李柏良，趙 莉，王成鳳，靳 妲，丁秀云,2，劉 飛,*，霍貴成

（1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150030；2.廣州基迪奧生物科技有限公司，廣東 廣州 510000）

嗜熱鏈球菌是非致病性乳酸菌，常與德氏乳桿菌保加利亞亞種組合使用，作為酸奶的發(fā)酵劑[1-2]。部分嗜熱鏈球菌可以產(chǎn)生胞外多糖（exopolysaccharides，EPS），EPS分泌到培養(yǎng)基中，其不僅可以改善發(fā)酵乳制品的流變學(xué)和感官特性[3-4]，還具有諸多的益生特性，如抗氧化性和抗腫瘤活性、降低血壓和血糖、改善腸道菌群、抑制致病菌和調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等[5-9]。因此，能夠產(chǎn)EPS的嗜熱鏈球菌菌株在發(fā)酵方面具有更大的價(jià)值。

EPS的合成過(guò)程分為前體物質(zhì)糖核苷酸的合成及EPS基因簇合成EPS兩個(gè)階段。單糖、雙糖作為微生物主要利用的碳源，經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)至胞內(nèi)，糖類物質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)方式一般有3 種：磷酸烯醇式丙酮酸依賴磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)（phosphotransferase system，PTS）、ABC型糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)以及糖滲透[10]。其中PTS為主要的轉(zhuǎn)運(yùn)方式，由負(fù)責(zé)糖類物質(zhì)磷酸化的可溶性磷酸載體蛋白HPr、能量耦合蛋白酶EI以及膜結(jié)合的具有糖特異性的通透酶EII組成。通常EII由3 個(gè)功能性的亞單位EIIA、EIIB與EIIC構(gòu)成，轉(zhuǎn)運(yùn)甘露糖的PTS則由EIIA、EIIB、EIIC與EIID組成。根據(jù)序列及結(jié)構(gòu)的特征，EII可以分為乳糖家族、葡萄糖家族、甘露糖家族及甘露醇家族。在糖轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中，如果某一PTS中的EII因缺失亞基而不完整，是不可以通過(guò)另一個(gè)非同家族的PTS的EII替代其功能。轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)的糖經(jīng)過(guò)一系列的酶促反應(yīng)，最后形成糖核苷酸，作為合成EPS的活性前體[11]。

參與指導(dǎo)EPS重復(fù)單元合成、鏈長(zhǎng)、聚合與輸出的基因常成簇存在，稱之為EPS基因簇。異型多糖重復(fù)單元的形成通過(guò)引導(dǎo)糖基轉(zhuǎn)移酶轉(zhuǎn)移相應(yīng)的糖核苷酸到異戊二烯醇磷酸酯（脂載體）上，在其他的糖基轉(zhuǎn)移酶作用下，高度特異性地轉(zhuǎn)移相應(yīng)的糖核苷酸形成重復(fù)單元的主、側(cè)鏈。已經(jīng)形成的重復(fù)單元經(jīng)翻轉(zhuǎn)酶從胞內(nèi)輸出至細(xì)胞外膜，隨后經(jīng)聚合酶聚合成完整的EPS，輸出至細(xì)胞膜外[12-13]。

嗜熱鏈球菌KLDS3.1012是從中國(guó)新疆傳統(tǒng)發(fā)酵酸奶中分離出來(lái)的，由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室保藏。前期實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)該菌株具產(chǎn)黏性能強(qiáng)及所產(chǎn)酸奶品質(zhì)優(yōu)良等特點(diǎn)，適合于制備高品質(zhì)直投式發(fā)酵劑[14]。為更加深入分析該菌株合成ESP的遺傳基礎(chǔ)，本研究首先通過(guò)二代測(cè)序技術(shù)對(duì)該菌株進(jìn)行基因組測(cè)序，基于生物信息學(xué)分析該菌株的糖代謝能力及EPS基因簇，同時(shí)利用API 50CH測(cè)定該菌株的糖發(fā)酵情況，并采用高效離子交換色譜法測(cè)定EPS的單糖組成。為研究該菌株EPS遺傳基礎(chǔ)與EPS結(jié)構(gòu)之間關(guān)系及后續(xù)更加合理地應(yīng)用該菌株提供了理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

嗜熱鏈球菌KLDS3.1012由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室工業(yè)微生物菌種保藏中心（KLDSDICC）提供，且通過(guò)16S rRNA基因測(cè)序鑒定。

