李照偉，劉 霞，徐春志，湯德元

（1. 貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550008；2. 貴陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550081；3. 貴州大學(xué)，貴州貴陽 550025）

布魯氏菌病（以下簡稱布?。┦怯刹剪斒暇鸬穆匀双F共患傳染病，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定的須通報(bào)動(dòng)物疫病，是我國的二類動(dòng)物疫病，并列入《國家中長期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》優(yōu)先防治病種。病牛及帶菌牛是牛布病的主要傳染源，對人和其他健康家畜危害極大[1]。該病主要侵害奶牛生殖器官，可引起母牛流產(chǎn)，公畜睪丸炎及附睪炎等，對奶牛生產(chǎn)性能及養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展造成了較大威脅[2-3]。奶牛布病還存在食源性感染的安全隱患，嚴(yán)重影響經(jīng)濟(jì)發(fā)展和公共衛(wèi)生安全[4]。近年來，奶牛及其產(chǎn)品的頻繁流通致使奶牛布病傳播風(fēng)險(xiǎn)的控制和消除難度加大。本調(diào)查對2015—2017年在貴州省采集的非布病免疫奶牛血清樣品進(jìn)行布魯氏菌檢測，旨在評估該病3年間的流行情況和發(fā)展趨勢，為有效防控該病提供依據(jù)。

1 材料

1.1 血清樣品

2015—2017年隨機(jī)采集全省148個(gè)場次的25 910份非布病免疫的奶牛血清，-20 ℃保存?zhèn)溆?。樣品采集覆蓋全省所有奶牛養(yǎng)殖場點(diǎn)。

1.2 檢測試劑盒

布病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原、陽性血清，布病試管凝集試驗(yàn)抗原、陽性血清：均購自青島易邦生物工程有限公司。

1.3 儀器設(shè)備

生物安全柜（Thermo Fisher 1300Ⅱ級A2型）、移液器（Eppendorf）、恒溫培養(yǎng)箱（北京利康達(dá)圣DH500）、水浴鍋（上海精科華瑞YLE-1000）等。

2 方法

按照《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T 18645—2002）[5]進(jìn)行操作與判定，先采用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBT）初篩，再用試管凝集試驗(yàn)（SAT）對陽性樣品進(jìn)行復(fù)檢。

3 結(jié)果與分析

3.1 總體檢測情況

隨機(jī)采集全省148個(gè)場次的25 910份奶牛血清樣品，通過RBT初篩和SAT復(fù)檢，共檢測出陽性血清樣品36份，陽性率為0.14%（36/25 910）。

3.2 時(shí)間分布

2015—2017年，分別檢出陽性血清樣品27、5、4份，個(gè)體陽性率分別為0.37%（27/7 308）、0.07%（5/7 407）、0.04%（4/11 195），個(gè)體陽性率呈下降趨勢（表1）；分別檢出陽性群1、1和4個(gè)，陽性場群數(shù)量呈增多趨勢，且同一個(gè)場連續(xù)3年檢測為陽性群。

表1 2015—2017年奶牛布病感染抗體檢測情況

3.3 群間分布

對所采集的樣品按照規(guī)模場和散養(yǎng)戶進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，發(fā)現(xiàn)規(guī)模養(yǎng)殖和散養(yǎng)奶牛布病陽性率存在差異，陽性樣品全部來自規(guī)模場，且3年間均檢出陽性（表2），說明規(guī)模場奶牛仍存在較高的布病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

4 討論

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，貴州省奶牛布病個(gè)體陽性率逐年降低，其中2016年比2015年下降了5.29個(gè)百分點(diǎn)，下降幅度較大，表明該省的布病感染程度得到一定程度的控制。但每年均檢出布病陽性，提示貴州省奶牛布病防控雖然有一定成效，但仍然存在發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。

2015—2017年同一個(gè)場群連續(xù)檢出陽性，2017年陽性群體又增加了3個(gè)，群體陽性數(shù)量有增多趨勢，提示連續(xù)3年檢出陽性的場群存在擴(kuò)散布病風(fēng)險(xiǎn)，需要盡快制訂方案，實(shí)施布病凈化，同時(shí)也表明貴州省在布病防控工作中還有漏洞，需要進(jìn)一步加強(qiáng)。

表2 2015—2017年不同場點(diǎn)奶牛布病檢測情況統(tǒng)計(jì)

從不同場點(diǎn)的監(jiān)測結(jié)果可以看出，3年間貴州省自然感染奶牛均來自規(guī)模場，說明規(guī)模飼養(yǎng)場可能是該病傳播的一個(gè)風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，因此應(yīng)加強(qiáng)規(guī)模場奶牛的飼養(yǎng)管理，構(gòu)建良好的生物安全環(huán)境，加大監(jiān)測和防控力度，尤其是做好引種管理工作，從源頭上控制布病的感染和傳播[6]。本次檢測未在散養(yǎng)戶奶牛中檢出布病陽性，這可能與樣品采集數(shù)量較小有關(guān)，對其防控不能忽視。

本次調(diào)查由于客觀原因，未能按照流行病學(xué)調(diào)查方法進(jìn)行采樣設(shè)計(jì)，因此該調(diào)查結(jié)果并不能真實(shí)反映貴州省奶牛布病流行情況，但可在一定程度上反映出其流行趨勢和特點(diǎn)，對于貴州省布病防控具有參考意義。