■ 歐陽依娜 李銀江 李衛(wèi)娟 薛 白 王思宇 梁家充 廖錫鴻 洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，四川成都611130；3.永善縣畜牧技術(shù)推廣站，云南昭通657300）

云南半細毛羊是由云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院經(jīng)過多年培育而成的毛肉兼用型新品種，是南方高寒濕潤山區(qū)農(nóng)民重要的經(jīng)濟來源之一，目前人們對其營養(yǎng)代謝規(guī)律知之甚少。鈣是飼糧中必需且含量最多的礦物質(zhì)元素，可以影響體內(nèi)其它營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝[1]。當(dāng)飼糧中鈣供給長期不足或鈣磷比例不當(dāng)可引起羊一系列骨骼疾病、生長發(fā)育遲緩、飼料利用率低、繁殖力下降等情況，尤其妊娠期母羊可導(dǎo)致其難產(chǎn)、胎衣不下、子宮脫出、產(chǎn)后癱瘓甚至死亡[1-2]；相反，當(dāng)飼糧中鈣攝取量超過需要量時，鈣吸收率將隨其添加含量增加而下降，既會降低能量和蛋白質(zhì)的消化利用率，還會導(dǎo)致磷、鎂、鋅等元素發(fā)生代謝紊亂[3-4]。目前，國內(nèi)外研究人員袁浩容等[5]、王勇等[6]、王浩等[7]和Liesegang等[8]探討了不同鈣水平及鈣磷比例飼糧對歐拉型后備母羊、牧巴音布魯克哺乳母羊、陜北白絨山羊斷奶羔羊、東弗里西亞奶羊和薩能奶山羊生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化代謝、血清指標(biāo)及骨代謝的影響。在已知的營養(yǎng)素對能量代謝的影響方面，日糧蛋白質(zhì)水平對動物能量代謝的影響已有較多研究，但尚未見到關(guān)于飼糧不同鈣水平對妊娠期母羊能量代謝影響的研究報道。為加快整個烏蒙山區(qū)和藏區(qū)養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，半細毛羊營養(yǎng)需要量研究將成為提高產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)支撐水平的重點之一。目前針對云南半細毛羊營養(yǎng)需要量的研究才剛剛開始[9-10]，而關(guān)于云南半細毛羊妊娠期能量代謝及其影響因素的研究尚未開展。本試驗旨在探討飼糧中不同鈣水平對云南半細毛羊妊娠期能量代謝的影響，以便充分了解日糧能量水平與鈣水平間的合理搭配，為制定云南半細毛羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)及提高云南半細毛羊養(yǎng)殖效益提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

采用單因素試驗設(shè)計，選擇50只體況良好、體重[(60.95±4.05)kg]相近、年齡一致的經(jīng)產(chǎn)兩胎妊娠期云南半細毛羊為試驗動物，隨機分為Ⅰ～Ⅴ組，每組10個重復(fù)。Ⅰ～Ⅴ組試驗羊分別飼喂5個不同鈣水平的飼糧，妊娠前期和中期鈣水平分別為0.42%、0.45%、0.56%、0.65%和0.82%，妊娠后期鈣水平分別為0.40%、0.50%、0.60%、0.69%和0.87%，日糧其它營養(yǎng)成分保持一致，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1和表2。所有試驗羊進行104 d飼養(yǎng)試驗，其中妊娠第46 d至第60 d為預(yù)試期，妊娠第61 d至第150 d為正試期，包括妊娠第61 d至第90 d為前期、妊娠第91 d至第120 d為中期、妊娠第121 d至第150 d為后期。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗于2017年10月～2018年1月在云南省昆明易興恒畜牧科技有限公司進行。試驗開始前將羊舍地面、羊欄、運動場等打掃干凈和嚴(yán)格消毒，并檢查食槽和水槽有無異常。對試驗羊進行驅(qū)蟲，單欄飼養(yǎng)，每天08:00和17:00各飼喂1次，自由飲水。對妊娠第46 d云南半細毛羊稱重分組，隨后進入14 d預(yù)試期。在預(yù)試期，熟悉試驗羊飼養(yǎng)管理流程，并記錄各組試驗羊的采食量，根據(jù)前1 d的采食量調(diào)整第2 d飼喂量，以確保其自由采食，即飼槽內(nèi)有10%左右的剩料。正試期開始后，每天準(zhǔn)確記錄每只羊的采食量。

