趙勝杰，趙攀登，靳 冬，王帥彪，劉光輝，趙美雪，郭洛生，班付國

（1. 河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南鄭州 450000；2. 河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院，河南鄭州 450046；3. 丹俄農(nóng)業(yè)技術(shù)咨詢（鄭州）有限公司，河南鄭州 450000）

隨著我國養(yǎng)豬業(yè)的迅猛發(fā)展，生豬流動(dòng)日益頻繁，豬群疫病形勢(shì)也日趨復(fù)雜。除場外病原的入侵外，場內(nèi)病原的循環(huán)隱形感染也是豬群疫病突發(fā)或持續(xù)發(fā)生的主要因素之一[1]。屠宰場作為待宰生豬以及人員和車輛的集散地，是動(dòng)物疫病傳播的重要環(huán)節(jié)。通過對(duì)屠宰場生豬進(jìn)行病原學(xué)監(jiān)測，可以了解健康豬群的病原隱性感染情況，對(duì)養(yǎng)殖環(huán)節(jié)的豬病防控具有參考意義。為此，2018年針對(duì)豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、豬細(xì)小病病毒（PPV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬圓環(huán)病毒3型（PCV3）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）以及副豬嗜血桿菌（HPS）和弓形蟲（TP）等11種國內(nèi)常見豬病病原，以河南省屠宰場的屠宰豬群為研究對(duì)象，按季度和區(qū)域抽樣進(jìn)行常見豬病病原檢測，為屠宰檢疫和動(dòng)物疫病防控提供建議。

1 材料與方法

1.1 采樣設(shè)計(jì)

將河南省2018年所有備案的217個(gè)A類屠宰場作為目標(biāo)群，采用發(fā)現(xiàn)疫病的抽樣策略，設(shè)置信水平95%、試驗(yàn)敏感性95%、預(yù)定流行率50%，每個(gè)季度至少隨機(jī)抽取5個(gè)屠宰場；每個(gè)屠宰場日平均屠宰量約1 000頭，采用估計(jì)流行率的抽樣方法，設(shè)置信水平95%、可接受誤差5%、預(yù)期流行率2%，每個(gè)屠宰場、每季度至少隨機(jī)抽取31份樣品。將全省分為豫東、豫西、豫南、豫北和豫中5個(gè)區(qū)域，抽樣時(shí)每季節(jié)、每個(gè)區(qū)域至少抽取1個(gè)屠宰場。2018年，從河南省5個(gè)區(qū)域共抽取屠宰場29個(gè)，采集豬的扁桃體和淋巴結(jié)組織樣品[2-3]，共采集972頭份。

1.2 檢測試劑

核酸提取試劑盒：購自蘇州天隆生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)為E01180702C1；FMDV通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒、PPV通用型實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒和高、低致病性PRRSV雙重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒：購自洛陽萊普生信息科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)分別為 P180719、P20171205和 CP18072301；CSFV野毒株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測試劑盒：購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)為CSFVW20180110P；PCV2實(shí)時(shí)熒光PCR檢測試劑盒：購自哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號(hào)為PC2 20180208P；PEDV/TGEV/輪狀病毒核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）和TP核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）：購自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)分別為20171227和20171222；PRV實(shí)時(shí)二重?zé)晒釶CR檢測體系、PCV3熒光PCR檢測體系和HPS實(shí)時(shí)熒光PCR檢測體系：依據(jù)河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心研發(fā)標(biāo)準(zhǔn)配制。

1.3 檢測方法

將同一頭豬的扁桃體和淋巴結(jié)混樣處理后，分別按試劑盒說明書或所依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行CSFV、PRRSV、FMDV、PRV、PPV、PCV2、PCV3、TGEV、PEDV、HPS和TP病原學(xué)檢測。

1.4 數(shù)據(jù)分析

將檢測結(jié)果錄入Excel，按季節(jié)和區(qū)域進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，找出不同季節(jié)、不同區(qū)域屠宰場生豬常見病原的分布特點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

共檢測樣品972頭份，未檢出CSFV和FMDV，PCV2和HPS檢出率較高，分別為64.81%和46.19%，PRV、TGEV、PEDV和TP檢出率較低，均低于1.00%。河南省屠宰場生豬常見病原檢測情況見表1。