M17肉湯培養(yǎng)基 青島高科園海博生物技術(shù)有限公司；細(xì)菌基因組提取試劑盒 北京天根生物技術(shù)有限公司；API 50CH 法國(guó)梅里埃公司；DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B填料 美國(guó)GE醫(yī)療生命科學(xué)公司；無(wú)水乙醇 天津市天力化學(xué)試劑有限公司；三氯乙酸、三氟乙酸 天津市大茂化學(xué)試劑廠；重蒸苯酚北京博奧拓達(dá)科技有限公司；濃硫酸 哈爾濱理工化學(xué)試劑有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

LDZF-50KB-II立式蒸汽滅菌器 上海申安醫(yī)療器械廠；CJ-2D超凈工作臺(tái) 天津泰斯特儀器有限公司；DHP-927型電熱恒溫培養(yǎng)箱 上海一恒科技有限公司；透析袋 北京索萊寶生物科技有限公司；蛋白純化儀美國(guó)GE醫(yī)療生命科學(xué)公司。

1.3 方法

1.3.1 菌株的活化及基因組提取

將甘油保藏的菌株KLDS3.1012以2%的體積分?jǐn)?shù)接種于M17液體培養(yǎng)基，42 ℃培養(yǎng)24 h，連續(xù)轉(zhuǎn)接兩次，第3次培養(yǎng)12 h后用于基因組提取。按照細(xì)菌基因組提取試劑盒說(shuō)明書的步驟提取菌株KLDS3.1012的基因組。

1.3.2 全基因組測(cè)序及組裝

利用Illumina HiSeq（2×100 bp配對(duì)末端文庫(kù)）和Illumina MiSeq（2×250 bp配對(duì)末端文庫(kù)）平臺(tái)組合測(cè)序技術(shù)對(duì)菌株KLDS3.1012進(jìn)行基因組測(cè)序。通過(guò)進(jìn)行質(zhì)量控制和數(shù)據(jù)過(guò)濾，利用SOAPdenovo 2.0對(duì)所有有效數(shù)據(jù)（Clean Data）進(jìn)行組裝[15]。

1.3.3 基因組注釋

采用NCBI原核生物基因組注釋流程（prokaryotic genome annotation pipeline，PGAP，https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK174280/）進(jìn)行基因預(yù)測(cè)及注釋?；蚪M中蛋白序列通過(guò)WebMGA網(wǎng)站進(jìn)行COG（Cluster of Orthologous Group）注釋[16]。

1.3.4 生物信息學(xué)分析

利用CGView Server構(gòu)建基因組圖譜[17]。糖代謝途徑參照KEGG通路數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行分析[18]。ISfinder用于鑒定基因組序列中的轉(zhuǎn)座酶[19]。使用ACT（Artemis Comparison Tool）軟件對(duì)菌株KLDS3.1012與嗜熱鏈球菌ND03的EPS基因簇進(jìn)行分析[20]。

1.3.5 表型特征的測(cè)定

采用API CHL培養(yǎng)基和API 50CH測(cè)試條按照試劑盒說(shuō)明書測(cè)定菌株KLDS3.1012的碳水化合物利用情況。按照邵麗[21]所述的實(shí)驗(yàn)步驟，提取菌株KLDS3.1012所產(chǎn)的EPS。參考Ren Wei等[22]的方法利用DEAESepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B對(duì)EPS進(jìn)行純化。參照邵麗[21]的方法，使用高效離子交換色譜（high performance anion exchange chromatography，HPAEC）法進(jìn)行單糖組成的測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)處理

利用HPAEC測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間和峰面積，以各濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)樣品中各單糖的峰面積進(jìn)行積分，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算相應(yīng)的濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 基因組的基本特征及注釋

圖1 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012的基因組圈圖Fig. 1 Circular genome map of S. thermophilus KLDS3.1012

菌株KLDS3.1012的基因組序列已提交到GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)，登錄號(hào)為：NZ_LHSK01000000。通過(guò)CGView Server構(gòu)建其基因組圈圖（圖1）并利用PGAP流程進(jìn)行注釋，一共預(yù)測(cè)出1 992 個(gè)基因，其中包括1 705 個(gè)蛋白編碼基因，213 個(gè)假基因，15 個(gè)rRNA，55 個(gè)tRNA和4 個(gè)ncRNA。

菌株KLDS3.1012的親緣關(guān)系報(bào)告（表1）顯示，菌株KLDS3.1012與嗜熱鏈球菌ND03在基因組序列最為相似（99.572 2%），親緣關(guān)系最近，而與嗜熱鏈球菌M17PTZA496的基因組序列差異較大，對(duì)稱一致性僅為83.842 8%。

表1 嗜熱鏈球菌親緣關(guān)系報(bào)告Table 1 Genome neighbor report of S. thermophilus strains

