丁小娟 李俊 楊忠生

（四川省蘇稽蠶種場，四川 樂山 614013）

三眠蠶品種具有發(fā)育經(jīng)過短、纖度細(xì)、纖度均方差小、凈度優(yōu)等特點(diǎn)，但在大面積生產(chǎn)上，由于受環(huán)境因素的影響，往往會出現(xiàn)三眠眠性不穩(wěn)定的情況，特別在秋季，三眠蠶品種更容易引發(fā)四眠蠶。

控制三眠蠶眠性的基因類型有:顯性三眠蠶（M3）和隱性三眠蠶(rt)，其中顯性三眠蠶基因又分為強(qiáng)顯性三眠基因和弱顯性三眠基因。諸星（1939）認(rèn)為，當(dāng)M3為強(qiáng)顯性三眠蠶基因時，其遺傳遵循顯性基因的典型遺傳規(guī)律，其遺傳屬性關(guān)系為：M3M4M5；下平（1947）研究發(fā)現(xiàn)，顯性三眠蠶由一個三眠蠶主基因M3和多個修飾基因支配[1]；錢荷英等研究認(rèn)為，三眠蠶的眠性遺傳規(guī)律很復(fù)雜，除受眠性主效基因控制及性染色體上的早熟基因控制外，還在很大程度上受環(huán)境影響，夏蠶期用空調(diào)降溫以及由于葉質(zhì)老化等不良營養(yǎng)因素均不利于三眠蠶的表現(xiàn)和誘發(fā)[2]；張鳳林等認(rèn)為，三眠蠶的眠性遺傳并不是完全顯性，受環(huán)境因素影響很大，在環(huán)境條件發(fā)生改變時，尤其是在溫度低、葉質(zhì)差、飼料含水率低時，三眠率顯著下降[3]；岳宣等發(fā)現(xiàn)，三眠蠶品種春季三眠率高，夏秋季受葉質(zhì)的影響三眠率下降[4]。

本試驗通過對同質(zhì)型三眠蠶雜交種和異質(zhì)型三眠蠶雜交種用不同老嫩葉質(zhì)的桑葉進(jìn)行飼養(yǎng)，探索研究桑葉葉質(zhì)老嫩對三眠蠶基因表現(xiàn)的影響。

1 試驗材料與方法

1.1 供試蠶品種

以我單位保育的中系強(qiáng)顯性三眠蠶品種（編號為：中3）、日系強(qiáng)顯性三眠蠶品種（編號為：日3）及中系四眠蠶品種（編為：中4）分別組配：

三眠蠶基因異質(zhì)型雜交種：中4×日3、日3×中4

三眠蠶基因同質(zhì)型雜交種：中3×日3、日3×中3

共四個雜交組合，供試驗用。

1.2 試驗時間和地點(diǎn)

2019年春季，四川省蘇稽蠶種場。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗設(shè)置：按照中4×日3（正交）、日3×中4（反交）、中3×日3（正交）、日3×中3（反交）四個雜交組合及偏老、適齡、偏嫩三個桑葉組合等因素，共設(shè)置12個試驗組，根據(jù)通常習(xí)慣，將“中×日”稱為正交，“日×中”稱為反交（下文同）；3齡數(shù)蠶時，每個試驗組設(shè)三個重復(fù)區(qū)，每區(qū)400頭蠶，具體方法見表1。

表1 試驗設(shè)置

1.3.2 催青收蟻。采用戊3胚子前22℃，戊3胚子后25.5℃的兩段簡易催青法催青，每個試驗組稱取蟻蠶1g混收1區(qū)。

1.3.3 用桑方法。偏老桑葉組各齡用下一個齡期的桑葉飼喂，1齡蠶用2齡葉飼養(yǎng)、2齡蠶用3齡葉飼養(yǎng)、3齡蠶用4齡葉飼養(yǎng)；適齡桑葉組各齡用適齡桑葉飼養(yǎng)；偏嫩桑葉組各齡用上一個齡期的桑葉飼喂，即1齡蠶用收蟻葉飼養(yǎng)、2齡蠶用1齡葉飼養(yǎng)、3齡蠶用2齡葉飼養(yǎng)。此方法用桑從收蟻開始，一直到三眠，眠性調(diào)查結(jié)束為止。

1.3.4 分區(qū)數(shù)蠶。3齡36h后數(shù)蠶，每個試驗組三區(qū)重復(fù)，每區(qū)數(shù)400頭蠶。

1.3.5 眠性調(diào)查。三眠就眠后，對所有試驗區(qū)逐區(qū)調(diào)查三眠蠶和四眠蠶頭數(shù)，計算三眠率。

2 試驗結(jié)果與分析

2.1 試驗結(jié)果：各試驗組三眠蠶發(fā)生情況見表2。

2.2 結(jié)果分析

用Excel中的TTEST函數(shù)對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行組間差異性分析，百分?jǐn)?shù)用“DEGREES(ASIN（SQRT））”公式進(jìn)行反正弦轉(zhuǎn)化，分析結(jié)果如下：

