張春瑋，張元瑞，龐 恒，王亭亭，李克鑫，許冠龍，李克欽，韓明遠，彭 軍，劉建柱

（1. 山東農業(yè)大學動物科技學院，山東泰安 271018；2. 山東德信生物科技集團，山東惠民 251700；3. 中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，農業(yè)農村部獸藥評審中心，北京 100081；4. 濟南鑫寶星動物藥業(yè)有限公司，山東濟南 250022）

副豬嗜血桿菌病是由副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis，HPS）引起的豬多發(fā)性漿膜炎和關節(jié)炎，又稱革拉澤氏病（Gl?sser’s disease），其臨床癥狀主要表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難、消瘦、跛行和被毛粗亂等[1]。2周齡到4月齡間的所有豬群均可感染發(fā)病，但最常見于5～8周齡的保育仔豬，發(fā)病率一般為10.00%～15.00%，嚴重時死亡率可達50.00%[2]。2018年7月20日，山東省泰安市某豬場發(fā)生HPS感染病例，現(xiàn)從臨床癥狀、剖檢病變及實驗室診斷等方面對該病例進行總結。

1 發(fā)病情況

該豬場總飼養(yǎng)量為500頭。畜主于2018年7月13日從市場上購進仔豬250頭，平均體質量為35 kg。仔豬購進3 d后開始發(fā)病，初期表現(xiàn)腹瀉。畜主隨即在飼料內拌入氟苯尼考，并給予病仔豬肌內注射青霉素G鈉，但未見效果。7月18日上午，畜主自行對120頭仔豬接種了3頭份豬瘟細胞苗，不但沒有控制病情，反而使豬群發(fā)病率和死亡率明顯增加，隨后于7月20日來診。

本次疫情共發(fā)病67頭、死亡48頭，發(fā)病率為26.80%（67/250），死亡率為19.20%（48/250），病死率為71.64%（48/67）。其中，來診前發(fā)病豬54頭、死亡35頭，來診后新發(fā)13頭、死亡13頭。

2 臨床癥狀

病仔豬精神沉郁，食欲不振；呼吸困難，可視黏膜發(fā)紺，咳嗽；持續(xù)發(fā)燒，呈現(xiàn)弛張熱，體溫為40.5～42 ℃；體況消瘦，被毛粗亂，皮膚貧血、蒼白，腹圍增大（圖1）；有的關節(jié)腫脹，站立不穩(wěn)，行動搖擺，出現(xiàn)跛行。

圖1 病豬皮膚蒼白、腹圍膨大

3 剖檢變化

尸體消瘦，出現(xiàn)嚴重的心包炎、胸膜炎和腹膜炎及輕度關節(jié)炎；全身淋巴結腫大、出血（圖2-A），切面多汁，呈“大理石樣”花紋；心包內有多量渾濁積液，心包膜增厚、粗糙，心外膜有大量纖維素性滲出物附著，形成“絨毛心”（圖2-B）；肺間質水腫，肺與胸膜粘連，胸腔內有多量纖維素性滲出物；腹腔內有大量淡黃色渾濁積液，并出現(xiàn)大量纖維素性滲出物，腹腔器官嚴重粘連（圖2-C、圖2-D），腸系膜上有大量纖維素滲出物，腸系膜淋巴結變化不明顯；腎臟腫大，有出血點；肝、脾腫大，被膜增厚、出血，兩臟器均被多量纖維素性滲出物包裹，脾臟邊緣可見隆起的梗死性血泡（圖2-E、圖2-F）；軟腦膜充血、淤血和輕度出血，腦回變得扁平，蛛網膜腔內積蓄有纖維素性、化膿性滲出物而致腦髓液渾濁，腦膜與頭骨內膜以及腦實質之間粘連。

