寇永鴻

【摘要】選擇結核病患者、非結核性呼吸道疾病患者和健康體檢者作為研究對象，分為3個實驗小組，分別采用酶標法和金標法這兩種方法檢測結核抗體，對其陽性率和特異性進行對比。結果顯示，在本中心實際所用試劑的條件下，經過實驗比較，在結核病診斷中，金標法的標記物較為穩(wěn)定，存放條件較為便利，操作簡便迅速，結果可靠。

【關鍵詞】酶標法;金標法;結核病;體液抗體;細胞免疫

【中圖分類號】R446

【文獻標識碼】B

【文章編號】2095-6851（2019）04-230-01

為了比較酶標法和金標法兩種免疫學方法在結核病診斷中的效果差異，本研究選擇結核病患者、非結核性呼吸道疾病患者和健康體檢者作為研究對象，分為3個實驗小組，分別采用這兩種方法檢測結核抗體，對其陽性率和特異性進行對比。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年5月至2018年5月本中心診治的結核病患者80例作為研究對象，設為a組;選擇同期非結核性呼吸道疾病患者80例作為疾病對照，設為b組;選擇健康體檢人員80例作為對照，設為c組。a組包括男性45例，女35例，年齡18-82歲，平均年齡（55. 83士4. 26）歲，其中肺結核疾病48例，結核性胸膜炎疾病16例，結核性腦膜炎疾病16例。b組包括男42例，女38例，年齡19-83歲，平均年齡（56. 34士3.87）歲，其中肺炎疾病47例，急慢性支氣管炎及哮喘疾病15例，肺心病16例，原發(fā)性肺癌2例。c組包括男46例，女34例，年齡20一81歲，平均年齡（56. 12士4.08）歲。a、b、c三組研究對象在基礎資料方面，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 對3組研究對象分別采集血樣，然后采用金標法和酶標法對血清中的結核抗體實施檢測。采用金標法對樣本實施檢測時，在同樣的室溫和時間下，由至少2位檢驗人員通過肉眼對實驗結果進行認真觀察，盡量避免主觀因素對檢驗結果的影響;采用酶標法實施檢測時，實施37℃水浴有效孵育，嚴格按照規(guī)范操作，采用酶聯(lián)免疫分析儀進行吸光度分析。

1.3 統(tǒng)計學處理 均采用統(tǒng)計學軟件SPSS17. 0完成，檢測陽性率比較采用x2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

檢測后發(fā)現(xiàn)，a組肺結核患者，采用金標法測得的陽性率為75.58%;采用酶標法測定的陽性率為80.46%;對于b組非結核性呼吸道疾病患者，采用金標法測得的陽性率為2. 6%，采用酶標法測定的陽性率為7.04 %;對于c組健康人員，采用金標法測得結果全部表現(xiàn)為陰性，采用酶標法測定的陽性率為3.87%。

3 討論

體液的免疫學診斷即血清學診斷，通過測定血中的結核抗體，結合其他指標來佐證是否患有結核。酶聯(lián)法及金標法檢測結核抗體均屬于血清學診斷的范疇。酶聯(lián)法的檢測原理是抗原或抗體吸附于固相載體，加入被檢物和酶結合物反應后，通過酶催化底物顯色來檢測抗體或抗原。其操作步驟比金標法繁瑣，影響因素較多，標本未離心完全、標本被污染等因素可引起假陽性，應盡量避免;同時有些患者（肝硬化、自身免疫性疾病等）體內含有非特異性抗體，在反應過程中具有一定的吸附作用，從而引起假陽性。金標法檢測原理是采用現(xiàn)代生物工程技術提純的結核分枝桿菌特異性的外膜蛋白做抗原，點樣于檢測板反應孔中硝酸纖維，若滴入的被檢血清標本中含有抗外膜蛋白抗體，則會與外膜蛋白抗原相結合，這時加入膠體金顆粒，與抗原抗體復合物相結合。膠體金本身即可顯示紅色，不需加入底物，減少了操作誤差，節(jié)省了時間，而且特異度強，敏感度高，但其需肉眼判斷結果，需注意主觀因素的影響，至少需2人認真觀察結果。

本研究在對象的選擇方面，涵蓋了經臨床已確診的結核患者、非結核性呼吸道疾病患者及健康人員，從而使得研究結果的分析比較更有針對性。對于3組研究對象，分別采用酶標法及金標法檢測結核抗體后發(fā)現(xiàn)，a組肺結核患者，金標法測得的陽性率為75.58%;采用酶標法測定的陽性率為80.46%;對于b組非結核性呼吸道疾病患者，采用金標法測得的陽性率為2. 6%，采用酶標法測定的陽性率為7.04 %;對于c組健康人員，采用金標法測得結果全部表現(xiàn)為陰性，采用酶標法測定的陽性率為3.87%。

通過分析發(fā)現(xiàn)，采用酶標法對患者進行檢測，敏感率較金標法略高，但綜合非結核性呼吸道疾病患者及健康人員仍然表現(xiàn)出一定的陽性率的情況。從而表明采用此種方法進行診斷，存在一定的概率出現(xiàn)假陽性的情況，可能與人為操作因素，試劑盒不同抗原包被，某些疾病（如類風濕）患者體內含有非特異性抗體引起反應孔本底升高等因素有關。因此在實施臨床診斷過程中需要給予高度關注。采用金標法的檢測靈敏度略低于酶標法，從而使得特異性相對提高，而且操作簡便，出結果迅速，不須特殊儀器，適合于基層醫(yī)院開展。所以臨床在確定診斷結果過程中，需要對患者的臨床癥狀及臨床體征加以認真觀察，同時結合實驗室檢測結果，綜合其他指標，例如抗酸染色、結核菌涂片鏡檢、結核菌素試驗、胸片檢查等全面分析以求最終有效確診。

綜上所述，臨床采用金標法進行結核抗體的檢測，最終可以獲得較高的特異度及敏感性，作為一種快速免疫學診斷方法，臨床應用價值較為顯著。同酶標法進行比較，金標法的標記物較為穩(wěn)定，存放條件較為便利，操作簡便迅速，無需選擇精密儀器進行配合;同時可以將結果獲得時間顯著縮短，有效減少工作人員勞動強度，最終使臨床獲得可靠診斷依據，為結核病的臨床治療提供準確參考依據，將結核病對患者帶來的危害性有效減少。而采用本中心的酶聯(lián)試劑對患者進行檢測，敏感率相對金標法略高，但存在一定的假陽性率，建議同時結合其他指標例如痰涂片鏡檢、胸片等全面綜合分析。以上研究結果只針對本中心所使用的相關試劑，隨著檢驗試劑質量的不斷提高，臨床可根據不同檢驗目的選擇不同的檢測方法，以期獲得更好的臨床診斷依據。

參考文獻：

[1] 顏京瑞.檢測結核抗體對結核病的臨床診斷價值[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2016，7（2）;113.

[2] 李常教.946例肺結核患者痰直接涂片鏡檢結果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2015（8）;1941-1943.