徐斌

（盤錦市疾病預(yù)防控制中心 遼寧盤錦 124010）

1 前言

近年來，脂肪酸氯丙醇酯污染是目前社會(huì)各界關(guān)注的重點(diǎn)食品安全問題[1]，脂肪酸氯丙醇酯是氯丙醇類化合物與脂肪酸的酯化產(chǎn)物，氯丙醇類化合物包括單氯取代的3-氯-1,2-丙二醇（3-MCPD）、2-氯-1,3-丙二醇（2-MCPD）及雙氯取代的1,3-二氯-2-丙醇（1,3-DCP）、2,3-二氯-1-丙醇（2,3-DCP），其中，以3-MCPD在食品中污染量最大，毒性最強(qiáng)[2]。盡管以往臨床研究發(fā)現(xiàn)酸水解植物蛋白中含有一定的脂肪酸氯丙醇酯[3]，且在菜籽油中也檢出含有該物質(zhì)，由于脂肪酸氯丙醇酯對(duì)人體健康產(chǎn)生不良影響，因此，對(duì)脂肪酸氯丙醇酯檢測(cè)的有效性、準(zhǔn)確性、即時(shí)性就顯得十分必要[4]。本研究針對(duì)氣相色譜質(zhì)譜（GC-MS）法測(cè)定植物油中3-MCPD酯進(jìn)行探討。

2 材料與方法

2.1 主要儀器

Thermo公司TRACE 1300/TSQ 8000 Evo氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。

2.2 試劑

加拿大TRC公司3-MCPD酯；上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)的甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、甲醇鈉、氯化鈉、乙酸、苯基硼酸氯化鈉、正己烷、無水硫酸鈉等試劑。

2.3 樣品處理

選取0.1 g植物油置于試管中，然后將甲基叔丁基醚和乙酸乙酯按照8∶2的比例制成0.5 mL混合溶劑，將1 mL甲醇鈉加入其中，使用超聲波清洗器在45℃溫度中對(duì)溶液混合10 min。然后將3 mL正己烷、氯化鈉和乙酸混合溶液與甲醇鈉進(jìn)行中和，在充分混合后在室溫下靜置7～9 min，待溶液出現(xiàn)明顯分層后將有機(jī)層移出。加入苯基硼酸溶液250 μL，混合均勻后在80℃下進(jìn)行20 min左右的衍生反應(yīng)，待反應(yīng)結(jié)束后，再次加入1 mL正己烷并混合均勻，然后靜置分層，將上清液移出并置入1.5 g無水硫酸鈉試管中，重復(fù)混合、分層、取上清液1 μL，然后使用GC-MS進(jìn)行檢測(cè)。

2.4 GC-MS檢測(cè)條件

GC條件中，初始溫度為80℃，升溫程序中預(yù)熱1 min，然后以每分鐘升高10℃的方式升溫至190℃，然后以每分鐘升高40℃的方式升溫至300℃，維持5 min即可。MS條件中，傳輸線溫度控制在270℃，燈絲電流50 μA，離子源溫度300℃，質(zhì)譜的采集時(shí)間為 5～30 min。

3 結(jié)果

3.1 方法線性范圍和檢出限

本方法在0.02～2.0 mg/L線性范圍內(nèi)曲線相關(guān)系數(shù)為 0.9993，檢出限為 100 μg/kg。

3.2 方法精密度和準(zhǔn)確度

以橄欖油為基質(zhì)，分別加入50μL、100μL、200μL標(biāo)準(zhǔn)使用液（10 mg/L），方法精密度為2.9%～6.5%，回收率為83.6%～103.2%，具體測(cè)定結(jié)果如表1所示（n=6）。

表1 具體測(cè)定結(jié)果（橄欖油）

3.3 結(jié)果分析

使用苯基硼酸溶液衍生反應(yīng)后GC-MS法對(duì)超市購(gòu)買的多種植物油中的脂肪酸氯丙醇酯進(jìn)行分析和檢測(cè)，結(jié)果顯示，在橄欖油、花椒油、棕櫚油、芝麻油、大豆油、二級(jí)棉油、菜籽油中旗實(shí)測(cè)含量分別為2 370 μg/kg、3 000 μg/kg、50 690 μg/kg、11 200 μg/kg、4 590μg/kg、6 080μg/kg、10 000 μg/kg。根據(jù)研究結(jié)果可以了解，植物油中脂肪酸氯丙醇酯含量由高至低分別為棕櫚油、芝麻油、菜籽油、二級(jí)棉油、大豆油、花椒油、橄欖油，其含量在 2 370～50 690 μg/kg。

以橄欖油為基質(zhì)，進(jìn)行3個(gè)水平的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，各加標(biāo)水平重復(fù)實(shí)驗(yàn)6次，方法精密度為2.9%～6.5%，回收率為83.6%～103.2%，，精密度和準(zhǔn)確度滿足分析需要。

4 結(jié)論

隨著近幾年科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展和進(jìn)步，經(jīng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)，大多食品當(dāng)中都含有不同程度的脂肪酸氯丙醇酯[5]，尤其是食物油中脂肪酸氯丙醇酯的含量更高，根據(jù)相關(guān)研究顯示可知，成人或幼兒體內(nèi)含有超過5倍以上的脂肪酸氯丙醇酯[6]，極有可能對(duì)人體健康造成影響，患病幾率增加。以往實(shí)驗(yàn)研究多使用酸水解植物蛋白進(jìn)行衍生反應(yīng)，該種衍生反應(yīng)下，GC-MS法也存在一定的缺點(diǎn)，如水解過程耗費(fèi)的時(shí)間相對(duì)較長(zhǎng)，易導(dǎo)致脂肪酸氯丙醇酯被降解，影響檢測(cè)靈敏度。另外，正己烷在衍生反應(yīng)后對(duì)其產(chǎn)物的萃取率相對(duì)較低，也在一定程度上影響了檢測(cè)靈敏度，加之儀器污染較大，使得后續(xù)儀器維修頻繁，不僅花費(fèi)大量的費(fèi)用，而且影響檢測(cè)效率，但使用苯基硼酸溶液進(jìn)行衍生反應(yīng)，其儀器污染較輕、檢測(cè)靈敏度更高，結(jié)果更加準(zhǔn)確，使其應(yīng)用頻率越來越高。本研究使用苯基硼酸溶液衍生反應(yīng)后GC-MS法對(duì)7種不同植物油所含有的脂肪酸氯丙醇酯進(jìn)行檢測(cè)，該種方法下檢測(cè)靈敏度較高、污染小，極大地減少了樣品前期處理復(fù)雜的弊端，對(duì)有機(jī)溶劑的消耗量較少，受其他因素影響較小，能夠簡(jiǎn)單、直接地檢測(cè)植物油中脂肪酸氯丙醇酯含量。

綜上所述，GC-MS法的檢測(cè)靈敏性較高，結(jié)果準(zhǔn)確，樣品前期處理簡(jiǎn)單，有機(jī)溶劑消耗量少，避免了儀器污染，可在衛(wèi)生理化檢測(cè)中予以廣泛應(yīng)用。