瞿曉林 李瑩姍 吳皓玄 曾 豪 李宗英 龔政華

湖南中醫(yī)藥高等專科學(xué)校，湖南省株洲市 412012

冠狀動(dòng)脈缺血引起的缺血性心臟病，是心血管系統(tǒng)疾病的主要死亡原因。隨著人口老齡化和生活方式的改變，缺血性心臟病的發(fā)病率不斷上升，是心血管疾病死亡的重要原因，是嚴(yán)重危害人民健康的常見(jiàn)病，也是中國(guó)成年人心臟病住院和死亡的第1位原因，其發(fā)病率和死亡率依然呈上升趨勢(shì)[1]。

在臨床上，治療缺血性心臟病的方法有藥物治療、手術(shù)治療、針灸治療等。周瑋等[2]通過(guò)針刺膻中、膈俞、心俞、內(nèi)關(guān)等穴觀察針刺對(duì)冠心病、心絞痛的臨床療效，結(jié)果發(fā)現(xiàn)針刺膻中等穴位對(duì)治療冠心病心絞痛有較好的臨床療效。內(nèi)關(guān)穴是八脈交匯穴之一，通于陰維脈，屬于手厥陰心包經(jīng)的絡(luò)穴，與心臟密切相關(guān)。主治心痛、胸悶、心悸、心煩、癲狂等病癥。長(zhǎng)期以來(lái)內(nèi)關(guān)穴一直是治療胸痹的首選穴?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)也證實(shí)內(nèi)關(guān)穴對(duì)心血管系統(tǒng)有特異的生理效應(yīng)和治療作用[3]。膻中穴，心包募穴，八會(huì)穴之氣會(huì)，屬于任脈。在胸部，當(dāng)前正中線上，平第4肋間隙，兩乳頭連線的中點(diǎn)，連于心系，主治咳嗽、氣喘、胸痹、胸痛等?！肚Ы鸱健啡?“胸痹心痛，灸膻中百壯”[4]。

相關(guān)文獻(xiàn)證明膻中穴對(duì)胸痹有一定的防治作用，但使用不同頻率電針刺激內(nèi)關(guān)穴配伍膻中穴對(duì)家兔急性心肌缺血模型影響的研究很少，特別是從生理功能方法的角度觀察的較少。本研究嘗試在實(shí)驗(yàn)性急性心肌缺血的動(dòng)物模型上，采用生理功能的方法，觀察不同頻率電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴對(duì)家兔急性心肌缺血時(shí)心臟功能活動(dòng)的影響，分析其是否對(duì)家兔急性心肌缺血有保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 主要儀器及藥品 BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、PT-100生物血壓傳感器、HX-101E小動(dòng)物呼吸機(jī)(成都泰盟有限公司生產(chǎn))、DS-781SS防水電子秤(上海勤酬實(shí)業(yè)有限公司)、達(dá)佳牌G6805-D六路輸出電針儀(廣州康邁醫(yī)療器械有限公司)，華佗牌無(wú)菌針灸針0.35mm×25mm毫針(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司)，批號(hào)170410。氨基甲酸乙酯(上海展云化工有限公司)批號(hào)171015，0.9%氯化鈉注射液(安徽雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司)批號(hào)171110，肝素鈉注射液(天津生物化學(xué)制藥有限公司)批號(hào)180301，75%乙醇(山東利爾康醫(yī)療器械有限公司)批號(hào)171210。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組 由湖南株洲種養(yǎng)殖有限公司提供的健康成年新西蘭兔40只，雌兔20只，雄兔20只，體重2.0～2.5kg。將心電圖異常者剔除，心電圖正常者在動(dòng)物飼養(yǎng)房飼養(yǎng)7d后即開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。各組家兔飼養(yǎng)于同等條件下：室內(nèi)溫度(25±1)℃，相對(duì)濕度(55±5)%，自由進(jìn)食、飲水。按照《衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)學(xué)》隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)將家兔分五組，分別是空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、高頻組(100Hz)、中頻組(50Hz)、低頻組(2Hz)，每組8只。

