劉威良 黃艾祥

摘 要 黃酮類化合物是一類多酚類物質(zhì)，廣泛存在于植物中，具有抗疲勞、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等藥理和生理活性。文章闡述了疲勞產(chǎn)生的機(jī)制，介紹了黃酮類化合物提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定及其抗疲勞作用機(jī)理，并針對(duì)黃酮類化合物研發(fā)抗疲勞功能性食品及其保健品進(jìn)行了展望。以期為黃酮類化合物的進(jìn)一步研究做出探索。

關(guān)鍵詞 抗疲勞 ；作用機(jī)理 ；保健展望

中圖分類號(hào) R966 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2019.02.015

Abstract Flavonoids compound was one of Phenolic substances， which exist extensively in the plant kingdom. It has some important pharmacological and physiological activity such as anti-fatigue， anti-oxidant，Immunomodulatory and so on. The paper ascertain mechanism of fatigue， introduced the structure and the technology of flavonoidss extraction and separation andthe mechanism of its anti-fatigue effect， then prospect its development and utilization in the area of anti-fatigue functional food and health products.

Keywords anti-fatigue ； action mechanism ； health care prospect

疲勞是指體力或腦力勞動(dòng)到達(dá)一定階段時(shí)必然會(huì)出現(xiàn)的一種正常生理現(xiàn)象，這是從中樞神經(jīng)系統(tǒng)至骨骼肌細(xì)胞再到細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的代謝過(guò)程，是機(jī)體復(fù)雜的生理變化過(guò)程，中間任何一過(guò)程或環(huán)節(jié)變化均可導(dǎo)致疲勞的產(chǎn)生[1-2]。疲勞是普遍存在的一種生理現(xiàn)象，人們對(duì)疲勞的認(rèn)識(shí)在不斷地加深，莫桑首次提出“疲勞”的概念[3]，而后人們根據(jù)屬性不同，將疲勞分為生理性和病理性疲勞。若能通過(guò)適當(dāng)?shù)男菹⒌玫骄徑饣蛘呦谡?，屬生理性疲勞；而不能通過(guò)休息或者藥物解除，并且有器質(zhì)性損害者，屬病理性疲勞。國(guó)外學(xué)者WATANABE等[4]將疲勞分為4種，即運(yùn)動(dòng)性、中樞性、免疫性及熱環(huán)境性疲勞。而黃林章[5]把疲勞歸結(jié)為外周和中樞疲勞兩大類，前者主要是指肌肉的疲勞，表現(xiàn)為肌肉酸疼、肌肉力量下降、動(dòng)作遲緩、協(xié)調(diào)能力下降不靈敏等；后者是指運(yùn)動(dòng)過(guò)度后腦組織中5-羥色胺、γ-氨基丁酸等神經(jīng)遞質(zhì)含量發(fā)生變化，打破了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮與抑制之間的穩(wěn)態(tài)，引發(fā)的中樞性疲勞。

現(xiàn)代人的工作學(xué)習(xí)壓力大，生活節(jié)奏快，身體常處于亞健康狀態(tài)，因此易于出現(xiàn)疲勞，造成工作學(xué)習(xí)效率低，這迫切需要得到緩解，尤其是在運(yùn)動(dòng)界、高原和一些井下工作的特殊人員更需要克服疲勞。具有抗疲勞的化學(xué)藥物多為大腦皮層興奮藥物，在大腦皮層處于抑制狀態(tài)時(shí)這類藥物作用就更為顯著，此類藥物主要抗疲勞作用方式為興奮大腦、消除睡意，可使服用者保持較長(zhǎng)時(shí)間的連續(xù)工作狀態(tài)，其代表藥物有咖啡因、苯丙胺、利他林、甲氯芬酯、吡拉西坦、莫達(dá)非尼，但這些抗疲勞化學(xué)藥物多具有成癮性，副作用大，這就制約了其在臨床上應(yīng)用[6]。近年研究重心轉(zhuǎn)向從一些藥食同源植物中尋找抗疲勞因子。大量研究表明一些植物源活性成分如多糖[7-8]、皂苷[9-12]、黃酮[13-14]、生物堿[15-18]、多酚[19-21]等均具有抗疲勞功效，為抗疲勞功能性食品的研發(fā)提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。經(jīng)由運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)和食品營(yíng)養(yǎng)學(xué)交叉互補(bǔ)，大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明天然產(chǎn)物可影響機(jī)體的能量代謝，從而產(chǎn)生抗疲勞效果。本文就近年來(lái)黃酮類化合物抗疲勞作用及其他藥理活性研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 疲勞產(chǎn)生機(jī)制

