摘要：本文對(duì)于硝基呋喃類藥物具體的種類和理化性質(zhì)以及可能帶來的危害進(jìn)行了相關(guān)的分析，并且對(duì)于膠體金免疫和酶聯(lián)免疫以及高效液相色譜，還有液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜等一些當(dāng)前被使用在對(duì)硝基呋喃類藥物和其代謝物殘留進(jìn)行檢查方式的具體使用情況進(jìn)行研究，同時(shí)針對(duì)這一藥物檢測方式的有效應(yīng)用給出了個(gè)人的一些建議。

關(guān)鍵詞：硝基呋喃類藥物及代謝物;檢測方法;研究進(jìn)展

1 硝基呋喃類藥物簡介

硝基呋喃類藥物其本身屬于呋喃核的5位引入硝基以及2位被引入到其他基團(tuán)中的一種通過人工合成方式生成的抗菌藥。因?yàn)檫@一類類藥物其本身都存在C=N雙鍵與5-硝基呋喃環(huán)的一種結(jié)構(gòu)，因此四種藥物的理化性質(zhì)是相同的，其都屬于一種無臭并且味苦，同時(shí)擁有穩(wěn)定性質(zhì)的一種黃色結(jié)晶粉末。其本身對(duì)于光敏感和代謝會(huì)產(chǎn)生一定的影響，其在和蛋白質(zhì)融合在一起的時(shí)候會(huì)構(gòu)成一種相對(duì)穩(wěn)定的蛋白結(jié)合物。

2 硝基呋喃類藥物及其代謝物殘留檢測方法

2.1 膠體金免疫法（GICA）

膠體金免疫法其屬于前處理的方式其進(jìn)行反應(yīng)的時(shí)間相對(duì)較短，并且僅僅需要使用肉眼就能夠?qū)ζ溥M(jìn)行定性的一種檢測方法。我國的相關(guān)研究人員對(duì)于飼料中硝基呋喃抗生素膠體金檢測試的紙條進(jìn)行研究，檢測出其中呋喃唑酮和呋喃它酮，以及呋喃西林與呋喃妥因進(jìn)行檢測的最低極限分別能夠達(dá)到5，3，2，2 μg·kg-1，假陽性率能夠達(dá)到2%，假陰性率則能夠達(dá)到為0。

2.2 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是一種具有高特異性和高靈敏度的半定量定量方法。它操作簡單，檢測時(shí)間短。它可以實(shí)現(xiàn)大量樣品的同時(shí)檢測。因此，它經(jīng)常被用作藥物殘留分析的篩選方法。2004年，Cooper等首次制備了AOZ多長抗體，并提出了用于蝦組織AOZ檢測的ELISA方法。該方法的建立為開發(fā)硝基呋喃代謝物的ELISA奠定了基礎(chǔ)。徐一平[24]建立了AHD的ELISA方法，檢出限為0.085 mg·mL-1，通過測定豬肉樣品的回收率確定了該方法的準(zhǔn)確性。現(xiàn)在市場上，如德國R-Biopharm，英國RANDOX等公司都有成熟的產(chǎn)品。

2.3高效液相色譜（HPLC）

高效液相色譜法是檢測硝基呋喃及其代謝物的常用方法之一。由于呋喃結(jié)構(gòu)的紫外光譜吸收不明顯，靈敏度降低，不能滿足檢測要求。然而，衍生化后，硝基呋喃代謝產(chǎn)物可以產(chǎn)生強(qiáng)烈的紫外吸收，檢測限提高到1μg·kg-1。王元等建立了一種用酸測定水產(chǎn)品中四種硝基呋喃代謝物的方法。- 分解樣品，2-氯苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯萃取，并用SPE柱純化，5.0-500。μg·L-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量限為1.0μg·kg -1，兩次加入濃度水平的平均回收率為76%～102%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%（n = 6）。Chumanee等采用2-萘醛甲醛衍生法，用液相色譜 - 二極管陣列檢測器檢測蝦肉中4種硝基呋喃代謝物，檢出限為1μg·kg-1。

