摘要：目的：探討miR-331-3p與原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）腫瘤特征關(guān)系。方法 RT-PCR方法檢測(cè)25例肝硬化患者，20例慢性肝炎患者，50例HCC患者血清miR-331-3p含量。結(jié)果 miR-331-3p對(duì)HCC有診斷效能（AUC=0.740），并與腫瘤的大小及是否具侵襲血管或淋巴明顯相關(guān)。結(jié)論 miR-331-3p是HCC診斷潛在標(biāo)志物。

關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝細(xì)胞癌;微小RNA;血清;診斷

中圖分類號(hào)：R735.7 """""""""""文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

Exploration of Serum miR-331-3p as Biomarkers for Hepatocellular Carcinoma

Abstract：[Objective] To explore the relationship between miR-331-3p and the characteristics of HCC. [Methods] Serum miR-331-3p levels in 25 patients with liver cirrhosis， 20 patients with chronic hepatitis and 50 patients with HCC were measured. [Results] MiR-331-3p could efficiently diagnose HCC from high risk patients with AUC of 0.740 and was significantly correlated with the tumor size and tumor invasion of blood vessels or lymph nodes. [Conclusions] Serum miR-331-3p was a potential marker in diagnosis of HCC.

Key words： hepatocellular carcinoma; microRNA; serum; diagnosis

基礎(chǔ)研究及前期工作表明血清中miR-331-3p可以作為原發(fā)性肝細(xì)胞癌（HCC）的診斷標(biāo)志物^[1]，在這里對(duì)miR-331-3p與腫瘤病例特征的關(guān)系進(jìn)一步研究。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

以50例HCC患者，45例慢性肝?。–LD）患者，其中肝硬化（LC）患者25例，慢性肝炎（CH）病人20例為研究對(duì)象。

1.2 標(biāo)本收集

收集研究對(duì)象血清，置于-80℃冰箱保存待用。

1.3血清RNA提取及miR-331-3p測(cè)定

應(yīng)用TRizol法進(jìn)行RNA提取。TaqMan qRT-PCR法進(jìn)行miR-331-3p測(cè)定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

用cel-miR-39標(biāo)準(zhǔn)化miRNA的表達(dá)量，以2^{-ΔCT （CT miR- CTcel-miR-39）[2]}來(lái)計(jì)算。計(jì)量組間應(yīng)用ANOVA分析。Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析。Plt;0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 肝癌患者肝癌病理特征

單發(fā)腫瘤27例，多發(fā)腫瘤23例。按巴塞羅那（BCLC）分級(jí)方式對(duì)腫瘤進(jìn)行分級(jí)^[2]：0+A期有23例，B期18例，C期8例，D期1例。（表1）

2.2 miR-331-3p對(duì)HCC的診斷效能分析

對(duì)miR-331-3p建立從CLD（CH+LC）人群診斷HCC的ROC曲線。miR-331-3p曲線下面積為0.740。Cutoff值為0.740時(shí)，診斷的靈敏度和特異性分別為66%，78%。

2.3 miR-331-3p與腫瘤特征的關(guān)系

對(duì)miR-331-3p與腫瘤特征做相關(guān)性分析，miR-331-3p與腫瘤是否為多發(fā)無(wú)顯著相關(guān)性，與腫瘤大小顯著相關(guān)（r=0.389， P=0.005），隨著腫瘤直徑增加呈上升趨勢(shì)， 與腫瘤是否侵襲血管或淋巴相關(guān)（r=0.586， P=0.001），在有侵襲腫瘤患者血清含量顯著高于非侵襲者。（表1）

3 討論

基礎(chǔ)研究顯示miR-331-3p通過(guò)抑制蛋白磷酸酶PHLPP介導(dǎo)的AKT的去磷酸化過(guò)程，具有促進(jìn)肝細(xì)胞的增殖和侵襲的作用，在HCC組織中顯著上升^[6]。本研究對(duì)血清miR-331-3p含量的測(cè)定和組織報(bào)道相一致。進(jìn)一步對(duì)血清miR-331-3p與腫瘤特征進(jìn)行相關(guān)性分析表明血清miR-331-3p含量與腫瘤大小以及腫瘤是否侵襲血管或淋巴顯著相關(guān)。

在我國(guó)肝炎，肝硬化這些高危人群中，早期發(fā)現(xiàn)肝癌，早期進(jìn)行治療對(duì)降低病死率有著重要意義^[3]。本研究發(fā)現(xiàn)血清miR-331-3p是在慢性肝病高危人群中診斷HCC的新型標(biāo)志物，是對(duì)傳統(tǒng)標(biāo)志物AFP的補(bǔ)充。

參考文獻(xiàn)：

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[3]王黎君， 殷鵬， 劉韞寧， 劉江美， 齊金蕾， 周脈耕. 1990年與2013年中國(guó)人群肝癌疾病負(fù)擔(dān)研究. 中華流行病學(xué)雜志. 2016，37（6）： 758-62.