表1 妊娠前期和中期試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

表2 妊娠后期試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 消化代謝試驗樣品采集與處理

在妊娠71～75 d（妊娠前期）、101～105 d（妊娠中期）、131～135 d（妊娠后期）分別從各試驗組中選擇體重相近、健康的5只羊置于消化代謝籠中進行消化代謝試驗。采用全收糞尿法，連續(xù)收集5 d，每天稱取并記錄每只羊的排糞量和排尿量，糞樣按20%取樣，平均分成2份，-20℃保存?zhèn)溆茫渲幸环莅?%的比例加入10%稀HCl固氮，用于測定粗蛋白含量，另一份則按3%的比例加入10%甲醛溶液殺滅微生物，用于測定能量及其他營養(yǎng)物質(zhì)的含量；尿樣充分混勻，用紗布過濾后按10%取樣，并加入10%稀HCl，使其pH值低于3.0固氮，于-20℃保存用于測定尿能及其他營養(yǎng)物質(zhì)的含量。飼喂前，每天采集各組混合精料200 g，剩余粗料200 g，-20℃保存用于測定營養(yǎng)成分。

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 飼糧、糞和尿中常規(guī)營養(yǎng)成分測定

粗蛋白質(zhì)含量使用KT200 KjeltecTM型凱氏定氮儀測定(丹麥FOSS)；粗灰分、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷等含量參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[11]測定；能量用氧彈測熱量法測定。

1.4.2 能量代謝

本試驗飼糧攝入總能（GE）、消化能（DE）、代謝能（ME）、GE消化率、GE代謝率和DE代謝率計算公式如下：

其中，甲烷能參照Blaxter等[12]的方法估算，甲烷能占GE百分比（%）=3.67+0.062×GE消化率+0.05×GE消化率-2.37。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2007進行試驗數(shù)據(jù)初步統(tǒng)計，采用SPSS 19.0軟件中ANOVA程序進行單因素方差分析及Duncan's法多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，當(dāng)P＜0.05時為差異顯著，當(dāng)P＜0.01時為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同日糧鈣水平對妊娠前期云南半細毛羊能量代謝的影響(見表3)

由表3可知，妊娠前期0.45%鈣水平組妊娠母羊的總能攝入量極顯著高于0.56%、0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.01），且該組糞能排泄量顯著高于0.42%、0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.05）；0.56%鈣水平組尿能排泄量顯著高于其他4個鈣水平組（P＜0.05）；甲烷能、DE、ME、總能消化率（DE/GE）和總能代謝率（ME/GE）在不同鈣水平組間無顯著差異（P＞0.05）；0.42%鈣水平組消化能代謝率（ME/DE）最高，且極顯著高于0.56%鈣水平組（P＜0.01），而0.42%、0.45%、0.65%和0.82%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05），消化能代謝率隨鈣水平的升高先下降后升高。

表3 不同鈣水平飼糧對妊娠前期云南半細毛羊能量代謝的影響

2.2 不同日糧鈣水平對妊娠中期云南半細毛羊能量代謝的影響（見表4）

從表4可知，妊娠中期母羊的總能攝入量為0.42%鈣水平組最高，但該組與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.56%鈣水平組糞能排泄量極顯著高于0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.01），而其尿能排泄量則顯著高于其他4個鈣水平組（P＜0.05）；0.82%鈣水平組甲烷能、DE、ME、總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率最高，其中其總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率顯著高于0.45%和0.56%鈣水平組（P＜0.05），與0.42%和0.65%組差異不顯著（P＞0.05）。

表4 不同鈣水平飼糧對妊娠中期云南半細毛羊能量代謝的影響

2.3 不同日糧鈣水平對妊娠后期云南半細毛羊能量代謝的影響(見表5)