1.3 取穴及針刺方法 空白對(duì)照組和模型對(duì)照組不進(jìn)行電針膻中、內(nèi)關(guān)穴的預(yù)處理，高、中、低頻組每天上午9時(shí)左右分別給予100Hz、50Hz、2Hz電針膻中、內(nèi)關(guān)穴，電壓均為3V，40min/次，共14d。參照華興邦等制定的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物穴位圖譜取穴，內(nèi)關(guān)穴位于兔前肢腹面的尺骨與橈骨之間，距腕關(guān)節(jié)約1.2cm處，膻中穴在兔胸部，前正中線平對(duì)第4肋間隙。將家兔仰臥于手術(shù)臺(tái)上，內(nèi)關(guān)穴及膻中穴均用消毒后的毫針直刺0.2～0.3cm。將電針儀負(fù)極接內(nèi)關(guān)穴及膻中穴，正極接內(nèi)踝，可見(jiàn)家兔肢體與電針頻率一致的顫動(dòng)。

1.4 測(cè)量左心室收縮壓、左心室舒張末壓及心肌缺血模型制備方法 除空白對(duì)照組外，模型對(duì)照組、低頻組、中頻組及高頻組的家兔均制備心肌缺血模型，其中低頻組、中頻組及高頻組家兔均在最后一次電針2h后制備心肌缺血模型，模型對(duì)照組同時(shí)間段制備心肌缺血模型。心肌缺血模型制備方法：捉取新西蘭兔，稱重，根據(jù)體重由耳緣靜脈注射30%氨基甲酸乙酯溶液3ml/kg麻醉并仰臥位固定為手術(shù)臺(tái)上。將BL-420F系統(tǒng)中的心電圖白色電極線插入兔右上肢皮下，紅色電極線插入左下肢皮下，黑色電極線插入右下肢皮下，記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖。氣管及左心室插管，切開(kāi)家兔頸部正中皮膚、筋膜、肌肉層做一4cm左右切口，分離一側(cè)頸總動(dòng)脈和氣管，氣管切開(kāi)并插管，插管末端連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，呼吸比為5∶4。頸總動(dòng)脈插管內(nèi)注滿肝素鈉溶液，外涂抹石蠟油以潤(rùn)滑插管，通過(guò)頸動(dòng)脈緩緩插入左心室，邊插邊觀察血壓曲線，曲線突然變寬變大，且最小值接近0mmHg(1mmHg=0.133kPa)時(shí)說(shuō)明導(dǎo)管進(jìn)入左心室。心肌缺血模型制備，在家兔胸部左側(cè)第3肋間隙開(kāi)胸,剪開(kāi)心包膜，找到冠狀動(dòng)脈的左心室支，下方穿一零號(hào)手術(shù)絲線并扎結(jié),阻斷冠狀動(dòng)脈血液，造成相應(yīng)心肌組織缺血，以心電圖T波高聳及ST段移位為模型復(fù)制成功。

1.5 觀察指標(biāo) 觀察不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)家兔急性心肌缺血時(shí)心率、左心室收縮壓、左心室舒張末壓在10s、1min、5min、10min、30min時(shí)間段的變化，并比較組間差異。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所得數(shù)據(jù)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組間均數(shù)比較用單因素方差分析,組間均數(shù)的兩兩比較用LSD法,P<0.05時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)急性心肌缺血家兔心率的影響 制備心肌缺血病理模型后，各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時(shí)間段心率的變化，其中模型對(duì)照組家兔心率均下降，說(shuō)明心臟功能受損，低頻電針組與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示低頻電針預(yù)處理對(duì)心率無(wú)顯著改善作用。中頻、高頻電針組與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示中頻、高頻電針預(yù)處理對(duì)心率有顯著改善作用。見(jiàn)表1。