圖2 病例剖檢變化

4 實驗室診斷

無菌操作，將肝臟病料接種于TSA培養(yǎng)基（添加NAD和小牛血清）進行細菌分離培養(yǎng)；1～2 d后，挑取菌落做革蘭染色、鏡檢。將該單菌落純培養(yǎng)后進行16s RNA PCR擴增和測序。將單菌落液體培養(yǎng)后涂板，進行常見藥物的藥敏試驗。同時，按照蔡旭旺等[3]報道的方法，制備分離菌株的血清學分型抗原，以HPS各血清型（1～15）標準血清（山東省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所惠贈），對分離株進行瓊脂擴散試驗，以確定該分離株的血清型。

細菌分離培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)：分離的細菌菌落單一，均為灰白色的光滑型小菌落；革蘭染色陰性，呈現(xiàn)球桿狀、短桿狀或絲狀細小桿菌。PCR擴增產物大小為1 470 bp，與目的片段大小相符。對PCR產物測序結果進行Blast分析，發(fā)現(xiàn)其與HPS NCTC4557株同源性為99.00%。藥敏試驗結果顯示，該分離菌對頭孢噻呋、恩諾沙星、多西環(huán)素、阿莫西林、氟苯尼考的抑菌圈均大于15 mm，屬于高敏藥物，其中對頭孢噻呋和恩諾沙星抑菌圈大于20 mm，屬于極敏藥物（表1）。瓊脂擴散試驗結果顯示，本次分離菌株為HPS血清4型。

表1 藥敏試驗結果

5 病例防治

在飼料內拌入5.00%阿莫西林可溶性粉進行預防性投藥并添加維生素C、電解質、黃芪多糖，連續(xù)喂服7 d；同時帶豬使用0.25%三氯異氰尿酸鈉溶液進行噴灑消毒，對豬舍外環(huán)境使用2.00%的火堿溶液和5.00%的石灰乳混合噴灑，進行全面噴灑消毒。對病豬進行隔離治療，按體質量4 mg/kg，肌內注射頭孢噻呋鈉，每天1次，連用10 d。

6 討論

6.1 發(fā)病原因

本病病因主要是應激因素。長途運輸、轉群、飼料更換、環(huán)境驟變、飼養(yǎng)密度過大等復雜的應激因素降低了仔豬的抵抗力，從而引發(fā)HPS感染。環(huán)境衛(wèi)生差，每天不能及時清理圈舍、圈舍環(huán)境潮濕等，極易導致細菌在豬舍長時間存留，也可誘發(fā)或加重該病。

6.2 治療效果

根據藥敏試驗結果，選用極敏藥物頭孢噻呋進行治療，因此極大提高了臨床用藥的有效性，取得了較好的治療效果，治療半個月后，豬群疫情已趨于穩(wěn)定。根據藥敏試驗結果合理用藥極大避免了因濫用藥物而帶來的細菌耐藥性和抗藥性問題，對于該病治療非常有利。藥敏試驗應做到簡便易行，可在第一時間保證用藥正確，從而及時有效控制病情；藥敏試驗中的藥物選擇應合理，可選擇對某類細菌有效的藥物進行試驗，一類藥物選擇一種代表藥物即可，這樣可提高試驗效率和用藥指導效率。

6.3 防控要點

一要加強飼養(yǎng)管理，提高豬群營養(yǎng)水平，降低飼養(yǎng)密度，實行自繁自養(yǎng)、全進全出的飼養(yǎng)模式[4]；二要做好生物安全工作，保證豬舍的衛(wèi)生與清潔，嚴格執(zhí)行定期消毒制度，保障空氣流通；三要減少各種應激，如氣溫突變時，做好降暑或保暖工作，盡量避免異地調運以及飼料和豬舍的突然更換等；四要合理選擇疫苗，因HPS有多種血清型，所以免疫時最好使用多價菌苗進行免疫[5]；五要根據藥敏試驗結果選用藥物，可交替使用有效抗菌藥物，并配以中藥制劑[6]，避免細菌抗藥性出現(xiàn)；六要堅持對癥治療，通過藥物清除纖維素性滲出物，緩解癥狀，控制豬群死亡率，同時在飼料中添加增強免疫力藥物，如維生素C、黃芪多糖、左旋咪唑、?；撬岬?，這樣可有效提高預防和治療效果。