由表5可知，妊娠后期母羊的總能攝入量和糞能排泄量均為0.50%鈣水平組最高，但組間差異不顯著（P＞0.05）；0.40%鈣水平組的尿能排泄量、甲烷能、DE和ME最高，但與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.40%鈣水平組總能消化率極顯著高于0.50%鈣水平組（P＜0.01），顯著高于0.87%鈣水平組（P＜0.05），且該組總能代謝率顯著高于0.50%和0.87%鈣水平組（P＜0.05），而與0.60%和0.69%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05）；0.60%鈣水平組消化能代謝率最高，但與其它組間差異未達到顯著水平（P＞0.05）。

表5 不同鈣水平飼糧對妊娠后期云南半細毛羊能量代謝的影響

2.4 不同日糧鈣水平對云南半細毛羊整個妊娠期能量代謝的影響（見表6）

如表6可知，整個妊娠期飼糧不同鈣水平顯著或極顯著影響了云南半細毛羊各能量代謝指標(biāo)。0.52%鈣水平組總能攝入量顯著高于0.66%和0.78%鈣水平組（P＜0.05）；0.52%鈣水平組糞能排泄量則顯著高于0.48%、0.78%和0.95%鈣水平組（P＜0.05），而0.48%、0.66%、0.78%和0.95%鈣水平組組間差異不顯著（P＞0.05）；0.66%鈣水平組尿能排泄量最高，顯著高于0.95%鈣水平組（P＜0.05）；0.48%鈣水平組甲烷能、DE和ME顯著高于0.66%鈣水平組（P＜0.05），與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.48%和0.78%鈣水平組總能消化率和代謝率顯著高于0.52%和0.66%鈣水平組（P＜0.05），而0.52%、0.66%和0.95%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05）；0.95%鈣水平組消化能代謝率顯著高于0.66%鈣水平組（P＜0.05），與0.48%、0.52%和0.78%鈣水平組差異不顯著（P＞0.05）。

表6 不同鈣水平飼糧對云南半細毛羊整個妊娠期能量代謝的影響

3 討論

能量是維持動物體內(nèi)一切新陳代謝和生產(chǎn)活動的基礎(chǔ)，近年來大量研究發(fā)現(xiàn)，動物的年齡、品種、性別、飼糧營養(yǎng)水平和結(jié)構(gòu)、環(huán)境因素等均可影響反芻動物的能量代謝[13-15]。研究在不同鈣水平飼糧條件下，云南半細毛羊妊娠母羊?qū)δ芰康睦眯剩瑢ρ芯吭颇习爰毭蛟谔囟ㄉ黼A段的鈣營養(yǎng)需要量及充分利用本地飼料資源配制飼糧具有重要意義。

糞能是反芻動物飼料能量損失最大的部分，當(dāng)飼喂精料時糞能損失為20%～30%，飼喂粗飼料時為40%～50%[16]。本研究中，云南半細毛羊妊娠前期、中期、后期糞能損失平均值分別為44.14%、43.33%和37.39%，其中在妊娠前期和中期，云南半細毛羊的糞能損失占總能的比例處于同一水平（P＞0.05），極顯著高于妊娠后期（P＜0.01）。崔璨[17]研究發(fā)現(xiàn)，杜蒙F1雜交母羊糞能占總能之比在空懷期和妊娠期為35%～43%，而哺乳期僅有27%～34%。樓燦等[18]則報道不同飼養(yǎng)水平杜寒雜交母羊妊娠前期、中期和后期的糞能損失平均值分別為42.52%、37.10%和35.81%，隨著妊娠時間延長，糞能有不同程度的減少，這與本研究發(fā)現(xiàn)的妊娠顯著提高了云南半細毛羊母羊?qū)δ芰康南眯式Y(jié)果一致。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)0.52%和0.66%鈣水平對云南半細毛羊整個妊娠期糞能損失影響最大，其中妊娠前期糞能不易受飼糧鈣水平的影響；妊娠中期0.82%鈣水平組糞能所占總能比例最低，0.56%鈣水平組則最多；而妊娠后期0.40%鈣水平組糞能損失最少，0.50%鈣水平組則最多。樓燦等[18]和張少豐[19]報道了杜寒雜交母羊、薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.85%）糞能損失平均值分別為37.10%和31.13%，分別比本研究的結(jié)果低（6.22%和12.19%）；本研究結(jié)果與樓燦等[18]和李蕓等[20]關(guān)于杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.83%）對糞能損失的影響相似。