2.2 糖代謝能力分析

2.2.1 糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)

菌株KLDS3.1012不僅含有HPr（AKL23_RS05975）和EI（AKL23_RS05970），還含有10 個(gè)糖特異性通透酶（EII）的基因，其中包括蔗糖通透酶EII的基因、PTS果糖通透酶EII、PTS甘露糖通透酶EII和PTS葡萄糖通透酶EII（表2）。然而，PTS葡萄糖通透酶EII是由假基因編碼的，而另外2 個(gè)EII基因也不完整，因此不能通過(guò)PTS轉(zhuǎn)運(yùn)葡萄糖。在菌株KLDS3.1012的基因組中鑒定到乳糖/半乳糖滲透酶（AKL23_RS06545）和葡萄糖滲透酶（AKL23_RS04150）。由于編碼ABC型糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)的基因不完整，因此ABC型糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)不能將糖轉(zhuǎn)運(yùn)到菌株KLDS3.1012的細(xì)胞質(zhì)中。綜上所述，從基因組分析，菌株KLDS3.1012可以利用蔗糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和乳糖。

表2 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012的PTS相關(guān)基因Table 2 Putative genes related to phosphotransferase system (PTS) in S. thermophilus KLDS3.1012

2.2.2 糖核苷酸的合成途徑

被轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中的糖會(huì)通過(guò)各種代謝途徑生成糖核苷酸。如圖2所示，菌株KLDS3.1012可以通過(guò)β-半乳糖苷酶（AKL23_RS06540）水解乳糖生成葡萄糖和半乳糖，一方面，半乳糖通過(guò)UDP-半乳糖的途徑（AKL23_RS06565和AKL23_RS06560）轉(zhuǎn)化生成UDP-半乳糖和Leloir途徑轉(zhuǎn)化生成葡萄糖-1-磷酸。另一方面，葡萄糖被葡萄糖激酶（AKL23_RS03575）磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸，再由磷酸變位酶（AKL23_RS03880）進(jìn)一步形成葡萄糖-1-磷酸。葡萄-1-磷酸作為重要的中間產(chǎn)物，它可以通過(guò)UDP-葡萄糖焦磷酸化酶（AKL23_RS08610）轉(zhuǎn)化成UDP-葡萄糖或通過(guò)一系列酶促反應(yīng)（AKL23_RS05870、AKL23_RS05860、AKL23_RS05865、AKL23_RS03055和AKL23_RS06935）生成dTDP-鼠李糖。編碼UDP-葡萄糖4-差向異構(gòu)酶的基因具有3 個(gè)拷貝（AKL23_RS05370、AKL23_RS06390和AKL23_RS06555），這可能與UDP-葡萄糖和UDP-半乳糖之間的相互轉(zhuǎn)換相關(guān)。甘露糖、果糖和蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞質(zhì)中后分別被磷酸化形成甘露糖-6-磷酸、果糖-6-磷酸和蔗糖-6-磷酸，三者之間可以相互轉(zhuǎn)化（AKL23_RS08125、AKL23_RS08110和AKL23_RS10365）。隨后，果糖-6-磷酸由AKL23_RS04205、AKL23_RS05900和AKL23_RS02810編碼的一系列酶轉(zhuǎn)化成UDP-N-乙酰葡糖胺。總之，從基因組分析，菌株KLDS3.1012能夠形成4 種糖核苷酸，即UDP-葡萄糖、dTDP-鼠李糖、UDP-半乳糖和UDP-乙酰葡糖胺。這些糖核苷酸可以形成EPS的重復(fù)單元，再通過(guò)EPS基因簇形成EPS。

圖2 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012糖核苷酸的合成Fig. 2 Synthesis of sugar nucleotides in S. thermophilus KLDS 3.1012