運(yùn)動(dòng)性疲勞產(chǎn)生的機(jī)制比較復(fù)雜，目前尚存諸多爭(zhēng)論，近些年一致認(rèn)同的有自由基-脂質(zhì)過(guò)氧化、能源物質(zhì)耗竭、致勞物質(zhì)蓄積、大腦皮層的神經(jīng)保護(hù)性抑制學(xué)假說(shuō)。

1.1 氧自由基-脂質(zhì)過(guò)氧化學(xué)說(shuō)

正常人在新陳代謝過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生大量反應(yīng)氧族（Reative Oxygen Species，ROS）），如一些羥基自由基、單線態(tài)氧、超氧陰離子和過(guò)氧化氫等，它們可以與磷脂分子中的不飽和脂肪酸氧化生成過(guò)氧化脂質(zhì)，損傷肌細(xì)胞膜。過(guò)量的ROS積累會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡，從而引發(fā)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的氧化應(yīng)激損傷，最終引起細(xì)胞凋亡和肌肉等組織器官功能損傷，進(jìn)而導(dǎo)致疲勞的產(chǎn)生[22-24]。自Dillare首次將自由基引入運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)范疇，國(guó)內(nèi)外學(xué)者針對(duì)自由基與運(yùn)動(dòng)之間的相互影響進(jìn)行了諸多探索。1982年Davies等[25]首次應(yīng)用電子自旋共振技術(shù)（ERS））直接證實(shí)了力竭運(yùn)動(dòng)后肌肉、肝臟中的ROS顯著增加，亦反映運(yùn)動(dòng)是自由基過(guò)度堆積的誘因之一。隨后，眾多動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)研究也表明，急性劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，機(jī)體清除過(guò)量自由基的能力不足，體內(nèi)細(xì)胞處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，從而導(dǎo)致細(xì)胞損傷，進(jìn)而誘發(fā)疲勞行為。有研究表明運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的作用機(jī)制一般有黃嘌呤氧化酶機(jī)制和線粒體機(jī)制，最近又有學(xué)者提出了前列腺機(jī)制、中性粒細(xì)胞機(jī)制和鈣機(jī)制[26]。

1.2 能源物質(zhì)耗竭說(shuō)

該學(xué)說(shuō)認(rèn)為，當(dāng)機(jī)體運(yùn)動(dòng)時(shí)對(duì)能源的需求增加，同時(shí)未得到及時(shí)供給，又因有氧代謝能力不足，需通過(guò)無(wú)氧呼吸補(bǔ)充能量。運(yùn)動(dòng)的同時(shí)導(dǎo)致體內(nèi)氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡，阻礙了磷酸腺苷活化蛋白激酶（5'-AMP-activated protein kinase，AMPK）的活性，以致使ATP的過(guò)度損耗和氧代謝產(chǎn)物（d-ROM））的堆積，引發(fā)連鎖的生化反應(yīng)，機(jī)體為了避免應(yīng)激損傷而產(chǎn)生疲勞效應(yīng)[27-28]。由分子層面上可知，p38絲裂原活化蛋白激酶（MAPK））信號(hào)通路的激活，誘發(fā)過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體亞基基因表達(dá)的上調(diào)，進(jìn)而增加線粒體的生成；在組織水平上，骨骼肌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-A增加的同時(shí)，凝血栓蛋白-1減少，骨骼肌毛細(xì)血管增生使肌肉功能缺失和運(yùn)動(dòng)機(jī)能減弱，最終引發(fā)疲勞[29-31]。

1.3 致勞物質(zhì)蓄積學(xué)說(shuō)

