肝臟血脂水平來(lái)看，在灌胃L. plantarum WW后，肝臟TC、TG、LDL-C水平顯著降低（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組分別降低了31.32%、26.09%和16.36%，TC水平接近于正常值，該結(jié)果與Huang Ying等[37]的研究結(jié)果類(lèi)似但也存在一定的差異。此外，菌液干預(yù)組血清和肝臟中ALT和AST的含量顯著低于高脂模型組和脫脂乳對(duì)照組（P＜0.05），相對(duì)于高脂模型組，血清中ALT和AST活力分別降低了28.65%和29.32%，肝臟中ALT和AST活力分別降低了26.62%和22.89%。以上結(jié)果表明L. plantarum WW能夠有效降低高脂飲食引起肝臟中血脂水平的升高，進(jìn)而對(duì)肝臟起到一定的保護(hù)作用。

另一個(gè)值得注意的現(xiàn)象是灌胃L. plantarum WW后糞便中TC、TG和TBA含量顯著升高（P＜0.05），與高脂模型組相比分別升高了17.02%、21.53%、27.00%，說(shuō)明L. plantarum WW能有效增加大鼠體內(nèi)TC、TG、TBA的排泄，從而降低血清中膽固醇的含量，減少心血管疾病的發(fā)生。

4 結(jié) 論

L. Plantarum WW能夠抑制高脂飲食引起的體質(zhì)量增加，降低脂肪在肝臟、腹部、腎周和附睪部位的堆積，顯著降低肝臟和血清血脂水平以及ALT和AST水平，增加HDL-C含量，并且能夠顯著降低血清中MDA和TBA水平，增加糞便中TC、TG和TBA含量。以上結(jié)果表明L. Plantarum WW能夠有效降低高脂飲食引起的體內(nèi)血脂水平的升高以及脂肪在肝臟和體內(nèi)的堆積，進(jìn)一步有助于降低動(dòng)脈粥樣硬化等心血管疾病的患病率，并且對(duì)肝臟有一定的保護(hù)作用，為進(jìn)一步深入研究和開(kāi)發(fā)降膽固醇產(chǎn)品提供了有益菌株和理論依據(jù)，但該菌株降膽固醇具體是一種機(jī)制作用還是多種機(jī)制共同作用，還需要進(jìn)一步深入研究驗(yàn)證。