陳秀華，孫趙龍，李 莉，張明婧，汪依妮，張明均，黎 俊

(1.關(guān)嶺布依族苗族自治縣草地畜牧業(yè)發(fā)展中心，貴州 關(guān)嶺 561300；2.貴州省草地技術(shù)試驗(yàn)推廣站，貴陽(yáng)550025；3.貴州農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，貴陽(yáng) 551400； 4.貴州省農(nóng)業(yè)信息中心，貴陽(yáng) 550001)

長(zhǎng)葉車前，為車前科多年生草本植物，野外普遍常見(jiàn)，其全草和種子均可入藥，葉基生呈蓮座狀，葉片橢圓狀披針形，較長(zhǎng)，葉邊緣具淺波狀鋸齒，廣泛分布于全世界，多長(zhǎng)在草地、河灘、草甸[1]。因其適口性好，又可藥食兩用，近年來(lái)國(guó)外種子企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)已將長(zhǎng)葉車前馴化并在人工草地大量栽培種植[2]，在草地家畜生產(chǎn)和疾病防控中具有重要意義，但關(guān)于其種植過(guò)程中與其他牧草混播方面的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)研究長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)典型牧草一年生黑麥草種子萌發(fā)的影響，以初步了解其化感作用，為長(zhǎng)葉車前與一年生黑麥草混作模式提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

長(zhǎng)葉車前來(lái)自新西蘭PGW種業(yè)在貴州獨(dú)山的試驗(yàn)地，品種名Tonic。一年生黑麥草種子由貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)院提供的，品種名牧謠。

1.2 試驗(yàn)方法

將長(zhǎng)葉車前植株用自來(lái)水沖洗干凈，去掉根部，剪成小段，于室內(nèi)通風(fēng)晾干后放置烘箱，60 ℃烘至恒重，剪為1 cm長(zhǎng)的小段，按200 g干物質(zhì)1 kg蒸餾水的比例浸泡提取36 h，期間不定時(shí)攪拌3次，紗布過(guò)濾收集浸提液母液，放4 ℃冰箱內(nèi)冷藏備用。

剔除受損或病蟲害種子，精選飽滿度一致、大小均勻、種皮完整的一年生黑麥草種作為受體種子。先清水漂洗，再用1%次氯酸鈉溶液進(jìn)行消毒處理30 min，最后用蒸餾水沖洗數(shù)遍。選用直徑10 cm的培養(yǎng)皿，皿底鋪2層濾紙，每個(gè)培養(yǎng)皿放入100粒經(jīng)處理種子，以蒸餾水為對(duì)照，分別加10 mL的各濃度浸提液，每個(gè)處理3次重復(fù)。在光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)觀察，培養(yǎng)條件為溫度25 ℃、相對(duì)濕度80%、光照12 h，每天檢查發(fā)芽及生長(zhǎng)情況，做好記錄，并注意濾紙濕度，及時(shí)補(bǔ)充相應(yīng)濃度的提取液，直至不再有種子萌發(fā)為止[3]。

1.3 項(xiàng)目測(cè)定

于試驗(yàn)第4天計(jì)算發(fā)芽勢(shì)，試驗(yàn)第9天計(jì)算種子的發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)，并在每個(gè)培養(yǎng)皿中隨機(jī)挑出9株黑麥草幼苗分別測(cè)定記錄根長(zhǎng)[4,5]。計(jì)算公式為下：

發(fā)芽率=(n1/N)×100%；

發(fā)芽勢(shì)=(n2/N)×100%；

發(fā)芽指數(shù)=∑Gt/Dt；

活力指數(shù)=GI×S。

上式中：n1為試驗(yàn)第9天的正常發(fā)芽的種子數(shù)，N為供試種子數(shù)，n2為第4天內(nèi)的發(fā)芽數(shù)，Gt為在不同時(shí)間發(fā)芽的種子數(shù)，Dt為相應(yīng)發(fā)芽時(shí)間，GI為發(fā)芽指數(shù)，S為種子根長(zhǎng)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)采用Microsoft Excel 2013軟件和SPASS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，使用Origin 9.1軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草種子發(fā)芽特性的影響