眾多數(shù)據(jù)顯示[32]，機(jī)體在運(yùn)動(dòng)過(guò)程中肌肉快速收縮，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)會(huì)分解產(chǎn)生乳酸、丙酮酸和氨，機(jī)體清除系統(tǒng)無(wú)法及時(shí)將其分解成更小的分子，導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境改變，如體內(nèi)酸堿、滲透壓、離子分布等平衡失調(diào)，影響機(jī)體的正常代謝，失去原有運(yùn)動(dòng)力，從而導(dǎo)致疲勞產(chǎn)生。在高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)機(jī)體為了提高能量供應(yīng)，會(huì)消耗大量糖類物質(zhì)，與此同時(shí)氧氣的供應(yīng)不足導(dǎo)致糖酵解作用大量進(jìn)行，從而生成過(guò)量乳酸，致使肌肉中pH值下降，即肌肉中的氫離子濃度升高，加速了疲勞感的產(chǎn)生[33]。

1.4 大腦皮層的神經(jīng)保護(hù)性抑制學(xué)說(shuō)

高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)時(shí)，能源物質(zhì)過(guò)度消耗，機(jī)體內(nèi)環(huán)境紊亂，大腦皮層作為控制運(yùn)動(dòng)中樞的靶器官，會(huì)產(chǎn)生一系列保護(hù)性反應(yīng)，從而減少機(jī)體進(jìn)一步受到損傷，即劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，大量神經(jīng)沖動(dòng)傳到大腦皮層中相應(yīng)的神經(jīng)元，該神經(jīng)元會(huì)長(zhǎng)時(shí)間處于興奮狀態(tài)，為避免其過(guò)度損耗，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生抑制沖動(dòng)，導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)能力下降，產(chǎn)生疲勞反應(yīng)[34]。目前對(duì)中樞抑制導(dǎo)致疲勞的研究較少，但是也有一些生物學(xué)機(jī)制已經(jīng)闡述了中樞性疲勞。研究數(shù)據(jù)表明腦內(nèi)5-羥色胺和γ-氨基丁酸含量的上調(diào)與下調(diào)會(huì)加速或延遲疲勞的發(fā)生。其他一些神經(jīng)調(diào)控因子，如氨分子和炎性細(xì)胞因子，此類成分可以減弱運(yùn)動(dòng)的耐受，另外，血液里和腦組織中氨含量的上升也會(huì)造成大腦皮層的抑制，最終引發(fā)疲勞?？傊谑芡饨缫蛩睾痛竽X皮層抑制調(diào)節(jié)的綜合作用，以此應(yīng)對(duì)運(yùn)動(dòng)過(guò)度引發(fā)的應(yīng)激反應(yīng)[35]。

2 黃酮類化合物的提取、分離及其結(jié)構(gòu)鑒定

2.1 提取

首先，黃酮類化合物系色原烷或色原酮的衍生物，主要指以2-苯基色原酮為母核的物質(zhì)，是一類重要的植化成分[36]。如今泛指2個(gè)苯環(huán)通過(guò)中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列化合物（C3-C6-C3）），又由于這類化合物大多呈淡黃色或黃色，因此稱為黃酮[37]。黃酮類化合物資源豐富且易于提取，廣泛存在于植物各個(gè)器官中，是植物的次級(jí)代謝產(chǎn)物之一，多以苷類或游離態(tài)形式貯藏于植物細(xì)胞質(zhì)中[38-39]。目前，植物總黃酮的萃取一般采用溶劑提取法，常用甲醇、乙醇、水及其他極性溶劑進(jìn)行萃取。此外亦用如下幾類方法：

2.1.1 超濾法

黃酮類化合物的分子量多在1 kDa以下，而多糖、蛋白等其他物質(zhì)分子量多在50 kDa以上，采用超濾法可以截留并清除此類雜質(zhì)，提高黃酮類藥液有效成分含量和澄清度，而且在分析過(guò)程中準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好。張效林等[40]用超濾法提取側(cè)柏葉總黃酮時(shí)，有效的將脂溶性葉綠素和鞣質(zhì)分開。王羨一等[41]采用均質(zhì)法和超濾膜法從側(cè)柏葉中獲得高純度的黃酮成分。易克傳等[42]采用超濾技術(shù)對(duì)菊花中總黃酮進(jìn)行分離，并對(duì)提取工藝優(yōu)化，此法操作簡(jiǎn)便、分離效果好，總黃酮得率為19.81%。王世嶺[43]采用膜分離技術(shù)，對(duì)中藥材黃芩中黃酮類單體黃芩苷進(jìn)行分離提取，效果頗佳。