2.3 EPS基因簇的生物信息學(xué)分析

如圖3所示，菌株KLDS3.1012存在1 個(gè)EPS合成基因簇（圖4），由35 個(gè)基因組成。在該基因簇中的5'末端存在1 個(gè)嘌呤核苷磷酸化酶的編碼基因deoD（AKL23_RS05125），該基因存在于大部分EPS基因簇附近[23-24]?；駻KL23_RS05120、AKL23_RS05115、AKL23_RS05110和AKL23_RS05105分別負(fù)責(zé)編碼EPS的合成調(diào)節(jié)、鏈長(zhǎng)決定和輸出相關(guān)的保守基因。AKL23_RS05100編碼的起始糖基轉(zhuǎn)移酶，可以將UDP-半乳糖轉(zhuǎn)移到脂質(zhì)載體上。負(fù)責(zé)編碼其他糖基轉(zhuǎn)移酶的基因分別是AKL23_RS05095（假基因）、AKL23_RS05070、AKL23_RS05025（UDP-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶），AKL23_RS05020、AKL23_RS05015和AKL23_RS05000，這些糖基轉(zhuǎn)移酶編碼基因?qū)Q定EPS的單糖組成起到關(guān)鍵的作用。AKL23_RS05055編碼的翻轉(zhuǎn)酶具有將重復(fù)單位輸出的功能。AKL23_RS004985編碼的orf14.9與生長(zhǎng)功能相關(guān)，該基因也存在于其他嗜熱鏈球菌的EPS基因簇中[25]。AKL23_RS004980和AKL23_RS004960分別編碼磷酸酶和通透酶。此外，該基因簇中還存在3 個(gè)磷酸甘油酸變位酶的編碼基因（AKL23_RS004975、AKL23_RS004970和AKL23_RS004965）。

圖3 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012的EPS基因簇Fig. 3 Exopolysaccharides gene cluster in S. thermophilus KLDS3.1012

前面的基因組親緣關(guān)系研究表明，菌株KLDS3.1012與嗜熱鏈球菌ND03的基因組序列親緣關(guān)系最近，高達(dá)99.57%。通過(guò)ACT工具對(duì)2 株菌的EPS基因簇序列進(jìn)行比對(duì)分析，由圖4可知，菌株KLDS3.1012 EPS基因簇與嗜熱鏈球菌ND03的EPS基因簇具有很高的同源性，僅存在7 個(gè)倒置區(qū)域，而且中間的空白區(qū)域是由于菌株KLDS3.1012的gap造成的。

圖4 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012 EPS基因簇的比對(duì)分析Fig. 4 Alignment of exopolysaccharides gene cluster in S. thermophilus KLDS3.1012

2.4 碳水化合物代謝能力

API 50CH碳水化合物代謝結(jié)果（圖5）表明，菌株KLDS3.1012可以代謝半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、乳糖和蔗糖。雖然與其他嗜熱鏈球菌碳水化合物代謝能力存在差異，但是菌株KLDS3.1012在碳水化合物利用方面，遺傳分析與表型結(jié)果是相一致的。

圖5 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012的API 50CH發(fā)酵結(jié)果Fig. 5 Results of API 50CH test strip on S. thermophilus KLDS3.1012

2.5 EPS的單糖組成

菌株KLDS3.1012所產(chǎn)的EPS通過(guò)DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B進(jìn)行兩步純化，隨后經(jīng)三氟乙酸水解，最后用高效離子色譜測(cè)定EPS的單糖組成。由圖6可知，菌株KLDS3.1012所產(chǎn)的EPS由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖以2.6∶1.7∶1的物質(zhì)的量比組成。在單糖組成中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)UDP-N-乙酰葡糖胺，然而，生物信息學(xué)分析表明菌株KLDS3.1012可以形成UDP-N-乙酰葡糖胺并且擁有UDP-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶，這可能是由于相關(guān)基因表達(dá)水平的不足造成的，還需要進(jìn)一步的研究驗(yàn)證這一點(diǎn)。

圖6 嗜熱鏈球菌KLDS3.1012的EPS單糖離子色譜圖Fig. 6 HPAEC profile of monosaccharide composition of EPS from S. thermophilus KLDS3.1012

3 討 論

嗜熱鏈球菌作為重要的發(fā)酵劑，從功能上看，嗜熱鏈球菌在治療乳糖不耐癥、抗氧化、改善腸道免疫反應(yīng)和緩解一些癌癥方面起著至關(guān)重要的作用[26]。從代謝能力上看，嗜熱鏈球菌不僅能夠代謝碳水化合物形成乳酸，酸化乳制品，還能形成糖核苷酸產(chǎn)生EPS[27-28]。嗜熱鏈球菌所產(chǎn)的EPS具有結(jié)構(gòu)復(fù)雜和功能多樣的特點(diǎn)，因此作為近年來(lái)的持續(xù)熱點(diǎn)問(wèn)題。隨著基因組測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，研究人員可以利用生物信息學(xué)的手段充分挖掘嗜熱鏈球菌所合成的EPS的相關(guān)分子元件，為揭示嗜熱鏈球菌合成EPS的機(jī)理及調(diào)控提供基礎(chǔ)。Bolotin等[29]研究了嗜熱鏈球菌CNRZ1066和LMG13811的糖代謝相關(guān)遺傳基礎(chǔ)；Sun Zhihong等[30]完成了ND03的全基因組測(cè)序并對(duì)其獨(dú)特的EPS基因簇進(jìn)行分析；Wu Qinglong等[23]通過(guò)嗜熱鏈球菌ASCC 1275的EPS基因簇分析，發(fā)現(xiàn)該菌株高產(chǎn)EPS的相關(guān)基因；Bai Ying等[31]報(bào)道了嗜熱鏈球菌MN-BM-A01的EPS產(chǎn)量和相關(guān)基因的分析；Vendramin等[32]對(duì)8 株已完成基因組測(cè)序的嗜熱鏈球菌epsA基因的啟動(dòng)子進(jìn)行了比較基因組學(xué)分析。本研究不僅從生物信息學(xué)層面分析了菌株KLDS3.1012的糖代謝能力及EPS基因簇，同時(shí)還利用API 50CH測(cè)定該菌株的糖發(fā)酵情況及采用高效離子交換色譜法測(cè)定EPS的單糖組成，為研究EPS的基因與結(jié)構(gòu)奠定了基礎(chǔ)。