由圖1可知，高濃度的長(zhǎng)葉車前浸提液會(huì)顯著影響一年生黑麥草種子的發(fā)芽率。對(duì)照組在第2～4 d種子發(fā)芽數(shù)快速增加，第5天、第6天發(fā)芽數(shù)量增長(zhǎng)緩慢，第7天以后不再有種子發(fā)芽。0.1%浸提液處理過(guò)的種子發(fā)芽數(shù)，在第2～4 d呈線性上升，7 d后持平。0.5%、1%質(zhì)量濃度處理過(guò)的種子均在第3天才開(kāi)始發(fā)芽，發(fā)芽時(shí)間主要集中在第4天和第5天，發(fā)芽時(shí)間明顯推后，且持平后發(fā)芽率與對(duì)照組無(wú)異。5%高濃度的浸提液組，發(fā)芽時(shí)間顯著延遲，發(fā)芽率大幅下降，僅為68.33%。因此可得，低濃度的長(zhǎng)葉車前浸提液可能會(huì)延遲一年生黑麥草種子的發(fā)芽時(shí)間，但并不影響種子的發(fā)芽數(shù)量；高濃度的浸提液則抑制一年生黑麥草種子的正常發(fā)芽。

隨著長(zhǎng)葉車前浸提液濃度的增加，供試一年生黑麥草種子的發(fā)芽勢(shì)逐漸降低。發(fā)芽勢(shì)反映的是種子發(fā)芽速度和出苗的整齊度，可見(jiàn)0.5%和1%浸提液組發(fā)芽速度明顯減慢，5%濃度的種子發(fā)芽速度最慢，發(fā)芽勢(shì)最弱。

圖1 不同濃度長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草種子發(fā)芽特性的影響

2.2 長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草種子發(fā)芽指數(shù)的影響

圖2可知，一年生黑麥草種子的發(fā)芽指數(shù)變化趨勢(shì)與發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)相似，隨著長(zhǎng)葉車前浸提液質(zhì)量濃度的增高，其發(fā)芽指數(shù)出現(xiàn)極顯著下降趨勢(shì)。其中，對(duì)照組的一年生黑麥草發(fā)芽指數(shù)最高，0.1%浸提液組次之，含量0.5%和1%的浸提液組發(fā)芽指數(shù)無(wú)差異均在24左右，5%浸提液組最低。即各含量的浸提液對(duì)一年生黑麥草均有抑制作用，當(dāng)含量為5%時(shí)種子受到的抑制作用最大，綜合活力最弱。

圖2 不同濃度長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草發(fā)芽指數(shù)的影響

2.3 長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草種子活力指數(shù)的影響

由圖3可知，0.1%、0.5%低含量的長(zhǎng)葉車前浸提液處理對(duì)一年生黑麥草種子活力指數(shù)無(wú)明顯影響，而含量為1%和5%的浸提液處理對(duì)種子活力指數(shù)有不同程度的抑制作用，活力指數(shù)與對(duì)照組相比呈顯著差異，其中5%浸提液組種子活力極低僅為28.57，整體趨向?yàn)殚L(zhǎng)葉車前浸提液質(zhì)量濃度越大抑制作用越強(qiáng)。

圖3 不同濃度長(zhǎng)葉車前浸提液對(duì)一年生黑麥草種子活力指數(shù)的影響

3 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，不同含量的長(zhǎng)葉車前浸提液處理對(duì)一年生黑麥草種子發(fā)芽有不同影響。0.1%浸提液對(duì)一年生黑麥草種子發(fā)芽影響不明顯；0.5%、1%浸提液可延遲一年生黑麥草種子的發(fā)芽時(shí)間，降低發(fā)芽勢(shì)，但種子最終發(fā)芽數(shù)、發(fā)芽率不受抑制；5%浸提液對(duì)一年生黑麥草種子的正常發(fā)芽抑制顯著，種子發(fā)芽各指標(biāo)降低突出。

目前關(guān)于長(zhǎng)葉車前的研究多偏重于藥理或藥物的研發(fā)，對(duì)長(zhǎng)葉車前與其他植物間的化感作用報(bào)道很少。本試驗(yàn)結(jié)果得出，長(zhǎng)葉車前浸提液明顯表現(xiàn)出濃度效應(yīng)，總體呈現(xiàn)為低濃度含量只延滯一年生黑麥草種子發(fā)芽時(shí)間，高濃度含量抑制一年生黑麥草種子萌發(fā)，這與多數(shù)供體植物對(duì)受體植物表現(xiàn)的“低濃度無(wú)明顯影響，高濃度明顯抑制”作用相一致[6-8]。因此，種植長(zhǎng)葉車前混播草地時(shí)可適量與一年生黑麥草套種、混播或輪作，而有關(guān)長(zhǎng)葉車前水浸提液中的化感物質(zhì)及其作用機(jī)制還須進(jìn)一步研究。