表1不同頻率電針“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)家兔急性心肌缺血心率的影響次/min)

注：*與正常組比較，P<0.05；△與模型組比較,P<0.05。

2.2 不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)急性心肌缺血家兔左心室收縮壓的影響 制備心肌缺血病理模型后，各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時(shí)間段左心室收縮壓的變化，其中模型對(duì)照組家兔左心室收縮壓均下降，說(shuō)明心臟收縮功能受損，低頻電針組與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示低頻電針預(yù)處理對(duì)左心室收縮壓無(wú)顯著改善作用。中頻、高頻電針組與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示中頻、高頻電針預(yù)處理對(duì)左心室收縮壓有顯著改善作用。見(jiàn)表2。

表2不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)家兔急性心肌缺血左心室收縮壓的影響

注：*與正常組比較，P<0.05；△與模型組比較，P<0.05。

2.3 不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)急性心肌缺血家兔左心室舒張末壓的影響 制備心肌缺血病理模型后，各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時(shí)間段左心室舒張末壓的變化，其中模型對(duì)照組家兔左心室舒張末壓均升高，說(shuō)明心臟舒張功能受損，低頻、中頻組與模型組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示低頻、中頻電針預(yù)處理對(duì)左心室舒張末壓無(wú)顯著改善作用。高頻電針組與模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示高頻電針預(yù)處理對(duì)左心室舒張末壓有顯著改善作用。見(jiàn)表3。

表3不同頻率電針預(yù)處理“膻中”“內(nèi)關(guān)”穴對(duì)急性心肌缺血家兔左心室舒張末壓的影響

注：*與正常組比較，P<0.05；△與模型組比較，P<0.05。

3 討論

冠心病是中老年常見(jiàn)病、多發(fā)病之一,隨著年齡增加、生活方式的改變等,發(fā)病率越來(lái)越高,嚴(yán)重危害著人民的健康。冠狀動(dòng)脈疾病如動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈痙攣等導(dǎo)致冠狀脈供給心臟血液減少或中斷，使其相應(yīng)血管所支配部位的心肌缺血、壞死，進(jìn)而使心臟功能下降、主要使血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生變化，如心率減慢、左心室收縮壓降低、左心室舒張末壓上升，這些都提示心臟收縮射血功能的下降。近年來(lái),采用針灸等非藥物療法治療本病取得較好的效果,針刺心包經(jīng)內(nèi)關(guān)穴區(qū)等,可明顯改善缺血心臟的電活動(dòng)和機(jī)械活動(dòng)[5]。孫世曉等[6]研究表明電針內(nèi)關(guān)穴可以改善PPI誘導(dǎo)家兔心臟泵血功能。本實(shí)驗(yàn)在家兔急性心肌缺血的模型上，觀察不同頻率電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴對(duì)家兔心功能活動(dòng)的影響，即心率、左心室收縮壓及左心室舒張末壓的變化，觀察不同頻率電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴對(duì)其是否有保護(hù)作用。研究結(jié)果表明，不同頻率電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴對(duì)家兔急性心肌缺血時(shí)心臟功能活動(dòng)的影響有改善作用。其中高頻電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴能改善心臟收縮和舒張功能狀態(tài)，中頻電針預(yù)處理對(duì)心臟收縮功能有改善作用，對(duì)心臟舒張功能改善作用不明顯，低頻電針預(yù)處理對(duì)心臟收縮、舒張功能影響均不明顯。因此，中頻、高頻電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴對(duì)家兔急性心肌缺血時(shí)心臟功能活動(dòng)有改善作用，尤以高頻電針預(yù)處理改善作用更顯著。這也與臨床針灸在預(yù)防和治療急性心肌缺血的研究中得到了肯定[7]的臨床結(jié)果一致，為電針預(yù)處理膻中、內(nèi)關(guān)穴防治冠心病心絞痛提供更為豐富的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，并為進(jìn)一步的研究奠定基礎(chǔ)。