表1 2018年河南省屠宰場生豬常見病原檢測情況

2.2 時(shí)間分布

對(duì)不同季節(jié)樣品的檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)：各季節(jié)檢出的病原種類和檢出率有一定差異，如 PPV、PCV2、PCV3、HPS 4種病原一年四季均有檢出，其中PCV2、HPS秋季檢出率最高（87.60%、70.00%），春季最低（46.23%、11.15%），PRRSV、PRV、TEGV、PEDV、TP等5種病原檢出情況呈現(xiàn)一定季節(jié)性，檢出率較低。河南省屠宰場生豬常見病原檢出結(jié)果時(shí)間分布見表2。

表2 2018年各季節(jié)河南省屠宰場生豬常見病原檢出情況

2.3 空間分布

按地理位置將河南省分為豫東、豫西、豫南、豫北和豫中5個(gè)區(qū)域。檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示：PPV、PCV2、PCV3、HPS等4種病原分布較廣，而PRRSV、PRV、TEGV、PEDV、TP等5種病原呈現(xiàn)一定的區(qū)域分布特征，檢出率也偏低。不同區(qū)域的常見病原檢出率統(tǒng)計(jì)見表3。

表3 2018年河南省不同地區(qū)屠宰場生豬常見病原檢出結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3 討論

2018年河南省生豬屠宰量約為2 251.42萬頭，其中96%來自本省養(yǎng)殖企業(yè)，因此本次調(diào)查結(jié)果可在一定程度上反映出本地常見豬病病原流行情況。本次調(diào)查共檢測樣品972頭份，發(fā)現(xiàn)PPV、PCV2、PCV3、HPS等4種病原的季節(jié)分布和區(qū)域分布均較廣，檢出率較高，尤其是PCV2和HPS，分別為64.81%和46.19%，這與趙勝杰等[7]2017年河南省病死豬常見病原分布調(diào)查的結(jié)果一致，說明在河南省豬群中這4種病原流行較為普遍。其他學(xué)者的研究[3-6]也證明，在屠宰豬中，PCV2的帶毒情況最嚴(yán)重。盡管本次調(diào)查未檢出CSFV和FMDV，但這不能說明本地沒有這些病原流行，因?yàn)楸敬螜z測的僅是屠宰的臨床健康豬群，而且本次調(diào)查的抽樣也可能存在誤差。

待宰豬群各種病原的檢出情況與當(dāng)前相應(yīng)疫病的流行形勢(shì)是相對(duì)應(yīng)的。由于監(jiān)測發(fā)現(xiàn)的陽性高峰期早于臨床發(fā)病高峰期，因此監(jiān)測結(jié)果存在一定的示病意義[8]。本次調(diào)查結(jié)果顯示，部分病原具有一定的季節(jié)性和區(qū)域性流行特點(diǎn)，如PRRSV、PRV、TEGV、PEDV、TP等。生豬養(yǎng)殖企業(yè)可依據(jù)當(dāng)?shù)匾卟×餍星闆r，在不同季節(jié)采取相應(yīng)的防控措施，以減少豬群發(fā)病，在做好日常監(jiān)測的同時(shí)，做好宰前檢疫，必要時(shí)開展實(shí)驗(yàn)室檢測，以保障屠宰生豬健康。

雖然病原學(xué)檢測陽性不等同于臨床發(fā)病，但長途運(yùn)輸產(chǎn)生的應(yīng)激和屠宰場內(nèi)不同來源豬群的交集，可使待宰生豬潛在傳播或暴發(fā)動(dòng)物疫病的風(fēng)險(xiǎn)加大[2]。屠宰場應(yīng)嚴(yán)格生豬收購管理，加強(qiáng)人員和車輛的洗消，避免引入染疫生豬并造成疫病散播。動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)和動(dòng)物疫病防控機(jī)構(gòu)應(yīng)加強(qiáng)對(duì)待宰生豬重大動(dòng)物疫病和人獸共患病的監(jiān)測，避免帶毒豬肉及其產(chǎn)品流入市場。

4 結(jié)論

本調(diào)查以河南省所有屠宰豬群為研究對(duì)象，采用橫斷面研究方法，在不同季節(jié)、不同區(qū)域開展常見豬病病原攜帶情況調(diào)查。調(diào)查發(fā)現(xiàn)：PPV、PCV2、PCV3、HPS 4種病原分布范圍較廣，流行較為嚴(yán)重，需重點(diǎn)加強(qiáng)防控；PRRSV、PRV、TEGV、PEDV、TP 5種病原分布呈現(xiàn)一定季節(jié)性和區(qū)域性，需針對(duì)不同季節(jié)和不同區(qū)域，制定相應(yīng)防控措施。