2.1.2 超臨界流體萃取法

該方法是通過(guò)控制臨界溫度和壓力，利用某種液體在臨界點(diǎn)附近某區(qū)域內(nèi)具有流動(dòng)性好、溶解能力強(qiáng)及傳遞性能高等特點(diǎn)，達(dá)到選擇性提取和分離目的[44]。目前常用的超臨界流體是CO2，與傳統(tǒng)方法相比，此技術(shù)工藝簡(jiǎn)單、提取效率高、無(wú)溶劑殘留、且低溫可以保護(hù)熱敏性成分[45-47]。有研究表明，超臨界流體萃取中，不單可用CO2作為媒介萃取一些低極性游離黃酮、黃酮苷類，還可加入乙醇作夾帶劑萃取一些極性偏高的黃酮類成分[48]。劉雯等[49]采用超臨界流體CO2萃取技術(shù)并探討夾帶劑對(duì)銀杏葉黃酮醇苷提取的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)夾帶劑可顯著提高萃取率。Kotnik等[50]利用超臨界CO2萃取從甘菊花中提取 α-紅沒藥醇、母菊素等，這與傳統(tǒng)法相比體現(xiàn)出更多優(yōu)點(diǎn)。但也有一些不足之處，如溶劑選擇范圍窄、投資成本和設(shè)備要求高。

2.1.3 超聲輔助提取法

超聲波提取法是利用超聲波產(chǎn)生的機(jī)械效應(yīng)、擴(kuò)散、熱傳遞以及空化作用加強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的釋放，從而加速植物中有效成分的擴(kuò)散和浸出。超聲波頻率通常在20～40 kHz[51]。隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，超聲提取技術(shù)已經(jīng)廣泛用于中草藥等植物活性成分的提取中，其具有提取時(shí)間短、有效成分溶出高、成本低、低溫保護(hù)熱敏感成分及污染小等優(yōu)點(diǎn)[52]。張曉旭等[53]采用70%乙醇，60℃超聲提取3 h后，通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化杜仲葉總黃酮的沉淀萃取工藝。Ghasemzadeh等[54]采用超聲輔助提取咖喱葉中黃酮類化合物并運(yùn)用響應(yīng)面法對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，且對(duì)黃酮類化合物的藥理活性進(jìn)行了研究。 Wu等[55]也通過(guò)超聲輔助提取土荊芥黃酮類化合物，并應(yīng)用響應(yīng)面技術(shù)對(duì)其工藝進(jìn)行優(yōu)化。

2.1.4 超高壓提取法

此技術(shù)起初廣泛用于食品保鮮和加工，近年來(lái)發(fā)展成為一種新型的天然產(chǎn)物提取和加工技術(shù)，具有能耗小、提取率高、穩(wěn)定性好、安全、綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，尤其適合一些中藥活性成分，如黃酮、多糖、皂苷、生物堿等的提取分離[56]。孫協(xié)軍等[57]以超高壓技術(shù)進(jìn)行山楂黃酮的提取，對(duì)比常規(guī)方法，如超聲提取法、索氏抽提法有明顯優(yōu)勢(shì)，作者還利用掃描電鏡對(duì)此技術(shù)為何相比其他傳統(tǒng)技術(shù)具有黃酮得率高、耗時(shí)短、熱效應(yīng)低等優(yōu)點(diǎn)做出了合理的闡釋。敬思群等[58]采用超高壓萃取金雞菊總黃酮，并對(duì)其提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明，此技術(shù)萃取的黃酮得率高且費(fèi)時(shí)少，同時(shí)采用紅外和紫外光譜分析法證明了超高壓對(duì)金雞菊黃酮的結(jié)構(gòu)沒有影響。袁亞光[59]亦采用超高壓研究了枇杷葉、牡丹花黃酮的提取，結(jié)果表明此技術(shù)不僅不損壞相應(yīng)黃酮的構(gòu)型，還能夠提升得率和抗氧化活力。綜上所述，超高壓技術(shù)特別適用于黃酮類物質(zhì)的萃取，備受廣大科研工作者青睞。

