陳麗萍，肖婷，黃曉華，康麗霞2，吳定昌

(1. 福建省龍巖市第一醫(yī)院/福建醫(yī)科大學(xué)附屬龍巖第一醫(yī)院檢驗科，福建 龍巖 364000；2. 福建醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)與工程學(xué)院，福建 福州 350001)

新生兒遲發(fā)型膿毒癥(late-onset sepsis，LOS)是新生兒期常見感染性疾病，發(fā)病率和病死率高，其發(fā)病率在住院新生兒中占0.61%～14.2%不等，是新生兒死亡常見原因之一[1-2]。目前，因其非特異性臨床特征，血培養(yǎng)的準確性和延遲性問題，以及C-反應(yīng)蛋白(CRP)、降鈣素原(PCT)、白細胞介素-6(IL-6)等單一標志物或聯(lián)合指標診斷準確性的缺乏，使得LOS早期診斷存在一定挑戰(zhàn)[3]。因此，急需尋找敏感、可靠和早期新生兒LOS診斷指標。近年來研究表明可溶性白細胞分化抗原14-亞型(sCD14-ST，即presepsin)在成人、兒童、新生兒敗血癥中是一個可信的診斷和預(yù)防標志物[3-5]，但其在遲發(fā)型膿毒癥中的研究較少。故本研究通過檢測新生兒LOS患兒presepsin水平，探討其與血清PCT、CRP、WBC等指標在新生兒LOS中的相關(guān)性和診斷效能，為臨床遲發(fā)型敗血癥的診斷提供新的參考依據(jù)。

1 對象與方法

1.1研究對象 選取2017年8月—2018年5月入住福建省龍巖市第一醫(yī)院新生兒科LOS癥患兒46例，其中男21例，女25例，平均年齡(15.37±7.44) d，均符合新生兒膿毒癥診斷標準[6]。新生兒遲發(fā)型膿毒癥指出生72 h后發(fā)生的膿毒癥[7]。選取同期36例高膽紅素血癥、無感染性疾病新生兒為對照組，其中男20例，女16例，平均年齡(12.89±10.13) d。

1.2研究方法

1.2.1標本采集與檢測 所有研究對象于清晨空腹抽取5 ml分離膠促凝靜脈血，3500 r/min離心10 min，用于檢測PCT、CRP。另留取2 ml EDTA抗凝靜脈血，用于檢測presepsin和WBC。

1.2.2試劑與儀器 Presepsin采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法于PATHFAST心臟標志物免疫分析儀上測定，而PCT、CRP、WBC分別采用免疫色譜檢測法、免疫散射比濁法和電阻抗光學(xué)法于HR201檢測儀(德國B.R.A.H.M.S勃拉姆斯GmbH公司)、AU2700分析儀(美國貝克曼公司)、XE-5000分析儀(日本希森美康公司)上測定。

1.2.3臨床資料收集整理 記錄患者姓名、性別、年齡、出生體重、病史、孕周、分娩方式等。

2 結(jié)果

2.1臨床基礎(chǔ)資料 LOS患兒與對照組比較，孕周存在顯著差異(P<0.001)，而年齡、性別、出生體重、分娩方式均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，結(jié)果見表1。

2.2兩組間血液presepsin、PCT、CRP、WBC水平比較 LOS組患兒presepsin、PCT、WBC水平均顯著高于對照組(P<0.001)，而兩組間CRP水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表1 LOS組與對照組臨床基礎(chǔ)資料

表2 LOS組與對照組presepsin、PCT、CRP、WBC水平比較

注：presepsin和WBC采用t檢驗；PCT和CRP采用Mann-WhitneyU檢驗

2.3新生兒LOS患兒presepsin與PCT、CRP、WBC相關(guān)性分析 LOS患兒presepsin與PCT、CRP、WBC間均未見相關(guān)性(P>0.05)，見表3。

表3 LOS組presepsin與PCT、CRP、WBC相關(guān)性分析

注：Presepsin與WBC間采用Pearson檢驗，其余采用Spearman檢驗

2.4LOS患兒presepsin、PCT、CRP、WBC的ROC曲線分析 LOS患兒presepsin和PCT的曲線下面積(ROCAUC)分別為0.925和0.986，敏感性分別為78.26%和93.48%，特異性均為97.22%；Presepsin聯(lián)合PCT的ROCAUC最大，為0.989，且敏感性(95.65%)、特異性(100.00%)均明顯高于單獨presepsin或PCT指標，結(jié)果見圖1、表4。