反芻動物的尿能損失則較穩(wěn)定，飼料中的蛋白質(zhì)水平、氨基酸平衡狀況及有害成分含量等因素均可影響尿氮的排泄量，從而增加或減少尿能損失，最終促使機體代謝能值發(fā)生改變。通常反芻動物尿能損失為4%～5%[16]。李蕓等[20]研究發(fā)現(xiàn)，不同飼養(yǎng)水平道寒母羊尿能占總能的比例妊娠前期為1.47%～1.89%，妊娠后期為1.69%～2.49%。馬鐵偉等[21]研究表明，杜湖雜交F1代母羊妊娠前期、中期和后期的尿能損失分別為3.98%、3.55%和4.26%。樓燦等[18]則發(fā)現(xiàn)杜寒雜交母羊妊娠前期、中期和后期的尿能損失分別為3.05%、3.49%和3.00%。本試驗中，云南半細毛羊妊娠前期、中期和后期尿能損失平均值分別為1.18%、1.84%和1.20%，遠低于其他學(xué)者的報道。本研究還發(fā)現(xiàn)，0.66%鈣水平對云南半細毛羊整個妊娠期尿能損失影響最大，其中隨著飼糧中鈣水平不斷升高，妊娠前期和中期尿能呈先升高后降低的趨勢，0.56%鈣水平組尿能所占總能比例顯著高于其它4組，其它4組間差異不顯著，樓燦等[18]和張少豐[19]報道了杜寒雜交母羊、薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.85%）尿能損失平均值分別為3.49%和4.38%，分別比本研究的結(jié)果高1.65%和2.54%；而妊娠后期提高飼糧鈣水平并不能顯著增加尿能排出量，即飼糧Ca水平不影響云南半細毛羊妊娠后期的尿能排泄率。

反芻動物由于瘤胃發(fā)酵過程會釋放甲烷，以甲烷形式損失的能量占飼糧總能的6%～10%[22-23]。甲烷的排放量受到采食量[24]、飼糧精粗比[25-26]、碳水化合物含量等因素的影響。云南半細毛羊妊娠前期、中期、后期甲烷占總能平均值為7.55%、7.65%、8.31%，妊娠后期甲烷能極顯著高于前期和中期，可能與妊娠后期營養(yǎng)物質(zhì)消化率增高有關(guān)。該結(jié)果與空懷期陜北絨山羊（7.78%）[27]、杜泊雜交羊（7.64%～8.64%）[28]的研究結(jié)果一致，但比限飼杜湖雜交F1代妊娠期母羊（7.42%～15.43%）[21]和杜寒雜交妊娠中、后期母羊（10.68%～11.50%）[18]的研究結(jié)果略低。本研究中云南半細毛羊整個妊娠期甲烷能排放量受0.48%和0.78%鈣水平飼糧影響最大，其中飼糧鈣水平對妊娠前期甲烷能排放量影響不顯著，妊娠中期、后期分別以0.82%、0.40%鈣水平組甲烷能占總能比例最高，而0.56%和0.50%鈣水平組甲烷能損失最少。樓燦等[18]報道的杜寒雜交母羊妊娠中、后期飼糧適宜鈣水平（0.80%）甲烷能損失平均值分別為11.15%和11.00%，均比本研究的結(jié)果高3.50%和2.69%；張少豐[19]報道了薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平0.85%甲烷能損失平均值為4.90%，比本研究的結(jié)果低2.75%；李蕓等[20]研究發(fā)現(xiàn)道寒雜交母羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平0.83%甲烷能損失平均值為14.49%，比本研究的結(jié)果高6.18%；本研究結(jié)果與王惠[29]報道的陜北白絨山羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.50%）對甲烷能損失影響相似。