2.2 分離與純化

2.2.1 高速逆流色譜法

高速逆流色譜法（HSCCC））是一種連續(xù)高效的液-液分配色譜技術(shù)，它是利用兩相溶劑體系，在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起來(lái)的一種特殊的單相流體動(dòng)力學(xué)平衡，并實(shí)現(xiàn)高效分配、傳遞依次洗脫達(dá)到分離的目的[60]。黃酮類化合物具有多種功能活性，研究其分離純化技術(shù)意義重大，這為生物學(xué)實(shí)驗(yàn)、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床藥效學(xué)研究供給充足的樣品[61]。Xiao等[62]通過(guò)兩步分離純化從黃芪中得到5種黃酮苷類化合物，純度達(dá)到90%以上。彭金勇等[63]用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水作為兩相溶劑從白花敗醬草中分離純化了3種黃酮類化合物，其純度高達(dá)99.2%。李成平等[64]通過(guò)建立HSCCC方法從橘皮中快速、高效的分離及純化出4種多甲氧基黃酮類物質(zhì)，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析。這些實(shí)驗(yàn)都顯示出此技術(shù)高效強(qiáng)大的分離純化效力。

2.2.2 柱色譜法

該法又名柱層析，即選擇相應(yīng)的固定相填裝于柱子中，以一定比列的液體作為流動(dòng)相，樣品隨流動(dòng)相沿柱子方向分離開來(lái)。分離純化黃酮類化合物常用的柱色譜吸附劑或載體有硅膠柱、纖維素粉、葡聚糖凝膠、活性炭、氧化鋁和硅藻土等[65]。楊武英等[66]分別應(yīng)用NKA-9大孔吸附樹脂，聚酰胺樹脂對(duì)梁木果皮黃酮、青錢柳黃酮進(jìn)行研究，并優(yōu)化了精制工藝，結(jié)果表明此法純化出的黃酮安全、純度頗高，普遍適用植物活性成分的分離純化。Johnston等[67]采用葡聚糖凝膠柱成功的將槲皮素、山奈酚、芹菜素、蘆丁、槲皮苷分離開來(lái)。有研究報(bào)道指出，大孔樹脂法在荷葉、芹菜、柚皮、艾蒿等植物黃酮的分離純化上得到廣泛運(yùn)用。

2.2.3 雙水相萃取

此項(xiàng)技術(shù)是20世紀(jì)中葉提出的，90年代用于天然產(chǎn)物的分離純化。該法屬于液-液萃取，根據(jù)待分離成分在兩相間的選擇性分配，使其分離。因其有價(jià)格低、萃取率高、易于操作、污染小等優(yōu)勢(shì)，普遍用于黃酮類化合物的富集[68-70]。趙曉莉等[71]利用雙水相體系法，分離得到了柿葉黃酮。石慧等[72]采用雙水相萃取法，研究加楊葉黃酮的分離并對(duì)兩相分配比例進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明此法極大提高了加楊葉黃酮的分離效果。

2.3 結(jié)構(gòu)鑒定

2.3.1 平面色譜法

平面色譜法包括紙色譜法和薄層色譜法。 Pozsonyi等[73]用薄層色譜法比較了自然生長(zhǎng)條件下和人工栽培的變種中洋地黃葉子里的洋地黃苷的含量差異。郭新華等[74]利用膠束紙色譜法對(duì)黃酮類物質(zhì)進(jìn)行探究，結(jié)果成功的分離了其中幾類黃酮苷類成分。

