閻 秋

（遼陽市衛(wèi)生健康服務(wù)中心，遼寧 遼陽 111000）

軍團菌為誘發(fā)軍團菌病的一類急性呼吸道傳染病病原體，在自然界中廣泛存在。最近幾年中，國內(nèi)很多城市報道存在軍團菌污染的狀況。伴隨著我國城市經(jīng)濟的快速發(fā)展，大型建筑建設(shè)規(guī)模不斷拓展，中央空調(diào)的使用數(shù)量也相應(yīng)提升。當(dāng)下，已有研究指出[1]，空調(diào)系統(tǒng)冷卻水是造成軍團菌擴散與流行的根源。本次研究以13家大型公共場所的中央空調(diào)為檢測對象，檢測軍團菌的污染狀況，初步探究影響其生長繁殖的因素。

1 對象與方法

1.1 研究對象：選擇某市13家大型公共場所的中央空調(diào)為目標(biāo)對象，其中醫(yī)院2家、賓館7家、商場4家。

1.2 主要儀器與試劑：數(shù)字溫濕度計、便攜式濁度計、便攜式pH計、沙氏培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基等。

1.3 方法

1.3.1 現(xiàn)場調(diào)查與收集樣品：實地考察空調(diào)的使用年限、清潔與衛(wèi)生狀況。采集每個采樣點冷卻塔500 mL水樣，現(xiàn)場測量pH值、水體溫度與濁度3個指標(biāo)，后續(xù)操作在實驗室中進行。使用無紡布采集風(fēng)管內(nèi)的積塵，并將其裝到密封袋內(nèi)，為后續(xù)檢查提供樣本原料。細菌、真菌溶液應(yīng)用6級篩孔空氣撞擊式采樣器采集，采樣點通常安設(shè)在與風(fēng)口下風(fēng)方向相距15～20 cm。

1.3.2 軍團菌檢測：取0.1 mL樣本，接種在GVPC平板上，在2.5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。從第3天開始每天觀察可疑菌落產(chǎn)生狀況，對其進行篩選，分別和BCYE、BCYE-Cys培養(yǎng)基接種，于35 ℃溫度下下培養(yǎng)

2 d。針對在BCYE培養(yǎng)基上生長但BCYE-Cys上停止生長的可疑軍團菌，建議開展血清學(xué)檢查工作。

1.3.3 統(tǒng)計學(xué)方法：用SPSS16.0軟件包處理實驗數(shù)據(jù)，（±s）表示計量資料，獨立樣本t檢驗。差異檢測標(biāo)準(zhǔn)：P=0.05。

2 結(jié) 果

2.1 水溫、pH值、濁度調(diào)查結(jié)果：集中空調(diào)冷卻水的水溫為24.3～31.8 ℃，其中27.2～30.1 ℃范圍內(nèi)居多，有5家，占53.85%；pH值為7.40～7.92，其中7.52～7.82區(qū)間居多，共計8家，占61.54%；濁度為3～10 NTU，其中為7 NTU的4家，占30.77%。

2.2 積塵與微生物污染狀況：參與本次調(diào)查研究的13家大型公共場所的集中空調(diào)積塵量為0.2～2.4 g/m2。細菌總數(shù)為2～581 cfu/ cm3，真菌總數(shù)為2～682 cfu/ cm3（表1）。結(jié)合空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)口衛(wèi)生管理的相關(guān)要求：積塵量＜20 g/m2，細菌與真菌總數(shù)均≤500 cfu/ cm3。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)13積塵量均與衛(wèi)生管理相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)匹配；真菌總數(shù)有3家不符，細菌總數(shù)有2家不符。

表1 積塵與微生物污染狀況調(diào)查結(jié)果統(tǒng)計

2.3 軍團菌檢出狀況：采集的水樣經(jīng)由GVPC平板初步分離后，用BCYE、BCYE-Cys培養(yǎng)基對可疑菌落進一步認(rèn)證。將集中空調(diào)冷卻水涂擦在GVPC平板與BCYE平板上有典型菌落生成，但其在BCYE-Cys培養(yǎng)基不生長，經(jīng)血清學(xué)檢查診斷為軍團菌Lp1型，提示該份水樣軍團菌陽性。本次研究中，共5份水樣軍團菌呈陽性，占38.46%。其中空調(diào)設(shè)備使用時間＞5年占57.14%（4/7），＜5年占16.67%（1/6）。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)軟件分析，差異有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

3 討 論

結(jié)合《公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范》（WS-394-2012）中的相關(guān)要求[2]，集中空調(diào)冷凝水與冷卻水，杜絕出現(xiàn)嗜肺軍團菌檢出的狀況。本次研究所選擇的13例應(yīng)用集中空調(diào)的大型公共場所，軍團菌共檢出5家，占38.46%，盡管低于有關(guān)研究，但其也提示在冷卻水系統(tǒng)內(nèi)，軍團菌污染較為嚴(yán)重的問題。

有研究指出，90.0%以上的軍團菌感染是嗜肺軍團菌引發(fā)的，當(dāng)下共發(fā)現(xiàn)嗜肺軍團菌種有16種血清型，其中以I型（LP1）軍團菌肺炎最為常見，占85.0%[3]。誘發(fā)軍團菌感染的病原菌類型多樣，且廣泛分布于自然環(huán)境中，在地區(qū)之間存在一定差異。目前，軍團菌肺炎已被WHO納入至傳染病的行列內(nèi)。在本次研究中，13份水樣有5份分離出軍團菌，檢出率約為38.46%，且所檢出菌株均是LP1型，這與 Lp1型嗜肺軍團菌是軍團菌的主要致病菌的結(jié)論相一致，同時也提升了冷卻水對人體生命健康水平有潛在性危害。

在本次研究中，分析了水溫、pH值、濁度與軍團菌檢出率之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)13份水樣中水溫、pH值較為相近，和軍團菌檢出率無明顯相關(guān)性，而濁度越高，軍團菌檢出率越大，提示冷卻水濁度的變化是干擾軍團菌檢出率的主要因素之一，與報道一致[4]。另外，送風(fēng)口積塵量均符合衛(wèi)生管理的相關(guān)要求，而真菌總數(shù)有3家不符，細菌總數(shù)有2家不符，這提示當(dāng)下采用的常規(guī)空調(diào)清潔方法難以實現(xiàn)有效殺滅軍團菌的目標(biāo)，當(dāng)下我國很多學(xué)者在空調(diào)清潔方法方面做出深入研究。另外，孔田設(shè)備使用年限和軍團菌的檢出率呈正相關(guān)性，這可能和設(shè)備安裝時間長、元器件陳舊化、清潔殺菌工作難度大等相關(guān)[5]。雖然當(dāng)下相關(guān)部門已加大對空調(diào)冷卻水清洗換水方面的管理力度，但未推行消毒干預(yù)措施，進而對軍團菌檢出率產(chǎn)生一定影響，筆者認(rèn)為在空調(diào)設(shè)備日常衛(wèi)生管理過程中，需加強對集水池等設(shè)施的清洗，在有效去除生物膜、沉積物等污物基礎(chǔ)上，也需嚴(yán)格落實消毒工作，進而實現(xiàn)對軍團菌的全面控制。綜上，空調(diào)冷卻水的濁度與空調(diào)使用年限可能是滋生軍團菌的重要因素，應(yīng)加強空調(diào)冷卻水衛(wèi)生管理，并加強設(shè)備使用管理，以將軍團菌污染對公共健康構(gòu)成的危害降至最低水平。