本研究中，云南半細毛羊在妊娠前期、中期、后期的總能消化率分別為54.66%～57.33%、54.86%～58.21%和61.17%～64.46%，總能代謝率分別為46.15%～48.38%、45.14%～48.84%和51.75%～54.53%，消化能代謝率則分別為83.79%～84.60%、82.26%～83.91%和84.53%～85.02%。結(jié)果表明，隨著妊娠周期的延長，總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率逐漸增加，這可能與妊娠后期胎兒迅速生長及母羊哺乳期所需營養(yǎng)儲備有關(guān)，使其能量需要量不斷增大以滿足機體的基礎(chǔ)代謝。張崇玉等[30]報道了大尾寒羊妊娠中期總能消化率和代謝率分別為66.6%和54.6%，妊娠后期則分別為68.5%和56.2%。樓燦等[18]研究發(fā)現(xiàn)杜寒雜交母羊在妊娠40、100、130 d時總能消化率分別為57.05%～58.43%、61.26%～64.53%和63.29%～66.49%。馬鐵偉等[21]研究發(fā)現(xiàn)杜湖雜交母羊在妊娠40、100、130 d時總能消化率分別為51.18%～64.25%、60.86%～66.17%、63.20%～67.36%。以上研究報道與本試驗中妊娠顯著提高了云南半細毛羊母羊?qū)︼暭Z能量的消化利用趨勢相一致。

同時，低鈣水平（0.48%）飼糧顯著提高了云南半細毛羊整個妊娠期的總能消化率和總能代謝率，而高鈣水平（0.95%）飼糧則顯著提高了其消化能代謝率，其中由于糞能和尿能的減少，妊娠前期0.42%鈣水平飼糧提高了云南半細毛羊消化能代謝率，但沒有影響其總能消化率和總能代謝率，該結(jié)果與樓燦等[18]和李蕓等[20]報道的杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.57%、0.48%）對總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率影響相似；張少豐[19]報道薩阿雜交綿羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.85%）總能消化率和總能代謝率平均值分別為67.2%和58.19%，王惠[29]關(guān)于陜北白絨山羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.50%）總能消化率和總能代謝率平均值分別為65.31%和54.67%，均比本研究相近鈣水平的結(jié)果高。同時，妊娠中期0.82%鈣水平飼糧則顯著提高了云南半細毛羊的總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率，該結(jié)果與樓燦等[18]研究的杜寒雜交母羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率相似；張少豐[19]報道了薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.85%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率平均值分別為68.69%、59.29%和86.34%，均比本研究相近鈣水平（0.82%）的結(jié)果高。此外，妊娠后期0.40%鈣水平飼糧提高了云南半細毛羊的總能消化率和總能代謝率，且總能消化率和總能代謝率隨飼糧添加鈣水平的升高有降低趨勢，這與樓燦等[18]、李蕓等[20]和王惠[29]報道的杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊和陜北白絨山羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.83%和0.50%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率研究結(jié)果一致，但云南半細毛羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平偏低。

綜上所述，在云南半細毛羊妊娠前期、中期、后期，飼糧中分別含0.42%、0.82%、0.40%鈣時對能量利用最有利，此時代謝能占總能的比例最高。

4 結(jié)論

①本試驗條件下，云南半細毛羊妊娠前期、中期、后期對能量的平均消化率分別為54.66%～57.33%、54.86%～58.21%和61.17%～64.46%（DE/GE），對能量的代謝率分別為46.15%～48.38%、45.14%～48.84%和 51.75%～54.53%（ME/GE），或 83.79%～84.60%、82.26%～83.91%和84.53%～85.02%（ME/DE）。

②云南半細毛羊妊娠前期、中期、后期母羊飼糧中分別含0.42%、0.82%、0.40%鈣時能量利用率最佳。