2.3.2 高效毛細(xì)管電泳（HPCE））法

Pietta等[75]用MECC法在紫外線二極管陣列檢測(cè)方法下分析測(cè)定了蠟菊屬植物中的黃酮類化合物，并對(duì)其結(jié)構(gòu)化學(xué)組成進(jìn)行了鑒定。Aremendia等[76]用CZE法結(jié)合電噴霧質(zhì)譜分析方法分離了幾種不同的黃酮類化合物，并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。李芳等[77]通過(guò)HPCE法探討了新疆地區(qū)不同采集期的桑葉，對(duì)其中蘆丁成分進(jìn)行快速、高效的分離并對(duì)其含量進(jìn)行了測(cè)定。

2.3.3 高效液相色譜（HPLC））法

黃酮類化合物的分析普遍使用C18柱。Fang 等[78]用該方法研究了紅葡萄酒中十余種黃酮類化合物，如毛地黃酮、楊梅酮、桑色素等。彭全材等[79]建立反相HPLC法對(duì)不同產(chǎn)地魚腥草中黃酮類成分的研究，結(jié)果實(shí)現(xiàn)了對(duì)其中金絲桃苷、槲皮素、異鼠李素等黃酮物質(zhì)分離并檢測(cè)了含量。目前樣品水解后采用HPLC方法測(cè)定總黃酮含量是公認(rèn)的好方法，另外液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)用于黃酮的檢測(cè)，不乏是一種全新的技術(shù)手段[80]。

2.3.4 紫外分光光度法

此法利用樣品在溶解后，與化學(xué)試劑作用生成顏色反應(yīng)，在特定波長(zhǎng)處有特異性吸收，操作簡(jiǎn)便、快速，目前應(yīng)用較廣泛。袁金斌等[81]通過(guò)建立一種快速的紫外分光光度法，測(cè)定了大豆中一種食品保健因子大豆異黃酮的含量。程研等[82]利用此法建立黃芪中總黃酮的含量測(cè)定方法，比較不同產(chǎn)地黃芪藥材總黃酮的含量。梁欣格等[83]采用紫外分光光度法測(cè)定了黃芪總黃酮的含量，并對(duì)此法進(jìn)行了探討。

3 黃酮類化合物生物活性功能

3.1 抗氧化及清除自由基作用

自由基被認(rèn)定為引起心血管、癌癥、衰老等退變性疾病的罪惡之源，大量研究表明黃酮類化合物具有很強(qiáng)的清除自由基和抗氧化能力。Georgetti等[84]用化學(xué)熒光法對(duì)不同類黃酮化合物進(jìn)行了分析檢測(cè)，確定了它們的抗氧化能力。研究發(fā)現(xiàn)，黃酮類化合物在抗氧化反應(yīng)中既能清除鏈引發(fā)階段的ROS，也可以直接將其在反應(yīng)鏈中捕獲而使鏈反應(yīng)終止，起到預(yù)防和免斷鏈雙重效應(yīng)[85]。

3.2 免疫調(diào)節(jié)作用

生物類黃酮具有抗炎作用，其抗炎機(jī)制可能在于抑制前列腺素（PG））生物合成過(guò)程中的脂氧化酶（LOX））活性。Selleri等[86]研究發(fā)現(xiàn)，慢性炎癥疾病通常伴有氧自由基和NO含量升高現(xiàn)象，金雀異黃素作為酪氨酸激酶的抑制劑，可以起到一定的抑制NO形成的作用。周月蟬等[87]研究表明，連續(xù)30天灌胃小鼠適量藤茶，發(fā)現(xiàn)藤茶總黃酮可提高小鼠單核-巨噬細(xì)胞吞噬功能。黃酮類化合物對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)呈現(xiàn)多樣性的原因在于研究材料大都為總黃酮，其成分復(fù)雜，而具體到哪類單體成分起作用的機(jī)制不太明朗，有待進(jìn)一步考察。

