文│鄭教雀（福建省寧德市動物疫病預防控制中心）

近幾年的“新全球化”加劇了國內(nèi)外動物疫情的嚴峻形勢，動物疫病防控部門面臨著各種新舊動物疫病的挑戰(zhàn)。獸醫(yī)實驗室作為獸醫(yī)工作的基礎，是動物疫病防控機構(gòu)的根基，承擔著動物疫病診斷、檢測，動物免疫狀況監(jiān)測等工作，為動物疫病防控部門提供技術保障，因此加強獸醫(yī)實驗室建設非常重要。獸醫(yī)實驗室檢測能力比對工作在加強獸醫(yī)實驗室建設中有著重要作用，它不僅能加強獸醫(yī)實驗室質(zhì)量控制、提高實驗室檢測能力，同時還能提高專業(yè)技術人員的業(yè)務水平，進而提高實驗室的綜合能力。

目前，我國獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室采用的比對方案多為：將若干個已知結(jié)果或數(shù)值（真實值）的樣品作為盲樣分發(fā)給各實驗室，之后收集各實驗室的比對試驗結(jié)果與真實值比較，通過結(jié)果符合數(shù)量與比對總數(shù)，計算出符合率。最后以符合率評價各參與比對實驗室的檢測能力。福建省寧德市動物疫病預防控制中心組織的比對試驗所采用的比對方案與以往相比有所不同，本文將此次比對的其中一個項目做如下分析，以供同行參考。

一、比對范圍及項目

本次實驗室檢測能力比對試驗共8個縣級獸醫(yī)實驗室參與；用ELISA檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體。

二、材料與方法

1.儀器與耗材。試驗所需要的儀器及設備由參與比對的實驗室各自準備，耗材（含緩沖液）由組織方統(tǒng)一準備。

2.試劑。豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒（PRRS X3 Ab）由北京愛德士元亨生物科技有限公司提供。

3.樣品。

（1）制備。樣品由北京愛德士元亨生物科技有限公司制備、分裝、編號。做到各盲樣的血清量相同、保證可進行重復性檢測，盲樣外觀顏色無明顯差異，并標定各樣品的參考值。為保證比對的科學性，組織方對比對樣品再次統(tǒng)一編號后，作為盲樣發(fā)放使用。

表1 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗評分標準

（2）保存與發(fā)放。在比對試驗開始前，盲樣由組織方密閉、低溫保存。待各參比實驗室人員、儀器設備到位后，統(tǒng)一發(fā)放。

4.試驗方法。比對試驗所采用的方法為依據(jù)《豬繁殖與呼吸綜合診斷方法》（GB/T 18090-2008），并參照試劑盒使用說明書進行。

依據(jù)說明書，要求各參比實驗室，對提供的8份盲樣進行3次重復試驗，設置內(nèi)部質(zhì)控品4份，同時設立陰、陽性對照各2份；具體試驗方法按照試劑盒使用說明書操作。完成試驗后，立即出具、提交正式檢測報告。

5.評判（分）標準。

（1）試驗結(jié)果。樣品檢測值：查看盲樣豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測值是否在給定的參考值區(qū)間內(nèi)，落在參考值區(qū)間內(nèi)，判為結(jié)果準確并得分；檢測值落在參考值區(qū)間外，則判為結(jié)果存在較大偏差，不得分。

樣本重復性：根據(jù)3次重復試驗檢測值，計算出變異系數(shù)，查看變異系數(shù)的大小。如果變異系數(shù)≤10%，則判定為樣本重復性好，得分；如果變異系數(shù)＞10%，則判定為樣本重復性較差，不得分。

內(nèi)部質(zhì)控品：查看4個質(zhì)控樣品檢測值是否滿足限定區(qū)間。如果滿足限定區(qū)間，得分；否則不得分。

陰陽性對照：陰陽性對照OD值在確保試驗成立后，再驗證其是否滿足參考標準要求。如果滿足要求，得分；否則不得分。

（2）檢測報告：查看各參比實驗室所出具的正式檢測報告。報告中每出現(xiàn)1個錯誤，扣除一定分數(shù)。比對試驗具體分數(shù)評定標準，見表1。

三、結(jié)果分析

1.總體結(jié)果。參與此次比對的8個獸醫(yī)實驗室都能在規(guī)定時間內(nèi)完成檢測并提交正式報告。根據(jù)比對結(jié)果評判（分）標準，7個實驗室的所有OD值在區(qū)間范圍內(nèi)，正確率為87.5%；6個實驗室的所有變異系數(shù)（CV%）都小于10%，比例為75%。這說明大部分獸醫(yī)實驗室具備相應的檢測能力，且技術操作穩(wěn)定、重復性好、水平較高。

2.具體結(jié)果。8個實驗室共檢測樣品192份，獲得192個OD值，其中189個OD值處于給定的參考區(qū)間范圍內(nèi)，合格率達98.4%；樣本重復性試驗，共計獲得64個變異系數(shù)（CV%），其中61個CV%值小于10%，重復性良好率達95.3%；陽性對照均合格。此外，3個實驗室的4個質(zhì)控樣品檢測值不在限定區(qū)間內(nèi)、3個實驗室的3個陰性對照未達參考標準。

3.檢測報告。收到檢測報告8份，每份報告均存在或大或小的問題。主要問題有：簽、蓋章不夠規(guī)范、報告內(nèi)容存在對應英文翻譯錯誤、診斷試劑未寫明具體廠家、未實行2級簽字等，具體得分結(jié)果見表2。

四、討論

血清學檢測是目前基層獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室的基本檢測手段，該次比對的豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測項目采用了ELISA檢測方法，能客觀的反映基層獸醫(yī)實驗室的技術水平；且此次比對試驗采用統(tǒng)一的試劑、樣品及標準，并現(xiàn)場立即收回檢測結(jié)果，加以統(tǒng)計分析，更能真實地反映出各實驗室的檢測能力水平。

試驗結(jié)果顯示，7個實驗室的合格率為100%，1個實驗室的合格率為87.5%，說明寧德市獸醫(yī)實驗室檢測人員的實際操作技能較強，整體檢測能力較強。但通過此次比對試驗的評比，也發(fā)現(xiàn)了各實驗室存在的一些問題。

1.未嚴格按照規(guī)程操作。D實驗室在收到樣品后，未及時對樣品進行編號登記，使得在后續(xù)試驗過程中將樣品弄混，導致其檢測不合格。

2.檢測報告不規(guī)范。各實驗室出具的檢測報告，存在格式不規(guī)范，內(nèi)容存在瑕疵，表述不準確、審核程序不夠健全等問題。

3.實驗記錄不規(guī)范。個別實驗室檢測報告所附的原始實驗記錄信息不完整，存在未使用正規(guī)試驗表格，試驗記錄涂改、未實行二級簽字等情況。

五、小結(jié)

檢測能力比對工作具有極其重要的意義，因為檢測能力不僅是動物防控部門建設的基礎，更是獸醫(yī)實驗室生存之基，而且出具的檢測報告是政府相關部門制定政策、執(zhí)行決策的依據(jù)。各動物疫病預防控制機構(gòu)要不斷提高檢測人員的技術水平，使得實驗室檢測更加科學、準確、規(guī)范，為重大動物疫病防控和食品衛(wèi)生安全提供有力的技術支持。

表2 口蹄疫O型抗體ELISA比對試驗得分統(tǒng)計表