表2 三眠率發(fā)生試驗結(jié)果

2.2.1 三眠基因同質(zhì)型與異質(zhì)型間差異

三眠基因同質(zhì)型與異質(zhì)型三眠率差異性分析結(jié)果見表3。

表3 三眠基因同質(zhì)型與異質(zhì)型三眠率差異性分析表

分析結(jié)果表明：在葉質(zhì)偏老的情況下，無論正反交，同質(zhì)型組合的三眠率都顯著高于異質(zhì)型組合。在葉質(zhì)適齡的情況下，正交同質(zhì)型組合的三眠率極顯著高于異質(zhì)型組合，反交同質(zhì)型組合與異質(zhì)型無顯著差異，無論正反交，三眠率都高于95%，達(dá)到生產(chǎn)實用水平。在葉質(zhì)偏嫩的情況下，無論正反交，同質(zhì)型組合與異質(zhì)型組合的三眠率無顯著差異。

2.2.2 正反交差異正反交三眠率差異性分析結(jié)果見表4。

表4 正反交三眠率差異性分析表

分析結(jié)果表明：在葉質(zhì)偏老的情況下，無論同質(zhì)型組合或異質(zhì)型組合，正交（中×日）的三眠率都顯著高于反交（日×中）；在葉質(zhì)適齡的情況下，同質(zhì)型組合的正交三眠率顯著高于反交，異質(zhì)型正交與反交的三眠率無顯著差異；在葉質(zhì)偏嫩的情況下，無論同質(zhì)型組合或異質(zhì)型組合，正反交的三眠率無顯著差異。

2.2.3 桑葉老嫩差異

飼喂老桑葉與飼喂嫩桑葉的三眠率差異性分析結(jié)果見表5。

表5 葉質(zhì)老嫩三眠率差異性分析表

分析結(jié)果表明：三眠蠶為異質(zhì)型基因時，無論正反交，飼喂嫩桑葉三眠率都極顯著高于飼喂老桑葉；三眠蠶為同質(zhì)型基因時，無論正反交，飼喂嫩桑葉和飼喂老桑葉三眠率無顯著差異。

3 結(jié)論

3.1 基因型差異

三眠蠶雜交種是“三眠×四眠”的異質(zhì)基因型時，桑葉老嫩對三眠表現(xiàn)穩(wěn)定性有極顯著影響，容易誘發(fā)四眠蠶；三眠蠶雜交種是“三眠×三眠”的同質(zhì)基因型時，桑葉老嫩對三眠表現(xiàn)穩(wěn)定性沒有顯著影響。在選育三眠蠶品種時，應(yīng)采用“三眠×三眠”的雜交組合方式，以減小環(huán)境因素對三眠穩(wěn)定性的影響。

3.2 葉質(zhì)影響

在葉質(zhì)偏老的情況下，無論同質(zhì)型組合或異質(zhì)型組合，正交（中×日）的三眠率都顯著高于反交（日×中），說明以日系為母本的雜交種三眠穩(wěn)定性更易受環(huán)境影響，尤其是日3×中4組合，三眠率只有61%，遠(yuǎn)低于實用水平三眠率95%的標(biāo)準(zhǔn)。在生產(chǎn)中，三眠蠶品種用偏嫩桑葉進(jìn)行小蠶共育，可有效防止四眠蠶發(fā)生。

3.3 影響三眠穩(wěn)定性的因素

雜交種三眠蠶基因型、桑葉老嫩和雜交方式都影響三眠穩(wěn)定性，“三眠×四眠”異質(zhì)基因型、飼喂老桑葉、日三眠×中四眠等三因素共存時，對三眠穩(wěn)定性的影響最大。

4 討論

中4×日3和日3×中4在飼喂偏老桑葉的情況下，三眠率差異非常大，是否與性染色體上的早熟基因有關(guān)。假設(shè)三眠蠶的表現(xiàn)是受顯性三眠蠶主效基因和Z染色體上的早熟基因共同控制，那么中4×日3的基因型雌用ZA/W、M3/M4表示，雄用ZA/Za、M3/M4表示，日3×中4的基因型雌用Za/W、M3/M4表示，雄用ZA/Za、M3/M4表示，而四眠蠶以雌為主（有待證實），就能比較合理的解釋正反交三眠率差異現(xiàn)象。如果這個假設(shè)和基因型成立，那么在三眠蠶品種選育過程中，要將控制三眠蠶的基因?qū)胨拿咂贩N，須以三眠材料為父本進(jìn)行雜交，并以各雜交代的雄進(jìn)行輪回交配。