3.3 抗疲勞作用

黃酮類化合物是自然界存在的一種天然抗氧劑，亦稱“維生素P”，諸多文獻(xiàn)表明，其具有很強(qiáng)的抗氧化活性。運(yùn)動(dòng)性疲勞是由諸多因素疊加所致，絕大多數(shù)人都承認(rèn)其可能與自由基的過(guò)度積累有關(guān)，所以除了增加能源物質(zhì)的補(bǔ)充，有效的補(bǔ)充黃酮類外源抗氧劑也是一種重要手段。槲皮素（quercetin）及其苷類為植物界分布最廣的黃酮類化合物，具有抗氧化、抗癌防癌、抗菌抗病毒等作用，能參與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期復(fù)制、解毒和血管生成等生物過(guò)程，最近有研究表明槲皮素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有較好的抗疲作用[88]。蘆丁是廣泛存在于自然界中的一類黃酮類物質(zhì)，大量研究已表明，它具有抗氧化、抗炎、抗衰老、降血壓等藥理作用。吳濤等[89]通過(guò)小鼠負(fù)重游泳等實(shí)驗(yàn)證明蘆丁具有很好的抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用。

4 黃酮類化合物抗疲勞作用機(jī)制

4.1 對(duì)氧自由基清除及抗氧化作用的影響

大量數(shù)據(jù)已表明，體能過(guò)度消耗后，會(huì)造成細(xì)胞內(nèi)超氧陰離子等代謝廢物的堆積，它們與細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化作用，使生物膜如線粒體膜、肌肉纖維膜的結(jié)構(gòu)破損，產(chǎn)生細(xì)胞毒性導(dǎo)致肌肉機(jī)能下降，從而引發(fā)疲勞效應(yīng)[90]。Haibing等[91]通過(guò)體外抗氧化實(shí)驗(yàn)研究顯示，黃秋葵黃酮能夠很好地清除自由基（DPPH）），具有很強(qiáng)的抗氧化效果，推測(cè)其可通過(guò)加速劇烈運(yùn)動(dòng)后自由基的代謝，減少細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷來(lái)達(dá)到緩解疲勞的功效。Kuo等[92]學(xué)者亦研究指出，黃酮類化合物不僅能通過(guò)清除ROS或降低ROS形成，還可通過(guò)免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用提高機(jī)體耐受能力，減緩肌肉的損傷、能量的過(guò)度損耗，達(dá)到抗疲勞作用。鄧超等[93]研究表明，通過(guò)連續(xù)灌胃小鼠冬凌草總黃酮30 d，采用小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)并檢測(cè)相關(guān)生化指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)冬凌草總黃酮可通過(guò)提高機(jī)體抗氧化能力并抑制力竭運(yùn)動(dòng)中氧自由基的產(chǎn)生來(lái)延緩疲勞的發(fā)生。另外，Lin等[94]研究表明，從黃秋葵甲醇提取物中分離出一種黃酮類單體槲皮素-3-o-龍膽二糖（QG）），通過(guò)大鼠負(fù)重游泳力竭運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)QG可以有效提高抗氧化酶，如超氧化物歧化酶（SOD））和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px））的活力，從而降低高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)引發(fā)氧化應(yīng)激對(duì)機(jī)體的損傷。Yu等[95]研究發(fā)現(xiàn)，中藥鎖陽(yáng)黃酮提取物能增強(qiáng)體內(nèi)關(guān)鍵的抗氧酶SOD和GSH-Px的活性，降低脂質(zhì)過(guò)氧化終產(chǎn)物丙二醛（MDA））含量，減緩肌肉疲勞。

4.2 對(duì)體內(nèi)代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)的影響

研究表明，高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)后，能量供給不足會(huì)激發(fā)糖酵解途徑，致使乳酸、丙酮酸、氨類物質(zhì)等代謝廢物堆積，同時(shí)為滿足機(jī)體能量供應(yīng)，蛋白質(zhì)大量消耗產(chǎn)生一些代謝廢物，如血清尿素氮（BUN））等；骨骼肌細(xì)胞代謝失衡導(dǎo)致血肌酐（SCR））含量上升，乳酸脫氫酶（LDH））活力下降，這些代謝廢物得不到及時(shí)清理就會(huì)誘發(fā)疲勞的產(chǎn)生[96]。Zhan等[97]研究發(fā)現(xiàn)，玉米須總黃酮可通過(guò)降低血乳酸（BLA））含量，減少血清尿素氮的產(chǎn)生同時(shí)提高肝糖原和肌糖原含量發(fā)揮抗疲勞功效。Chunguang等[98]研究表明，紅薯葉總黃酮具有一定的抗疲勞作用，其作用機(jī)制是降低血清尿氮、血乳酸含量，增加肝糖原和肌糖原的儲(chǔ)備量。洪雪娥等[99]研究發(fā)現(xiàn)，薯蔓黃酮可通過(guò)提高力竭運(yùn)動(dòng)后小鼠血清LDH活性，加快血清BUN的代謝，增加肌肉和肝臟糖原含量，進(jìn)而加強(qiáng)抗疲勞效果。