雖然嗜熱鏈球菌在糖代謝水平上相對(duì)保守，然而不同的嗜熱鏈球菌菌株的糖代謝情況并不一致，嗜熱鏈球菌基本都可以利用葡萄糖、乳糖和果糖[33]，而半乳糖、甘露糖、蔗糖、麥芽糖、蜜二糖和棉子糖的利用卻有菌株特異性[34-35]，如嗜熱鏈球菌AR333可以利用葡萄糖、乳糖和蔗糖[22]，嗜熱鏈球菌MTCC 5461可以利用17 種碳水化合物[36]，而本研究中的菌株KLDS3.1012可以利用半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、乳糖和蔗糖。能夠利用半乳糖是工業(yè)發(fā)酵菌株的優(yōu)良性狀，可以避免半乳糖的過(guò)量積累而影響發(fā)酵乳制品的質(zhì)量。此外，利用半乳糖可以提高EPS的產(chǎn)量，因?yàn)榘肴樘强梢孕纬商呛塑账帷Ｊ葻徭溓蚓a(chǎn)EPS的單糖組成及比例也都不一樣，AR333和GST-6所產(chǎn)的EPS都由半乳糖和葡萄糖組成，但是物質(zhì)的量比差異較大[5,22]，DGCC 7785所產(chǎn)的EPS由半乳糖、葡萄糖和N-乙酰半乳糖胺組成[37]，而本研究中的KLDS3.1012所產(chǎn)的EPS由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖，與嗜熱鏈球菌DGCC 7698所產(chǎn)的EPS具有相似性[37]。

糖核苷酸作為合成EPS的活性前體，是合成EPS的關(guān)鍵底物[11]。在分析菌株KLDS3.1012的糖核苷酸合成途徑中發(fā)現(xiàn)，在其基因組中，催化UDP-葡萄糖與UDP-半乳糖相互轉(zhuǎn)變的UDP-葡萄糖4-差向異構(gòu)酶的編碼基因高達(dá)3 個(gè)拷貝，利于二者的靈活轉(zhuǎn)變，以滿足形成重復(fù)單元過(guò)程中對(duì)不同糖核苷酸的需求。嗜熱鏈球菌的EPS基因簇中參與指導(dǎo)EPS重復(fù)單元合成、鏈長(zhǎng)、聚合與輸出的基因相對(duì)保守，而糖基轉(zhuǎn)移酶差別甚大，其具有多態(tài)性，目前，在51 株嗜熱鏈球菌中存在118 個(gè)糖基轉(zhuǎn)移酶，不同的糖基轉(zhuǎn)移酶可以轉(zhuǎn)移不同的糖核苷酸形成EPS的重復(fù)單元[38]，因此糖基轉(zhuǎn)移酶對(duì)EPS的結(jié)構(gòu)起到?jīng)Q定性作用。本研究中菌株KLDS3.1012的糖基轉(zhuǎn)移酶中只鑒定出半乳糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶和UDP-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶，此外，該菌株的EPS基因簇與嗜熱鏈球菌ND03的EPS基因簇具有很高的同源性。

4 結(jié) 論

從基因組水平分析，菌株KLDS3.1012具有半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、乳糖和蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)和4 種糖核苷酸（UDP-葡萄糖、dTDP-鼠李糖、UDP-半乳糖和UDP-N-乙酰葡糖胺）合成的相關(guān)基因及1 個(gè)胞外多糖合成基因簇。表型測(cè)定結(jié)果表明菌株KLDS3.1012可以利用以上6 種碳源并能形成由鼠李糖、半乳糖和葡萄糖組成的EPS。