3 討論

近年來，新生兒死亡率下降不明顯，每年近260萬死亡新生兒中，死于膿毒癥的新生兒達13%，使膿毒癥成為除早產(chǎn)、窒息所致新生兒死亡的第三位原因[8]。

圖1 LOS患兒各檢測指標的ROC曲線

新生兒LOS早期缺乏典型的臨床表現(xiàn)，缺乏特異性，病情進展迅速，早期識別及診斷極為困難。目前臨床上常用指標，如PCT、CRP、WBC及血培養(yǎng)等，均存在局限性[8]。Presepsin作為潛在的實驗室診斷標志物之一，在膿毒癥早期診斷中具有重要價值[9]。

大量研究表明，presepsin在成人、兒童、新生兒早發(fā)型膿毒癥中顯著升高，是膿毒癥早期診斷和預(yù)后判斷指標[3-4，10]。Poggi等[11]研究發(fā)現(xiàn)presepsin是診斷新生早產(chǎn)兒LOS的一個準確標志物。本研究通過對46例新生兒遲發(fā)型膿毒癥患兒研究發(fā)現(xiàn)，新生兒LOS組與對照組比較孕周存在顯著差異，可能由于新生兒LOS組早產(chǎn)兒更多。此外，新生兒LOS組presepsin水平較對照組明顯升高，與Topcuoglu等[12]研究結(jié)果一致?？梢?，presepsin在新生兒感染性疾病中變化尤為顯著，提示其在LOS患兒中具有潛在早期診斷價值。

急性時相反應(yīng)蛋白，如CRP和PCT被稱為全身炎性反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome，SIRS)的常見生物標志物。雖研究顯示[13]血清CRP和PCT水平在LOS中顯著上調(diào)，被廣泛用于診斷敗血癥并監(jiān)測新生兒抗生素治療反應(yīng)，但其效用值得懷疑。由于CRP峰值只有在感染刺激后2～3 d才會達到，而其在非感染炎癥事件后也會增加；相反，PCT比CRP更早達到峰值，發(fā)生在感染后10～12 h[14-15]。本研究顯示新生兒LOS組PCT和WBC水平較對照組顯著升高，而兩組間CRP水平則無差異。這可能與CRP升高的延遲性有關(guān)。此外，LOS患兒presepsin水平與PCT、CRP、WBC的相關(guān)性研究顯示：presepsin與PCT、CRP、WBC均未見相關(guān)性。這與Xiao等[4]研究顯示sCD14-ST(即presepsin)作為一種急性時相蛋白與CRP存在顯著正相關(guān)結(jié)果不一致。

最近研究顯示presepsin是早產(chǎn)兒遲發(fā)型敗血癥早期診斷和療效監(jiān)測的可靠指標[11-12]。且PCT在極低體重出生兒遲發(fā)型敗血癥中的診斷效能優(yōu)于CRP和WBC[16]。本研究通過建立ROC曲線分析presepsin、PCT、CRP和WBC對新生兒遲發(fā)型膿毒癥的診斷價值，結(jié)果顯示presepsin診斷臨界值為282.00 pg/ml時，其曲線下面積(ROCAUC)為0.925，敏感性和特異性分別為78.26%和97.22%；而PCT診斷臨界值為0.098時，其ROCAUC為0.986，敏感性和特異性分別為93.48%和97.22%。提示PCT在新生兒遲發(fā)型膿毒癥中的診斷效能優(yōu)于presepsin。雖PCT對疾病診斷和預(yù)后評價具有重要價值，但當PCT<10 μg/L時，其臨床意義僅僅是可能存在感染，應(yīng)在6～24 h后繼續(xù)評估。可見，PCT在膿毒癥早期診斷方面并沒有太大優(yōu)勢。

目前，還沒有一個單一生物標志物能夠滿足新生兒膿毒癥診斷標準[17]。本研究通過聯(lián)合presepsin和PCT兩種指標，評價其對新生兒LOS的診斷價值，發(fā)現(xiàn)presepsin聯(lián)合PCT的ROCAUC最大，為0.989，且敏感性(95.65%)、特異性(100.00%)均明顯高于單獨presepsin或PCT指標。提示presepsin是評價新生兒LOS的特異指標，聯(lián)合PCT檢測提高了新生兒LOS的診斷價值。但由于本研究樣本量小，觀測時間短，其可靠性有待進一步大樣本研究證實。