3 結(jié)論

目前，用于硝基呋喃類抗生素和其代謝物檢測方式主要有膠體金免疫法和酶聯(lián)免疫法以及液相色譜即串聯(lián)質(zhì)譜檢測法，液相色譜法的優(yōu)勢是自動(dòng)化和精準(zhǔn)度相對(duì)較高，可是其因?yàn)槭艿交|(zhì)效應(yīng)的干擾經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生一些假陽性，并且其檢測的儀器相對(duì)比較貴操作過程較為繁瑣在進(jìn)行前處理過程較為復(fù)雜，因此需要有專業(yè)的人員對(duì)其進(jìn)行分析。而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，其自身的特異性相對(duì)較高敏感度和精確度也非常的強(qiáng)，這樣的情況使得檢測極限相對(duì)較低?？墒瞧湓谑褂蒙系某杀颈容^高，操作流程復(fù)雜是其存在的主要缺點(diǎn)。而酶聯(lián)免疫法和膠體金免疫法基本上擁有快速簡便和高特異性的優(yōu)勢，可是卻不能夠去完成電量檢測的需求，并且其經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生一些假陽性或者是假陰性的風(fēng)險(xiǎn)。所以針對(duì)不同的環(huán)節(jié)和不同的樣品，需要結(jié)合實(shí)際的情況去選擇不同的方式，只有這樣才能夠使得其測量的結(jié)果更加的準(zhǔn)確和高效，除此之外還能夠降低使用資金。而在對(duì)液相色譜或串聯(lián)質(zhì)譜檢測方式進(jìn)行使用的過程中建議去運(yùn)用內(nèi)標(biāo)法去完成定量這種方式不僅能夠減少基質(zhì)效應(yīng)對(duì)其產(chǎn)生的干擾同時(shí)還能夠防止前處置技術(shù)過程中目標(biāo)成分丟失而產(chǎn)生的定量不精準(zhǔn)的情況。對(duì)于酶聯(lián)免疫法或膠體金免疫法進(jìn)行選擇的時(shí)候，需要盡可能選擇一些質(zhì)量合格，并且其自身穩(wěn)定性較高的產(chǎn)品，同時(shí)使其在對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行使用之前完成所需要的驗(yàn)證。

硝基呋喃代謝物需要經(jīng)過衍生增大分子量，通過這種方式去使其色譜行為得到改善同時(shí)還能夠令離子化效率檢測的精準(zhǔn)度與靈敏度得到提升，當(dāng)前我們國家所制定的檢測標(biāo)準(zhǔn)和國外報(bào)告的文獻(xiàn)里的一些標(biāo)準(zhǔn)都是通過加入了其他物質(zhì)去保持在恒定溫度下進(jìn)行檢測的這樣的一種情況所需要的檢測時(shí)間相對(duì)較久，并且其檢測效率也無法得到有效保證，尤其是在遇到一些緊急或突發(fā)情況的時(shí)候，就會(huì)使得檢測機(jī)構(gòu)對(duì)檢測結(jié)果的上報(bào)出現(xiàn)延遲，當(dāng)前很多文獻(xiàn)報(bào)道選擇的都是新型衍生化劑去進(jìn)行檢測，這樣的一種方式能夠減少衍生時(shí)間，同時(shí)還能夠滿足檢測極限，使其回收率得到較大提升，筆者曾經(jīng)通過把溫度提高到60度的方式，持續(xù)4小時(shí)去對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)收，獲得的結(jié)果和連續(xù)進(jìn)行16個(gè)小時(shí)的衍生，存在的差異并不是很大，但是如果將這種方式進(jìn)行大范圍的使用，還需要對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

[1]生威，李季，許艇.動(dòng)物性產(chǎn)品中硝基呋喃類抗生素殘留檢測方法研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2006（25）：429-434.