4.3 對(duì)機(jī)體能量代謝的影響

機(jī)體劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)需要消耗大量能量，若供給不足將啟動(dòng)無(wú)氧呼吸進(jìn)行維持，易造成氧化應(yīng)激損傷，為避免由于能量代謝的不足引起機(jī)體保護(hù)性疲勞反應(yīng)的產(chǎn)生，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)[100]，將飼喂含有槲皮素飼料的小鼠進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，借助核磁共振代謝組學(xué)研究游泳后小鼠血清代謝譜的變化，結(jié)果顯示槲皮素能提高力竭小鼠的耐力，加快其能量代謝和脂肪分解。Marco等[101]研究顯示，茶葉中的酚類物質(zhì)中的羥基和劇烈運(yùn)動(dòng)過(guò)程產(chǎn)生的超氧陰離子結(jié)合，促進(jìn)線粒體呼吸鏈能量的產(chǎn)生，增加肌細(xì)胞ATP含量，消除疲勞感。研究還表明[102]，口服兒茶素能加快線粒體電子傳遞速率，增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)VO2max，且具有改善機(jī)體能量代謝潛力。

4.4 對(duì)中樞性疲勞的影響

中樞性疲勞產(chǎn)生歸因于過(guò)量運(yùn)動(dòng)使腦內(nèi)抑制性與興奮性神經(jīng)遞質(zhì)穩(wěn)態(tài)失衡，降低大腦皮層對(duì)外周傳遞神經(jīng)沖動(dòng)，進(jìn)而產(chǎn)生疲勞感。有報(bào)道指出[103]，腦內(nèi)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)γ-氨基丁酸（GABA））含量增加是引發(fā)中樞性疲勞的因素之一，γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2（GAT-2））基因表達(dá)上調(diào)可加速GABA的代謝，有助于消除運(yùn)動(dòng)過(guò)度誘發(fā)的疲勞。唐量等[104]研究表明，SD大鼠連續(xù)灌胃葛根總黃酮7周，并進(jìn)行高強(qiáng)度跑臺(tái)耐力訓(xùn)練，采用基因芯片技術(shù)探討葛根總黃酮抗中性疲勞的分子機(jī)制，結(jié)果顯示，葛根總黃酮可介導(dǎo)調(diào)控GAT-2基因表達(dá)的途徑，加強(qiáng)GAT-2轉(zhuǎn)運(yùn)GABA的效力，從而消除高強(qiáng)度訓(xùn)練誘發(fā)的疲勞。

總之，黃酮類化合物在體內(nèi)發(fā)揮抗疲勞作用可能是單一靶點(diǎn)或多靶點(diǎn)相互作用，其作用機(jī)制需要更深入研究，為其開發(fā)成為抗疲勞保健食品提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

5 展望

黃酮類化合物的醫(yī)療保健功效日益得到人們認(rèn)可，其開發(fā)利用已成為功能性食品、保健品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的重要研究方向。深化黃酮類化合物的抗氧化、抗疲勞活性研究，將有助于進(jìn)一步開發(fā)其在抗運(yùn)動(dòng)性疲勞食品保健方面的應(yīng)用前景，帶來(lái)更大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。此類成分在人體中不能生物合成，只能從食物中獲得，這就使得學(xué)者們更加注重從綠色植物中汲取純度高、活性強(qiáng)的天然黃酮物質(zhì)。盡管黃酮類化合物的研究是一熱點(diǎn)，但其在體內(nèi)代謝吸收機(jī)制、抗疲勞等功能活性機(jī)制及其功能活性成分的確定有待進(jìn)一步完善。

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